寻常型银屑病中P38 MAPK 信号通路的调控机制与中药的干预作用

张亚楠　于亚廷　杜鑫

摘要：在寻常型银屑病（psoriasis vulgaris）的发展过程中，p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路与其发病息息相关。一方面，应激刺激、促炎细胞因子、脂多糖等多种因素在上游诱导p38MAPK信号通路的激活；另一方面，被激活的p38MAPK 信号通路通过诱导角质形成细胞增殖，促进炎症介质表达，干预细胞因子产生等途径参与寻常型银屑病的发病。中药通过多条途径对p38MAPK 信号通路进行干预，其中包括抑制炎症介质的表达、调节磷酸化p38MAPK（phosphorylated p38MAPK，p-p38MAPK）的表达及减少血管内皮因子的表达等。

关键词：寻常型银屑病；中药；p38 丝裂原活化蛋白激酶；信号通路

中图分类号：R275 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2016）08-0088-03

银屑病（psoriasis）是临床上常见的一种慢性炎症性复发性皮肤病，以角质细胞过度增殖、炎症细胞浸润、真皮血管新生为主要特征[1]。其中，寻常型银屑病（psoriasis vulgaris）是银屑病最常见的临床类型，且目前尚无有效的治愈方法。随着人们对银屑病发病机制的进一步探索，许多信号通路已经成为银屑病新的治疗靶点。其中，丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路作为重要的信号转换通道，发挥着诱导促炎基因表达、趋化促炎因子聚集、激活炎症反应的作用[2]。P38 MAPK 信号通路是 MAPK 家族控制炎症反应最主要的成员，在银屑病发病过程中起重要作用。另有研究提出，一些中药提取物及中药复方可以通过调控p38通路，延缓寻常型银屑病的进展。

1 P38 MAPK信号通路

MAPK信号通路是一类广泛存在于动植物细胞内的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，具有将细胞外的刺激信号转导至细胞内，并引起细胞应激、分化、增殖、凋亡的作用[3]。在真核细胞中已明确了4种MAPK 亚型：p38MAPK，细胞外信号调节激酶（Extracellular signal-regulated kinase，ERK）1/2，c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinases，JNK）及 ERK5[4]。其中，p38 MAPK 是 MAPK 通路的主要途径之一。

11 p38的发现与分布 p38 MAPK通路最初是从脂多糖（lipopo-lysaccharides，LPS）刺激的单核细胞中分离得到，包含4个亚型：p38α，p38β，p38γ，p38δ[5]，其中，p38α、p38β在大多数的组织中表达，而 p38γ和p38δ分别在骨骼肌中和肺、肾组织中表达较多。4个亚型在调节上游激酶、激活下游底物及反馈应激刺激等方面各有不同的特点。于晓静[6]借助Western blot法观察寻常型银屑病患者皮损处、非皮损处、正常人皮肤p38分布情况，结果表明：寻常型银屑病患者皮损处磷酸化p38MAPK（phosphorylated p38MAPK，p-p38MAPK）水平比非皮损处明显增高，且主要表达于角质形成细胞（KC）的胞核中，然而在非皮损处和正常人表皮中则主要在KC胞浆中表达。Johansen C等[7]发现p38MAPK的p38α、p38β、p38δ 3种不同亚型的活性在银屑病皮损区要明显高于非皮损部位，经治皮损消退后，p38MAPK的活性可恢复正常。AnneT等[8]的研究发现，P38在银屑病皮损的棘层及颗粒层均有表达，而在患者非皮损及正常人的表皮中，则只在颗粒层表达。

12 p38MAPK 信号通路的转导途径 p38MAPK信号通路的转导途径具有三级酶联反应的特征[9]：激活因子作用于MAPK 激酶（MKKK），激活MAPK激酶（MAPKK 或 MKK），最终产生MAPK，该酶联反应启动后，不仅能激活转录因子，还能调控特定的基因表达。细胞因子、炎症因子、激素以及各种应激刺激（如放射线、紫外线、热休克、高渗状态等）都可以刺激细胞，激活该酶联反应。活化后的 p38通路可以把细胞外的刺激信号转导进入细胞核内，调控核转录因子，从而影响炎性细胞因子，如肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素（IL）等的合成，并参与炎症细胞的活化[10]。

2 p38MAPK信号通道与寻常型银屑病的相关性

21 影响p38MAPK信号通路激活的因素 在寻常型银屑病的发展过程中，应激刺激、促炎细胞因子（IL-6，TNF-α）、脂多糖（LPS）等因素可以在上游诱导p38MAPK通路的激活。首先，p38MAPK信号通路被称为“应激诱导”的MAPK，可被多种应激刺激活化[11]。其中紫外线可通过诱导细胞因子来激活p38MAPK通路的信号转导[12]。Kim等[13]用紫外线照射无毛鼠，结果显示：紫外线可以通过激活p38MAPK通路，诱导IL-6等炎症因子的表达。这可能是银屑病的发病诱因之一。然而，紫外线还可以通过细胞凋亡、免疫抑制等途径对寻常型银屑病起到治疗作用[14]，而免疫及细胞凋亡又与p38信号通路关系密切，从p38MAPK信号通路角度出发，探讨紫外线与寻常型银屑病的微观联系，可以为银屑病的诊疗提供新的思路。其次，TNF-α可激活P38转录因子激酶，使其磷酸化，并刺激白介素类细胞因子，对银屑病表皮的增殖发挥重要作用[15]。也有学者认为TNF-α能通过激活P38MAPK通路，促进表皮更替加速的相关疾病的特异角蛋白基因表达，促进KC增殖[16]。最后，p38激酶亦可被LPS激活，从而刺激多种蛋白激酶、转录因子的活性，这对细胞因子的产生起着关键作用[17]。汪爱达等[18]认为在上游LPS介导的跨膜信号的刺激下，巨噬细胞内的p38MAPK通路被明显激活，进而启动下游的酶联反应，发生细胞信号由外向内移位，从而引发一系列炎症因子的转录。

