程序性死亡4基因和5基因在卵巢上皮性癌中的表达*

潘　玲, 何　常*

(贵州医科大学附院 病理科， 贵州 贵阳　550004)



程序性死亡4基因和5基因在卵巢上皮性癌中的表达*

潘玲**, 何常***

(贵州医科大学附院 病理科， 贵州 贵阳550004)

[摘要]目的： 探讨程序性死亡4基因(PDCD4)、5基因(PDCD5)蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达。方法： 113例卵巢上皮性癌患者，根据国际妇产科联盟(FIGO)标准分为Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13例，应用免疫组化Envision法检测所有上皮性癌组织、40例卵巢囊腺瘤组织及20例正常卵巢组织中的PDCD4、PDCD5蛋白的表达阳性率，比较2种蛋白表达阳性率在不同FIGO分期的卵巢上皮性癌组织、卵巢囊腺瘤组织及正常卵巢组织的表达。结果： 卵巢上皮性癌组织中PDCD4、PDCD5蛋白表达阳性率明显低于卵巢囊腺瘤和正常卵巢组织(P<0.05)；PDCD4、PDCD5蛋白在卵巢上皮性癌组织Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期癌组织中的表达阳性率逐渐降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论： 卵巢上皮性癌的发生、发展与PDCD4、PDCD5蛋白表达降低有关。

[关键词]程序性死亡； 卵巢肿瘤，上皮性； 免疫组织化学； 染色法； 基因表达

程序性细胞死亡因子(programmed cell death，PDCD) 4与PDCD5基因是近年新发现的一类抑癌基因[1-2]，PDCD4表达产物通过抑制相关基因的转录和翻译抑制肿瘤生成，在多种人肿瘤组织细胞中表达缺失或低表达[1]；PDCD5基因是由北京大学人类疾病基因中心克隆得到的我国拥有自主知识产权的新功能基因，在多种疾病(肿瘤或白血病等)中表达下调，对肿瘤的早期发现、早期诊断、早期治疗有很大的应用价值[2]。目前，虽然卵巢癌的发病率还次于子宫颈癌和子宫体癌，但卵巢上皮癌死亡率却占各类妇科肿瘤的首位[3]。本研究探讨PDCD4、PDCD5蛋白在卵巢肿瘤中的表达，分析PDCD4、PDCD5蛋白表达阳性率与卵巢上皮性肿瘤国际妇产科联盟(FIGO)分期的关系。

1对象与方法

1.1临床资料

收集2012年1月～2014年12月经病理确诊为卵巢上皮性癌的113例患者手术标本，患者年龄41～71岁，平均(60.28±7.57)岁；病程2～7年，平均(4.07±1.55)年。参照2013年FIGO卵巢癌分期标准进行临床分期[4]：Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13例；有淋巴结转移43例、未转移70例，其中黏液性66例、浆液性47例，所有患者排除过往患有肿瘤、白血病等疾病，术前未行放、化疗。选取同年龄段正常卵巢组织20例(正常组)及卵巢囊腺瘤组织40例(卵巢囊腺瘤组，包括黏液性25例、浆液性15例)作为研究对照。

1.2方法

所有组织标本经4%多聚福尔马林固定，常规处理，石蜡包埋，4 μm连续切片。PDCD4与PDCD5兔抗人多克隆抗体及Envision试剂盒均购自武汉博士德公司。采用免疫组织化学(Envision)法检测PDCD4与PDCD5蛋白表达，染色过程按试剂盒说明书进行。 PDCD4与PDCD5在细胞质、细胞核中均有表达，出现棕黄色颗粒记为阳性细胞，在油镜(×100)下综合染色强度和阳性细胞所占比例进行半定量测定[5]，记录PDCD4、PDCD5蛋白的表达阳性率。

1.3观察指标

观察卵巢上皮性癌组织、正常卵巢组织及卵巢囊腺瘤组织切片的染色程度，记录PDCD4、PDCD5蛋白在正常卵巢组织、卵巢囊腺瘤组织及Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期卵巢上皮性癌组织中的表达阳性率，分析PDCD4、PDCD5蛋白表达与卵巢上皮性癌FIGO分期的关系。

1.4统计学方法

应用 SPSS 15.0软件分析，计数资料采用百分比(%)表示，数据比较采取χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

卵巢癌上皮性组织中PDCD4、PDCD5蛋白表达阳性率明显低于卵巢囊腺瘤和正常组织，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期癌组织中的PDCD4、PDCD5蛋白表达阳性率逐渐降低，两两比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1　PDCD4及PDCD5蛋白在正常卵巢、

(1)与正常组织比较，P<0.05；(2)与卵巢囊腺瘤比较，P<0.05

表2　PDCD4、PDCD5蛋白在Ⅰ～Ⅳ期卵巢

(1)与Ⅳ期比较，P<0.05；(2)与Ⅲ期比较，P<0.05;(3)与Ⅱ期比较，P<0.05

3讨论

PDCD4与PDCD5是近年新兴的抑癌基因，PDCD4通过促进肝癌、乳腺癌、胶质瘤、肾癌等肿瘤细胞的凋亡[6-7]，在多种恶性肿瘤组织包括肺癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌等组织中的表达下调甚至缺失, 且与肿瘤潜在恶性程度密切相关[8]。PDCD5是由北京大学人类疾病基因中心在国际上首先报道的一个新的人类凋亡相关基因，该基因编码的蛋白由125 个氨基酸组成，定位于胞质和胞核，在机体多种组织中呈现中高水平的表达[2,9]。PDCD5 表达异常与多种疾病的发生有关， 在肿瘤细胞的表达明显低于正常细胞[10]，PDCD5 在肿瘤的发生发展过程中发挥一定作用[10]。但有关PDCD4、PDCD5 与卵巢肿瘤关系的研究报道较少，其在卵巢肿瘤的表达水平及作用尚不明确[11-12]。

