不同温度多酶清洗剂对内镜生物膜清除效果的影响

2016-04-22程秀英,伍燕芳,陈秀霞等

实用临床医药杂志 2016年6期

程秀英1, 伍燕芳2, 陈秀霞3, 苏瑞琼1

(广东省佛山市顺德区中医院, 1. 医院感染管理科; 2. 消毒供应中心; 3. ICU, 广东佛山, 528333)

关键词:不同温度; 多酶清洗剂; 内镜; 生物膜; 清除效果

近年来，内镜技术逐渐普及，在治疗多种疾病中发挥着重要的作用。内镜的消毒工作对于减少院内感染的发生具有积极意义。清洗是整个内镜消毒工作中最为关键的步骤，但内镜具有材料特殊、精密度高和结构复杂的特点，清洗起来具有一定的难度，极容易形成内镜生物膜[1]。内镜生物膜能保护细菌并增加细菌对杀菌剂的抵抗性，削弱消毒剂的效果[2]。细菌生物膜已经成为医院感染潜在的重要影响因素。多酶清洗剂是清洗内镜时必须采用的消毒剂，其酶活性在理论上有一个适宜的温度。本研究探讨不同温度多酶清洗剂对内镜生物膜清除效果的影响，报告如下。

1资料与方法

1.1一般材料

选择本院 2014年8月—2015年9月实施腹腔镜手术后所用内镜器械(内窥镜、穿刺针、气腹针、抓钳、剪刀、钛夹钳等)共300件。大肠埃希菌标准株ATCC29522，直径为4 mm，长100 cm的聚四氟乙烯(Teflon) 管，M-H琼脂，一次性培养皿。

采用内镜专用清洗毛刷，专用内镜清洗剂(1︰270)，酸化水机产生的碱性水(pH 12～13); APT生物荧光监测仪，APT检测拭子。

1.2方法

按中国卫生部《内镜清洗消毒技术操作规范(2004年版)》中规定的方法进行清洗[3]，所有器械均采用标准化机械清洗。根据清洗液的温度不同，300件器械被随机分成3组: 25 ℃组，35 ℃组和 45 ℃组，每组 100 件。清洗程序设定：预洗 1 min→排水→主洗(加酶)25 ℃、35 ℃或 45 ℃ 5 min→排水→冲洗→排水→冲洗→排水→最后冲洗消毒 90 ℃ 5 min→排水→干燥20 min→清洗步骤结束。清洗步骤结束后，取出器械，进行相关指标的观察。所有器械的清洗工作均由同一名清洗专职护士负责。每个周期清洗的数量均相同。

1.3观察指标

① 肉眼观察清洗效果，评定洁净度。将清洗后的器械采用带光源放大镜检查清洁度，表面没有可见残留物；用长棉签从器械的管腔内穿出，关节、齿槽处用棉签擦拭，连续3次，肉眼观察棉签上未沾染任何污迹、杂质，达到完全洁净为合格。棉签上沾染有污迹杂质呈黄褐色或有血迹等未达到完全洁净为不合格。② 采用ATP生物荧光法测试蛋白残留，参考ATP Bioluminescence手持荧光检测仪的操作指导，客观评价洁净度。使用拭子涂擦清洗后的器械表面及管腔内部，将拭子末端荧光素酶处折断，使荧光素酶与拭子充分接触，放入仪器中检测残留在器械表面的蛋白质和ATP含量，放入机器的时间为15 s, 采样后立即读数，其中合格为0～45，>45为不合格[4]。③ 采用菌落计数法测定清洗质量效果。选取所有器械，用无菌注射器抽取无菌蒸馏水冲洗关节缝隙、齿槽，连续3次，然后将冲洗后的蒸馏水注入留检试管中，送入细菌室进行菌落计数测定。于37 ℃的恒温箱内培养24 h后计菌落数。分别统计内镜相关器械放置1、2、5 h时的菌落计数。

2结果

2.1不同温度多酶清洗剂对目测合格率及蛋白残留的影响

C组的目测合格率高于A、B组，蛋白残留值低于A、B组，ATP生物荧光检测合格率高于A、B组，差异有统计学意义(P<0.05)。B组的目测合格率高于A组，蛋白残留值低于A组，ATP生物荧光检测合格率高于A组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1　不同温度多酶清洗剂对目测合格率及蛋白残留的影响

与C组相比, *P<0.05。

2.2不同温度多酶清洗剂对生物膜细菌的影响

3种温度清洗后的生物膜细菌计数均随着时间的延长而增加，但C组在1、2、5 h时的菌落计数少于A、B组，差异有统计学意义(P<0.05)。B组各时间段的菌落数低于A组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2　不同温度多酶清洗剂对生物膜细菌的影响

