CyclinD1、p73和p27在结直肠癌组织中的表达及临床意义

徐惠敏曹绍歧



CyclinD1、p73和p27在结直肠癌组织中的表达及临床意义

徐惠敏曹绍歧

【摘要】目的考察cyclinD1、p73和p27在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取60例结直肠癌患者肿瘤组织和30例正常组织中cyclinD1、p73和p27的表达水平及与临床指标的相关性。结果cyclinD1蛋白在结直肠癌组织中的表达率为68.3%(41/60)显著高于正常组织中的23.3% (7/30) (P＜0.05)，其阳性率与侵润深度、淋巴转移和dukes分期相关(P＜0.01)。p73蛋白在结直肠癌组织中的表达率为58.3% (35/60)显著高于正常组织中的3.3%(1/30) (P＜0.01)，其阳性率与分化程度、淋巴转移和dukes分期相关(P＜0.05)。p27蛋白在结直肠癌组织中表达率为53.3%(32/60)，显著低于正常组织中的80.0% (24/30) (P＜0.05)，其阳性率与分化程度、淋巴转移和dukes分期相关(P＜0.01)。结论cyclinD1、p73和p27蛋白在结直肠癌组织中的表达具有特异性，对三者进行检测有助于预后判断。

【关键词】结直肠癌; cyclinD1; p73; p27

结直肠癌是发病率最高的消化道肿瘤，其发病率为所有肿瘤发病率前三，致死率为前五，是影响居民健康的重要疾病［1］。与其他肿瘤疾病类似，结直肠癌近年来的发病率处于上升趋势［2］。原癌基因和抑癌基因的突变和表达对于结直肠癌的发生具有重要影响［3］。CyclinD、p73和p27蛋白均是细胞周期调控蛋白，参与了多种癌症的发生和发展［4，5］。因此，考察三者在结直肠癌组织中的表达水平及与临床特征的相关性有助于我们加深对结直肠癌发生和发展的了解。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2011年1月至2014年1月手术治疗的结直肠癌患者60例，其中男35例，女25例;年龄39～80岁，平均年龄(55.3±8.9)岁。Duke分期，A期7例、B期10例、C期27例、D期16期。所有患者未行放疗或化疗。

1.2方法采用鼠抗人cyclinD1、p73和p27免疫组化多克隆抗体，并使用由上海生工公司提供的免疫组化SP超敏试剂盒，严格依照试剂盒说明书进行操作。以胞内出现棕黄色颗粒为阳信号，每次染色均设置阴性及阳性对照。高倍镜下阳性细胞数百分比记分:阳性细胞5%～25%记1分，26%～50% 2分，51%～75%3分，＞75%4分。染色记分:无染色或与背景相同记0分，淡黄色颗粒为1分，棕黄色为2分、黄褐色为3分。两项结果相乘分数大于或等于两份为阳性。

1.3统计学分析应用SPSS 19.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1三种蛋白在癌组织和健康组织中的表达差异在结肠癌组织中，p27蛋白、p73蛋白及cyclinD1蛋白的表达率分别为53.3% (32/60)、58.3% (35/60)、68.3%(41/60) ;在正常组织中，p27蛋白、p73蛋白及cyclinD1蛋白的表达率分别为80.0% (24/30)、3.3% (1/30)、23.3%(7/30)。2组比较，p27蛋白、p73蛋白及cyclinD1蛋白的表达率差异有统计学意义(P＜0.05)。见图1～3。

图1　p27在结肠癌腺瘤中的阳性表达(免疫组化×100)

图2　p73在结肠癌腺瘤中的阳性表达(免疫组化×400)

图3　cyclin D1蛋白在结肠癌腺瘤中的阳性表达(免疫组化×400)

2.2p27蛋白结直肠癌表达与临床特征关系p27蛋白在结直肠癌组织中表达率为53.3% (32/60)显著低于正常组织中的80.0% (24/30) (P＜0.05)，其阳性率与分化程度、淋巴转移和dukes分期相关(P＜0.01)。见表1。

表1　p27蛋白结直肠癌表达与临床特征关系　例(%)

2.3p73蛋白结直肠癌表达与临床特征关系p73蛋白在结直肠癌组织中的表达率为58.3% (35/60)显著高于正常组织中的3.3% (1/30) (P＜0.01)，其阳性率与分化程度、淋巴转移和dukes分期相关(P＜0.05)。见表2。

表2　p73蛋白结直肠癌表达与临床特征关系　例(%)

2.4cyclinD1蛋白结直肠癌表达与临床特征关系cyclinD1蛋白在结直肠癌组织中的表达率为68.3%(41/60)显著高于正常组织中的23.3% (7/30) (P＜0.05)，其阳性率与浸润深度、淋巴转移和dukes分期相关(P＜0.01)。见表3。

3　讨论

近年来，癌症相关基因在结直肠癌及其他癌症中的表达水平差异得到了越来越多的重视。CyclinD蛋白是G1期细胞周期蛋白，具有启动细胞周期和促进细胞进行蛋白合成的功能，过量表达的cyclinD蛋白可以使细胞从G1期加速进入S期，进而加快细胞增殖［6］。曲福杰［7］研究显示结直肠癌患者中cyclinD蛋白阳性率为70%且cyclinD和CD15共表达与结直肠癌分化程度、浸润深度、淋巴转移情况和Dukes分期均有相关性。本研究证实，cyclinD1蛋白在结直肠癌组织中的表达率为68.3%(41/60)显著高于正常组织中的23.3%(7/30)，其阳性率与浸润深度、淋巴转移和dukes分期相关。浸润程度较低、存在淋巴转移和dukes分期较高的组织中阳性率较高，提示cyclinD蛋白的表达促进了癌症的发生和发展但却会抑制肿瘤细胞的浸润。