22 p38MAPK 信号通路激活对寻常型银屑病的作用 在寻常型银屑病的发展过程中，活化的p38MAPK信号通路可以通过促进KC的增殖，诱导炎症介质的表达，调控细胞因子的产生而致病。首先，促进KC增殖。KC的过度增殖是导致该病发生的重要病因之一。有研究表明：与正常皮肤和银屑病非皮损区比较，银屑病皮损区KC的胞核中p-p38MAPK呈高表达[6]。黄文娟等[19]采用角四甲基偶氮唑盐（MTT）法发现：KC使用 p38MAPK 抑制剂（SB203580）干预后，p-p38MARK 的表达显著降低；同时SB203580也具有抑制KC增殖的作用，作者认为其机制是通过抑制 P38MAPK 通路的激活，从而达到延缓KC增殖的作用。其次，诱导炎症介质的表达。王毅鑫等[20]通过采集不同创伤程度患者不同时间段的外周血，检测白细胞中p-p38MAPK水平及血液中IL-6、TNFα水平。结果显示：p38MAPK通路的活化程度与IL-6、TNFα水平呈正相关，研究者认为p38MAPK通路的活化可以引起炎症因子表达的升高，表明p38MAPK通路在炎症反应中的作用显著。秦永伟等[21]采用LPS刺激大鼠雪旺氏细胞，检测细胞中P38激酶活性，结果发现p38MAPK磷酸化水平在刺激15～30 min后达到高峰，而炎症介质细胞TNF-α、TNF-αmRNA的表达也显著升高；使用 p38MAPK 抑制剂后，p38活性明显下降，TNF-α、TNF-αmRNA表达也随之下降。作者认为，LPS刺激雪旺氏细胞后，激活P38磷酸化，并促进TNF-α的表达。最后，影响下游细胞因子的产生。新血管的形成是银屑病发病过程中的基本病理变化。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是调节这一过程至关重要的细胞因子。有研究[22]发现转化生长因子β可通过诱导大鼠主动脉平滑肌细胞中p38MAPK磷酸化，从而刺激VEGF的合成，促进血管新生。

3 中药对p38MAPK信号通路的干预作用

31 抑制炎症介质表达 TNF-α、IL-1β作为寻常型银屑病发病过程中重要的炎症介质，可以在上游激活 p38MAPK 通路，促进皮损区的炎性损伤。邱丽君等[23]为了观察苦参煎对p38MAPK通路的调控，采用ELISA法检测188只Webster大鼠血清中P38MAPK的含量，作者发现：苦参煎有着与SB203580相同的功效，即对P38MAPK的显著抑制作用，这种作用能减轻炎性细胞释放反应，防止炎性介质对细胞造成损害。

32 调节磷酸化p38MAPK表达 p-p38MAPK作为p38MAPK 信号通路中关键的信号分子，其表达的多少标志着该通路的活化程度[24]，因此抑制p-p38MAPK就可以调节p38MAPK通路活性，从而减少炎症反应，并改善皮肤损害。孙创斌等[25]采用Western blot法检测苦参碱对HaCaT细胞表达p-p38MAPK的影响。结果显示，与空白对照组比较，IL-17能使HaCaT细胞中p-p38MAPK的表达上升；而经苦参碱处理后，p38MAPK的磷酸化水平则明显降低；IL-17与苦参碱合用后，可明显抑制p-p38MAPK的表达。作者认为，IL-17可促进p-p38MAPK的表达，而苦参碱则可抑制这一途径，从而对抗IL-17升高p38磷酸化水平。总之，苦参碱可通过抑制IL-17R的表达，调控p-p38MAPK水平而发挥其抗炎作用。

33 减少血管内皮因子的表达 许颖智等[26]为研究四妙勇安汤对血管新生的影响及机理，将40只兔子随机分为辛伐他汀组、四妙勇安汤组、对照组、模型组，采用免疫组化法、RT-PCR 法分别检测P38 MAPK、VEGF、VEGF m RNA 的表达。结果表明：四妙勇安汤具有抑制P38 MAPK通路活性的作用，并且能抑制VEGF 蛋白和基因的表达。这可能是其抑制血管新生的机制之一。

4 小结

综上所述，在寻常型银屑病的发展过程中，p38MAPK信号通路占有重要地位。一方面，应激刺激、促炎细胞因子、脂多糖等多种因素在上游诱导p38MAPK通路的激活；另一方面，被激活的p38MAPK 信号通路通过诱导KC增殖，促进炎症介质表达，干预细胞因子产生等途径参与寻常型银屑病的发病。中药对p38MAPK 通路的干预是通过多条途径实现的，主要包括抑制炎症介质的表达、调节p-p38MAPK的表达、减少VEGF的表达等。寻常型银屑病的传统西药治疗多以激素、免疫抑制剂等为主，但由于银屑病的慢性反复性的特点，这些药物的副作用逐渐凸显出来，因此寻找新的替代疗法刻不容缓。有研究[27]表明 p38 MAPK通路可能促进寻常型银屑病血热证患者血清中Th17 细胞与其相关的转导因子的表达，这可能是寻常型银屑病（血热证）辨证论治的科学依据之一。但对于该信号通路与寻常型银屑病中医证型的关系的研究仍较少。因此，将中医证型与信号通路研究相结合，明确中医药治疗寻常型银屑病的作用靶点，为临床治疗提供新的思路。

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（收稿日期：2016-06-06）