与A、B组相比, *P<0.05。

3讨论

生物膜是一种细菌的保护膜，是指封闭于自分泌的高分子机制中，黏附在活性或无活性表面的、有结构的细菌菌落。研究[4]表明，细菌生物膜在内镜的管腔中是普遍存在的，其有较强的抵抗机体免疫和抗生素的能力，人类细菌感染中有65%是由生物膜感染引起的。多酶清洗剂是一种含有蛋白水解酶等多种生物酶的清洗剂，可迅速、高效地分解各种黏附在器械表面的污物，如人体的脂肪、血液、黏液和胃液等，分离污物颗粒以提高清洗的效率[5]。多酶清洗剂还可以进入内镜管腔的深部，渗透至管腔的所有表面，将残留的有机物分解，使物体表面的生物负荷降低3～5个对数级水平[6]。

多酶清洗剂已经成为内镜清洗过程中必须采用的清洗剂，且多酶清洗剂为生物制剂，理论上其活动应该受温度的影响。有文献[7]报道，酶的活性一般在30～40 ℃的水温中最佳，不宜采用40 ℃以上的水进行清洗，以免造成蛋白质等物质凝固，使得清洗的难度增加。近来有研究[8]显示，多酶清洗剂在50 ℃的条件下清洗器械的效果最佳，且认为与《洗涤酶应用手册》中的结论相符。本研究结果显示，多酶清洗剂在45 ℃的条件下清洗的质量最好，表现为45 ℃的目测清洗和隔离高，而且蛋白残留物少，而且细菌菌落随着时间的延长，计数最少，均优于35 ℃组和25 ℃组。这提示适当的条件下调高多酶清洗剂的温度能够达到更好的清洗效果。清洗是消毒前重要的步骤，内镜器械的洁净度影响其灭菌效果。内镜的种类繁多，形状、材质多样，结构复杂，清洗的难度大，长期清洗不彻底可致器械的内腔阻塞，关节失去灵活性。任群慧等[9]研究结果显示，50 ℃的多酶清洗剂对医疗器械的清洗效果好，适当提高温度能够增强酶洗剂的活性，提高清洗的效果。一般情况下，多酶清洗剂在30℃的相对酶活性只有35%，当温度升高到50 ℃左右时，酶的活性才能够得到完全释放。50 ℃的条件下，并不会使蛋白质和新鲜血液变性，因为蛋白质变性的起始温度为60 ℃左右。因此，在50 ℃的条件下使用多酶清洗剂可优化清洗体系中的化学清洗力核心组合，提高清洗体系的整体清洗效能。但有研究[10]认为, 50 ℃的水温是不易人工操作的，人体体温在36～37 ℃，人手长期接触的水的温度不易超过35 ℃, 以免造成其他部位相对缺血，长此以往将影响工作人员的身体健康。因此，其建议使用35～40 ℃的清洗剂，其温度接近人体温度，既能够达到良好的清洗效果，又不会影响人体的健康。本研究显示，多酶清洗剂在45 ℃的条件下清洗的质量最好。

参考文献

[1]任伟, 黄茜, 周立平, 等. 不同清洗剂对内镜生物膜清除的效果评价[J]. 中华医院感染杂志, 2011, 21(7): 1382.

[2]杨坤明, 吴冉, 任素香. 生物膜清洁剂在手术室内镜器械清洗中的应用[J]. 中国实用护理杂志, 2013, 29(9): 10.

[3]中华人民共和国卫生部. 内镜清洗消毒技术操作规范[J]. 中国护理管理, 2004, 4(3): 11.

[4]赵金秀, 魏崇敬. 多酶洗剂的温度及浸泡时间对难洗器械清洗质量的影响[J]. 中国保健营养: 中旬刊, 2014(7): 4595.

[5]苏爱莲, 许少英, 袁小玲, 等. 不同温度鲁沃夫多酶溶液对手术器械清洗效果的影响[J]. 现代医院, 2013, 13(10): 70.

[6]顾青, 方英, 徐承富, 等. 3种内镜清洗剂灌流清洗肠镜效果的比较研究[J]. 护理与康复, 2012, 11(9): 865.

[7]周青. 自动清洗消毒机温度参数影响再清洗质量探讨[J]. 世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊), 2014, 14(36): 325.

[8]李良芳, 刘婉薇, 陈琼, 等. 多酶清洗剂温度及清洗时间对清洗效果的影响[J]. 护理研究, 2012, 26(7): 611.

[9]任群慧, 冯望, 周益. 温度对多酶洗剂清洗复用医疗器械的影响[J]. 中国消毒学杂志, 2015, 32(3): 273.

[10]周月芬, 夏观月. 多酶清洗液配比温度对器械清洗效果的影响[J]. 中华医院感染杂志, 2013, 23(18): 4469.

中图分类号:R 197.39