P73蛋白与肿瘤抑制蛋白p53具有较高的同源性，但其在癌症组织中的表达量却高于正常组织［8］。p73在肿瘤的发生、发展中的作用是发挥抑制作用还是促进作用目前尚未有公论。Prabhu等［9］证实p73基因的表达和激活会导致结直肠癌出现耐药性。王玲玲等［10］发现p73基因mRNA在大肠癌组织中的表达水平显著高于健康组织。在本研究中，p73蛋白在结直肠癌组织中的表达率为58.3%(35/60)显著高于正常组织中的3.3%(1/30) (P＜0.01)，其阳性率与分化程度、淋巴转移和dukes分期相关(P＜0.05)。低分化、存在淋巴转移及dukes分期较高的组织中p73蛋白阳性率较高，提示与cyclinD蛋白类似，p73的表达促进了癌症的发生和发展。

p27蛋白是细胞周期的负性调节因子，可以一直cyclinE-CDK2复合物的生理活性将细胞周期停滞进而发挥阻滞细胞过度增殖的作用［11］。已有研究证实，p27的表达下调会导致多种癌症的发生［12］。在本研究中，p27蛋白在结直肠癌组织中表达率为53.3% (32/60)，显著低于正常组织中的80.0% (24/30) (P＜0.05)，其阳性率与分化程度、淋巴转移和dukes分期相关(P＜0.05)。高分化、未转移和dukes分期较低的组织中p27的表达水平较低，提示p27的表达有助于抑制结直肠癌的发生。

本研究结果表明，cyclinD、p73和p27均参与了结直肠癌的发生、淋巴转移和dukes分期。但仅有cyclinD蛋白对肿瘤细胞的侵润具有影响，而p73和p27的表达水平与分化转移相关。

参考文献

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2 Stegeman I.Risk profiling and screening for colorectal cancer.Cancer Epidemiology，2013，37:278-283.

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4 Zhang B，Ji LH，Liu W，et al.Skp2-RNAi suppresses proliferation and migration of gallbladder carcinoma cells by enhancing p27 expression.World journal of gastroenterology: WJG，2013，19:4917.

5 Cutruzzolà F，Avigliano L，Candi E.p73 keeps metabolic control in balance.Cell Cycle，2014，13:179-180.

6 Dowdy SF，Kaulich M.Cyclin D: Cdk4/6 activates RB by mono-phosphorylation during early G1 phase.Cancer Research，2014，74:1304.

7 曲福杰.CyclinD1，CD15，CA19-9和Her-2在结直肠癌中的表达及临床意义.延边大学学报，2013，21:116-119.

8 Ke Y，Liu Z，Liu HM，et al.Novel acetal and halogen oridonin analogues potently induce apoptosis in prostate cancer cell lines via induction of p53/p73 and PUMA expression.Cancer Research，2014，74:1254.

9 Prabhu VV，Hong B，Allen JE，et al.p53 pathway restoring small molecule Prodigiosin targets chemotherapy-resistant colorectal cancer stem cells in vitro and in vivo via p73 activation.Cancer Research，2014，74: 202.

10 王玲玲，高中，孙莉，等.MCC，Survivin，P73和RhoA在大肠癌中的表达及意义.中国实验诊断学，2013，17:1814-1816.

11 Fiandalo MV，Kyprianou N.p27 Stands-Up-To-Cancer: UPS Nuclear Service Stops.Endocrinology，2013，54:3970.

12 McCampbell AS，Mittlestedt ML，Dere R，et al.p27 as a biomarker and determinant of risk for endometrial carcinoma arising in the setting of obesity.Cancer Research，2014，74:4102.

·论著·

Expression and clinical significance of cyclinD1，p73 and p27 in colorectal cancer tissues

XU Huimin，CAO Shaoqi.
Department of Digestive System Diseases，The First Peoople’s Hospital of Huizhou City，Guangdong，Huizhou 516221，China

【Abstract】Objective To investigate the expression and clinical significance of cyclinD1，p73 and p27 in colorectal cancer tissues.MethodsThe expression levels of cyclinD1，p73 and p27 were detected in 60 cases of colorectal cancer tissues and 30 cases of normal tissues.The correlation between expressions of cyclinD1，p73，p27 and clinical indexes was analyzed.Results The positive expression rate of cyclinD1 in colorectal cancer tissues was 68.3% (41/60)，which was significantly higher than 23.3% (7/30) in normal tissues (P＜0.05)，moreover，the positive rate was closely correlated to infiltration depth，lymphatic metastasis，dukes staging of colorectal cancer (P＜0.01).The positive expression rate of p73 in colorectal cancer tissues was 58.3% (35/60)，which was significantly higher than 3.3% (1/30) in normal tissues (P＜0.01)，furthermore the positive expression rate was closely correlated to differentiation degree，lymphatic metastasis，dukes staging of colorectal cancer (P＜0.05).The positive expression rate of p27 in colorectal cancer tissues was 53.3% (32/60)，which was significantly lower than 80.0% (24/30) in normal tissues (P＜0.05)，besides，the positive expression rate was closely related with differentiation degree，lymphatic metastasis，dukes staging of colorectal cancer (P＜0.01).ConclusionThe expressions of cyclinD1，p73 and p27 are closely correlated to colorectal cancer，therefore，the detection of the three factors is helpful for the evaluation of prognosis of patients with colorectal cance.

【Key words】colorectal cancer; cyclinD1; p73; p27

(收稿日期:2015－10－27)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2016.04.005

【中图分类号】R 735.37

【文献标识码】A

【文章编号】1002－7386(2016) 04－0499－03

作者单位: 516211广东省惠州市第一人民医院消化内科