本组研究发现卵巢癌上皮性组织中PDCD4、PDCD5蛋白表达阳性率明显低于卵巢囊腺瘤和正常组织，差异有统计学意义(P<0.05)。卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期癌组织中的PDCD4、PDCD5蛋白表达阳性率逐渐降低，两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。提示卵巢上皮性癌患者病情的发生、发展与PDCD4、PDCD5蛋白表达水水平降低有关。

4参考文献

[1] 曹春明，孙震晓. 抑癌基因PDCD4 的表达调控及产物泛素化研究进展[J]. 生物化学与生物物理进展, 2010 (4): 353-357.

[2] 刘红涛，王玉刚，张颖妹，等． TF-1细胞凋亡相关基因的研究[J].生物化学与生物物理进展， 1999(1):38-43．

[3] 杨念念,严亚琼,龚洁,等.中国2003-2007年卵巢癌发病与死亡分析 [J].中国肿瘤, 2012(6)：401-405．

[4] 林仲秋,谢玲玲,李晶.FIGO 2013卵巢癌、输卵管癌、腹膜癌新分期解读[J].中国实用妇科与产科杂志, 2013(12) :921-923.

[5] 潘玲,何常. 髓样细胞白血病-1及染色质重塑A蛋白在卵巢上皮癌组织中的表 [J].贵阳医学院学报, 2016(2) :221-223.

[6] 李海艳.促凋亡基因PDCD5在人胶质瘤中的表达及其对化疗敏感性的影响[D].山东：山东大学硕士研究生论文, 2009.

[7] 谭万龙，熊林，郑少斌，等.肾透明细胞癌PDCD5表达及与预后的关系[J].南方医科大学学报， 2006(9):1316-1318.

[8] 姜杨, 张霞,王晓燕，等. PDCD4 转染卵巢癌细胞系基因表达谱的变化[J]. 山东大学学报:医学版， 2010 (1) :48-52.

[9] 郭辉, 孙伟, 马秀敏,等. 新的凋亡相关基因PDCD5在细胞凋亡中的作用及应用前景[J]. 现代肿瘤医学, 2010 (1): 179-182.

[10]郭妮娜，刘竞． PDCD5 基因促进细胞凋亡机制的研究进展[J].阴山学刊， 2012(1): 45-47．

[11]王新华，刘晓兰，崔涌． PTEN、PDCD5 和CyclinD1 在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的表达及意义[J].实用医技杂志， 2013(2):173-175．

[12]朱峥艳，李文才. PDCD5 蛋白在卵巢浆液性交界性肿瘤中的表达与其诊断、鉴别诊断及预后的关系[J].医药论坛杂志, 2015(2):60-64.

(2015-12-03收稿，2016-02-20修回)

中文编辑： 吴昌学； 英文编辑： 赵毅

Expression of Apoptosis Related PDCD5 Gene and PDCD4 Gene in Ovarian Cancer

PAN Lin， HE Chang

(DepartmentofPathology,AffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China)

[Abstract]Objective: To investigate the PDCD4 and PDCD5 expression in epithelial ovarian cancer and its clinical significance. Methods: Adopting envision immunohistochemical detection of 113 patients with ovarian cancer (42 Phase Ⅰ, 28 Phase Ⅱ, 30 Phase Ⅲ and 13 phase Ⅳ according to FIGO standard) and 20 normal ovarian tissue in 40 cases of ovarian cyst adenoma and expression positive rate of PDCD4 and PDCD5, comparing expression condition of expression positive rate of both proteins on various FIGO phases epithelial ovarian cancer tissue, ovarian cystadenoma tissue and healthy ovarian tissue. Results: PDCD4 and PDCD5 protein expression positive rate of epithelial ovarian cancer were obviously lower than ovarian cystadenoma and healthy ovarian tissue (P<0.05); PDCD4 and PDCD5 protein expression positive rate in epithelial ovarian cancer tissue phase Ⅰ, phase Ⅱ, phase Ⅲ and phase Ⅳ cancer tissue were gradually decreasing, differences were statistical significant (P<0.05). Conclusion: Decreasing of PDCD4 and PDCD5 protein expression in epithelial ovarian cancer is closely related to the occurrence and development of ovarian cancer.

[Key words]apoptosis; ovarian tumor, epithelial; immunohistochemistry; staining method; gene expression

[中图分类号]R737.31

[文献标识码]A

[文章编号]1000-2707(2016)03-0307-03

*[基金项目]贵州省科技厅基金(E2010-4)

**贵州医科大学病理科2012级硕士研究生，现在安顺市人民医院工作

***通信作者 E-mail:2077166911@qq.com

网络出版时间：2016-03-17网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160317.1107.060.html