T-SPOT．TB在骨与关节结核鉴别诊断中的价值*

苗瑞瑞，张文龙，鲍玉成，邱南海，高　巍

(1．天津中医药大学; 2．天津市海河医院，天津　300350)



T-SPOT．TB在骨与关节结核鉴别诊断中的价值*

苗瑞瑞1，2，张文龙2，鲍玉成2，邱南海2，高巍2

(1．天津中医药大学; 2．天津市海河医院，天津300350)

摘要:目的:探讨结核感染T细胞斑点实验(T-SPOT．TB)在骨与关节结核鉴别诊断中的应用价值。方法:通过收集我院骨科2012年3月至2015年6月收治的骨结核患者及非骨结核的骨质破坏患者，统计T-SPOT．TB结果的灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率，同时统计结核抗体上述指标作为对比参考。结果:在本组病例中TSPOT．TB试验灵敏度为91．36%，特异度为100%，经统计学处理P＜0．05，T-SPOT．TB检测优于结核抗体检查。结论: T-SPOT．TB检测法对肺外结核病诊断特异性高，对于骨与关节结核病的诊断意义重大，不失为一种可靠的检查手段，但目前价格较贵，不建议作为结核病常规筛查，应该应用于疑难病例的鉴别诊断中。

关键词:T-SPOT．TB;骨结核;鉴别诊断

骨与关节结核是较为常见的肺外结核，其早期临床表现缺乏特异性，误诊和漏诊常见，患者常因错过最佳治疗时机而导致病情延误，对患者的健康造成严重的损伤，致畸致残率高［1］，目前尚没有一种检查手段可以快速、准确的做出诊断。结核感染T细胞斑点实验(T-SPOT．TB)作为近年来一种新型的检测手段广泛应用于结核病的诊断中，本研究回顾我院骨科疑似骨与关节结核患者检查T-SPOT．TB结果进行总结研究，评价T-SPOT．TB实验在骨与关节结核鉴别诊断中的价值。

1　资料与方法

1．1一般资料通过收集、整理我院骨科2012年3月至2015年6月收治的骨质病理性破坏的患者共93例，其中男53例，女40例，年龄21～74岁。所有病例均已确诊，其中85例术后病理检查确诊; 8例未手术患者根据症状、体征、影像学检查、其他化验检查及抗结核药物试验性治疗后确诊。

1．2 T-SPOT．TB实验本组病例均为晨起空腹抽外周静脉血化验检查，采血后2 h内常规分离PBMC，在活化后预包被好抗IFN-γ抗体的平板中，每孔加入100 μL，每孔的细胞浓度为2×105cells。阴性对照孔中不加入任何刺激物。阳性对照孔加入5 μL植物血凝素(PHA)，终浓度为5 μg·mL－1。实验孔分别加入结核特异抗原A(ESAT-6)和B(CFP-10)，终浓度为5 μg·mL－1。然后盖上板盖，放入37℃，5%CO2培养箱培养16～24 h。第2天洗板，加入检测抗体孵育1 h。洗板后再加入亲和素孵育1 h。最后加入显色剂显色。待显色洗板后晾干，ELISPOT斑点计数。并记录斑点的各种参数，做统计分析，A 或B任一个＞24 SFCs·10－6提示有结核病，判定为阳性结果;两项结果均＜24 SFCs·10－6提示无结核感染，判定为阴性结果。

1．3评价指标将灵敏度、特异度、假阳性率和假阴性率作为诊断试验临床效果的评价指标;同时统计结核抗体检查结果作为对比指标。

2　结果

2．1临床确诊结果此93例病例均为菌阴患者，肺部症状不明显，无明显咳嗽及咳痰。81例确诊为骨结核，其中19例为关节结核，62例为脊柱结核; 5例确诊为腰椎布氏杆菌性脊柱炎，7例确诊为脊椎转移瘤。

2．2 T-SPOT．TB试验结果与最终确诊结果比较

T-SPOT．TB试验灵敏度为91．36%，特异度为100%，假阴性率为8．64%，假阳性率为0，约登指数为91．36%，见表1。

2．3结核抗体试验结果与最终确诊结果比较结核抗体试验灵敏度为65．43%，特异度为83．33%，假阴性率为34．57%，假阳性率为16．67%，约登指数为48．76%，见表2。

表1　T-SPOT．TB试验结果

表2　结核抗体试验结果

3　讨论

结核病是全球严重的公共卫生问题之一，据WHO估计，全球有约20亿人感染结核分枝杆菌，每年有约200万人死于结核［2］。近年来由于人口大规模流动，结核病的发病率有上升趋势。结核菌可侵犯全身各个系统，导致临床表现复杂多变，尤其是肺外结核常因病情隐匿或表现不典型，极易误诊漏诊［3］。

机体感染结核分枝杆菌后，体内存在特异的效应T淋巴细胞，其在体外再次受到结核菌特异抗原的刺激时，会分泌释放IFN-γ，通过检测IFN-γ的水平或计数分泌IFN-γ的外周血单个核细胞(PBMC)，可以了解机体在感染结核分枝杆菌后的免疫应答状态，从而发现结核分枝杆菌的潜伏感染、辅助诊断结核病。对于结核菌特异性抗原的选定是试验中至关重要的，使用ESAT-6(早期分泌靶向抗原6 000蛋白early secretory antigenic target 6)和CFP-10(培养滤过蛋白10 culture filtrate proten 10)作为抗原，得到了较好的效果［4］。

