美藤果油增强免疫力的试验研究

◎李 慧，金 红，王 晔，苏风龙

（北京颐兴堂生物科技有限公司，北京 100022）

美藤果产自于南美洲印加地区，在该地区已有千百年食用美藤果的历史[1]。美藤果油是经美藤种子榨取提炼出的一类植物油，美藤果油中富含大量的不饱和脂肪酸、维生素等营养物质[2]。在美藤果油中不饱和脂肪酸的比例超过90%以上，其中ω-3与ω-4的比例为1∶0.75，与人体的吸收比例非常接近。相关研究指出不饱和脂肪酸与免疫机能有关[3]，但是有关美藤果油与免疫能力的相关报道较少，为了探究美藤果油与免疫能力的关系，做了相关研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 试验动物及分组

雄性健康Wistar大鼠20只，雄性高血脂Wistar大鼠20只，体重（200±10）g，由北京市第一医院动物实验中心提供。试验前，为使大鼠适应环境将大鼠放在实验室饲养一周，随后按照随机法将健康Wistar大鼠分为实验1组和对照1组，将雄性高血脂Wistar大鼠分为实验2组和对照2组，每组10只。

1.2 饲料配制

对照1、2组大鼠使用普通大鼠饲料，实验1、2组大鼠在对照组基础上，每百克饲料中混合7 g美藤果油（购自于西双版纳印奇生物资源开发有限公司，批号：20140204）。

1.3 试验方法

1.3.1 试验仪器

24、96孔培养板（上海卧宏生物科技有限公司），高速离心机（张家港市中沃机械有限公司），全自动生化仪（普朗医疗器械有限公司）。

1.3.2 试验方法

4组大鼠连续饲养10周。饲养结束后，将大鼠禁食12 h，无菌取出脾脏分离获得脾淋巴细胞。

一是测定脾淋巴细胞增殖活性[4，5]。将在无菌条件下取出的脾脏碾碎并制作成单个细胞悬液，将细胞数调整为4×109个/L。将调整后的细胞悬液加入96孔平底板进行培养，每孔加入200 μL，共加入8孔，将8孔分为阳性孔和阴性孔，其中阳性孔4孔，其中每孔加入25 μL浓度为50 mg/L的刀豆素（ConA），阴性孔也4孔则不加入ConA，加好后的平地培养板置于CO2培养箱，在37 ℃温度下培养48 h。在培养结束前4 h，将10 μL浓度为5 g/L的MTT10加入96孔平底培养板的每个孔中，在培养结束前2 h，将100 μL缓冲液加入各个孔中用于测定光密度，加完后开始测定光密度。其中，T淋巴细胞的增殖能力用刺激指数（Stimulation Index，SI）来反映。SI=ConA刺激的阳性孔的平均光密度值／ConA未刺激的阴性孔的平均光密度值。

二是白介素-2、4（interleukin，IL-2，IL-4）测定。将淋巴细胞悬液分别加入24孔平底培养板，每孔1 mL，随后再向每孔加入100 μL浓度为50 mg/L的ConA，放入CO2培养箱中培养，温度37 ℃，培养时间48 h。培养结束后，将培养板中的淋巴细胞上清液在无菌条件下吸取后，载分别装入0.5 mL EP管中，置入-20 ℃的冰箱中保存，用于IL-2和IL-4含量的检测。采用ELISA检测试剂盒检测检测IL-2和IL-4的含量。

1.4 数据记录与统计分析

饲养期间观察4组大鼠的活动情况及死亡情况并记录；对4组大鼠淋巴细胞的增殖能力用刺激指数及白介素-2、4结果进行记录。

本次研究所获得数据均采用SPSS20.0进行处理，组件比较采用t检验，以（x±s）表示，以P＜0.05为统计学存在差异。

2 结果

2.1 观察结果

在饲养期间，4组大鼠均未出现死亡，且通过观察发现实验1组大鼠活力及精力均强于其他大鼠，且对照2组大鼠的精力及活力最差。

2.2 小鼠脾淋巴细胞增殖活性和白介素含量对比

实验1组淋巴细胞刺激指数、IL-2、IL-4的含量显著高于实验2组、对照1组及对照2组大鼠（P＜0.05），实验2组与对照1组则不存在显著性差异（P＞0.05），对照2组大鼠显著低于实验2组（P＜0.05），详见表1。