近年来T-SPOT．TB检查被大家越来越重视，文献报道其灵敏度可高达89．0%和特异度高达98．1%［5］，对活动性结核病的诊断有很大价值。Mahairas等在1996年发现致病性结核分枝杆菌中一段名为“RD1”的基因编码产生结核菌特异度抗原ESAT-6和CEP-10的编码基只因存在于致病性分枝杆菌中，而不存在于大多数环境分枝杆菌和卡介苗中，因此酶联免疫斑点试验的特异度较高，不受大多数环境分枝杆菌感染和卡介苗接种的影响［6］。同时文献表明血T-SPOT．TB试验在艾滋病合并肺结核患者中敏感性及特异性较高，临床上对疑似肺结核的艾滋病患者进行T-SPOT．TB检测有利于疾病诊断及鉴别诊断［7］，提示T-SPOT．TB试验受机体免疫力影响很小。本组病例提示T-SPOT．TB特异性高达100%，可能与非结核病例较少有关，但与文献报道相近，误诊率极低。灵敏度仅为91．36%，从而提示漏诊率很低。同时对比两种检测方法，TSPOT．TB检查在灵敏度、特异度、约登指数方面均优于结核抗体实验，说明T-SPOT．TB检查对骨与关节结核鉴别诊断有很大帮助。

骨结核的诊断目前尚无一种特异性检查能完全确诊，骨结核的诊断与鉴别诊断要结合症状、体征、影像学检查、化验检查、流行病学检查综合考虑，特别是不能忽略病史及查体，结合CT及MRI表现，大部分患者可得到正确诊断，部分患者经试验性抗结核药物治疗可确诊，T-SPOT．TB是一项新型的检查手段，对骨与关节结核疑难病例鉴别诊断意义重大，

但价格较贵，不建议作为常规检查。同时T-SPOT．TB是一种定性诊断检查，对既往有明确结核病史，新发骨关节疾病病灶，临床中要慎重考虑，需要结合临床其他表现做出正确诊断，注意既往结核病与新发肿瘤鉴别，特别是老年患者。

参考文献:

［1］刘纯成，刘林飞，李桂珍，等．T-SPOT．TB在结核感染诊断中的应用研究［J］．中国卫生检验杂志，2015，8 (25) :．2644－2646．

［2］WHO．Global Tuberculosis Control Surveillance，Plann ing，Financing［C］．Geneva: WHO，2007．

［3］李宝田，焦云龙，孙文星．T-SPOT．TB检测在脊柱结核诊断中的应用［J］．中国骨科临床与基础研究杂志，2015，4(7) : 74－78．

［4］刘国威，梅早仙．γ-干扰素释放试验在肺外结核病诊断中的临床意义［J］．吉林医学，2012，4(33) :2056－2058．

［5］LeeJY，ChoiHJ，ParkIn，et al．Comparison of two commercial interferon-gamma assays for diagnosing Mycobacterium tuberculosis infection［J］．Eur Respir J，2006，28(1) :24－31．

［6］成诗明，杜听，徐敏．1992－2004年全国儿童新发现的痰涂片阳性肺结核监测与分析［J］．中华儿科杂志，2009，52(4) : 257－261．

［7］童学成，陈国春，濮翔科，等．结核感染T细胞斑点试验对艾滋病合并肺结核的临床诊断价值［J］．中华医院感染学杂志，2014，24(14) : 3632－3634．

Value of T-SPOT in Differential Diagnosis on Osteoarticular TB

MIAO Rui-rui1，2，ZHANG Wen-long2，BAO Yu-cheng2，QIU Nan-hai2，GAO Wei2
(1．Tianjin university of Traditional Chinese Medicine; 2．Tianjin Haihe Hospital，Tianjin 300350)

Abstract:Objective: To discuss the value of T-SPOT in differential diagnosis on osteoarticular TB．Method: The sensitivity，specificity，false positive rate and false negative rate of T-SPOT in TB was got By collecting and analysing cases of patients admitted in our hospital with bone destruction due to tuberculosis and non-tuberculosis during March 2012 June 2015．The pertinent above indications of TB-Ab were recorded for comparison．Results: In whole cases，the sensitivity of T-SPOT-TB test was 91．36%，with the specificity rate of 100%．The pertinent statistic results showed the superiority of T-SPOT-TB test to TB-Ab(P＜0．05)．Conclusion: Of the high diagnosis specificity，T-SPOT TB test is meaningful in diagnosis of osteoarticular TB，which can be regarded as a reliable means of inspection．For its expensive spending，it is recommended in the differential diagnosis of difficult cases other than as a routine inspection．

Key words:T-SPOT-TB; bone tuberculosis; differential diagnosis

(收稿日期:2015－11－22 ) (责任编辑:敖慧斌)

*通讯作者:张文龙，男，主任医师，硕士研究生导师。E-mail: 18920180058@189．cn

DOI:10．3969/j．issn．1001－5779．2016．01．022

中图分类号:R529．2

文献标志码:A

文章编号:1001－5779(2016) 01－0076－03