表1 鼠脾淋巴细胞增殖活性和白介素含量对比表（x±s）

3 讨论

美藤果油是一种对人类健康十分有益的可食用植物油，而且也是世界上质量最佳的食用油之一[6]。相关报道指出[6]，美藤果油中含有丰富的蛋白质及不饱和脂肪酸，其中蛋白质含量远远高于花生中蛋白质的含量，而不饱和脂肪酸的含量仅仅低于核桃中不饱和脂肪酸的含量。刘付英[2]曾对美藤果油中不饱和脂肪酸的含量进行过分析，发现美藤果油中不饱和脂肪酸含量高达92.46%，其中亚麻酸的含量高达45.62%，进一步证明了美藤果油的营养价值。吴争[7]等人曾对美藤果油做过相关安全性评价，结果发现，在实验室条件下，并未观察到美藤果油的不良生物学影响，说明美藤果油是一类无任何毒副作用的食品油。此外，还有学者就美藤果油的功效进行过研究，结果显示美藤果油具有良好的降脂作用[8]，这可能与其含有丰富的不饱和脂肪酸有关，因为不饱和脂肪酸具有很好的降脂作用[9]，所以美藤果油也具有良好的降脂作用。研究结果还显示，美藤果油具有保护上皮细胞完整的作用，笔者认为这与其含有丰富的蛋白质存在关系。

但是，目前临床上有关美藤果油增强免疫力的报道较少，为了探究美藤果油与免疫力的关系，笔者做了相关研究，结果显示4组大鼠均未出现死亡，且实验1组大鼠活力及精力均强于其他大鼠，对照2组大鼠的精力及活力最差；实验1组淋巴细胞刺激指数、IL-2、IL-4 的含量显著高于其他组（P＜0.05），实验2组与对照1组则不存在显著性差异（P＞0.05），对照2组大鼠则显著低于实验2组（P＜0.05）。本次研究结果说明高血脂大鼠的免疫力低于健康大鼠，但是在喂养添加美藤果油的饲料后，健康大鼠及高血脂大鼠的免疫力均有提高，充分证实了美藤果油具有提高免疫力的作用。

综上所述，美藤果油具有增强免疫力的功能，值得推广食用。

参考文献：

[1]Guillen MD，Ruiz A，Cabo N，et al. Characterization of Sachainchi（Plukenetia volublilisL. ）oil by FTIR spectroscopy and H-1NMR.Comparison with linseed oil[J]. J Am Oil Chem Soc，2003，80（8）：755-762.

[2]刘付英.美藤果及美藤果油的理化性质和油脂的脂肪酸组成分析[J].中国油脂，2014，39（7）：95-97.

[3]郭 艳，苏宜香.多不饱和脂肪酸对小鼠血脂和免疫功能的影响[J].中国公共卫生，2003，19（11）：1341-1342.

[4]Morten BH，Svend EN，Kurt B. Re-examination and further development of a precise and rapid dye method for measuring cell growth/cell kill[J]. J of Immunological Methods，1989，119（2）：203-210.

[5]林忠宁，董胜璋，董书芸，等.MTT法检测T淋巴细胞增殖功能的方法学探讨与应用[J].中国卫生检验杂志，2000，10（1）：8-10.

[6]蔡志全.特种木本油料作物星油藤的研究进展[J].中国油脂，2011，36（10）：1-6．

[7]吴 争，丁 晟，蔡 宏，等.南美油藤果油的急性、亚急性及遗传毒性的实验研究[J].科技广场，2012，25（12）：206-208.

[8]李 伟，王林元，王景霞，等.美藤果油对高脂血症大鼠血脂的影响及对血管内皮细胞的保护作用[J].世界中医药，2015，10（8）：1227-1230.

[9]陈彩锐，李丽华，韩美娜，等.ω-3多不饱和脂肪酸血脂调节研究动态[J].食品安全导刊，2015，9（27）：170-172.