白芍总苷降尿酸实验研究

戴　芸，杨　林，朱莉萍*

（1.黄石市中心医院（湖北理工学院附属医院），湖北黄石435000；2.肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室，湖北黄石435000）



白芍总苷降尿酸实验研究

戴芸1，2，杨林1，2，朱莉萍1，2*

（1.黄石市中心医院（湖北理工学院附属医院），湖北黄石435000；2.肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室，湖北黄石435000）

摘要：目的：研究白芍总苷降尿酸作用。方法：采用60只雄性昆明种小鼠，随机分为正常对照组、高尿酸血症模型对照组、别嘌醇组（40mg·kg(-1)）及白芍总苷低剂量组（2g·kg(-1)）和高剂量组（4g·kg(-1)），每组12只；20%酵母浸粉饲料喂养造模。于给药15d后测定血清尿酸（uric acid，UA）、肌酐（creatinine，Cr）和尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）含量并测定肝脏组织中黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase，XOD）和腺苷脱氨酶（adenosine deaminase，ADA）的活性。结果：与模型对照组比较，白芍总苷低剂量组和高剂量组小鼠血清的UA水平降低（P＜0.05）；白芍总苷低剂量组和高剂量组小鼠肝脏组织中XOD和ADA的活性降低（P＜0.05）。结论：白芍总苷对高尿酸血症小鼠模型具有保护作用。

关键词：白芍总苷；高尿酸血症；小鼠；尿酸

白芍总苷（Total glucosides of paeony，TGP）来源于毛莨科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根[1]，主要成分包括芍药苷（Paeoniflorin），羟基芍药苷（Oxypaeoniflorin）、芍药内酯苷（Albiflorin）和苯甲酰芍药苷（Benzoylpaeoniflorin）等苷类成分，其中芍药苷含量最高[2]。本品为浅棕黄色至棕褐色的粉末，主要具有抗炎、镇痛、催眠、抗惊厥和免疫调节作用。临床广泛用于治疗风湿性关节炎、冠心病和妇科疾病等方面疾病的治疗[3-5]。

近年来对白芍总苷的实验研究和临床研究逐步深入，其作用机制以及临床应用取得了长足的进步。本研究拟对白芍总苷对高尿酸血症小鼠模型的保护作用进行研究，对其进一步的开发利用奠定基础。

1　实验部分

1.1药品与试剂

白芍总苷（含芍药苷40%，宁波立华制药有限公司，批准文号：国药准字H20054521）。别嘌醇片（海正辉瑞制药有限公司，批准文号：国药准字H33020771）；酵母膏（湖北兴银河化工有限公司）；尿酸（uric acid，UA）检测试剂盒、肌酐（creatinine，Cr）检测试剂盒、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）检测试剂盒以及肝脏黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase，XOD）检测试剂盒、腺苷脱氨酶（adenosinedeaminase，ADA）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）。其它生化试剂均为国产分析纯。

1.2仪器

TBA-40FR（ACCUTE）全自动生化分析仪（日本东芝公司）；Model 680型酶标仪（美国Bio-RAD公司）；Heraeus Biofuge Stratos冷冻离心机（德国Heraeus公司）；H-11041170电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）。

1.3实验动物

SPF级雄性昆明种小鼠60只，购自武汉大学实验动物中心［许可证号：SCXK（鄂）2008-0004］，6～8周龄，体质量（18±22）g。

1.4实验方法[ 6-9 ]

1.4.1动物分组、模型建立及给药小鼠正常水食适应性喂养7d后，60只雄性昆明小鼠按体质量随机均分为5组，即正常对照组、模型对照组、别嘌醇组（40mg·kg-1）组、白芍总苷低剂量组（2g·kg-1）和白芍总苷高剂量组（4g·kg-1），每组12只。除正常对照组小鼠继续饲喂正常水食外，其余各组给予含20%酵母浸粉饲料，造成血清尿酸水平升高的高尿酸血症模型。造模2周后，各组开始分别给予相应药物，正常对照组和模型对照组给予同体积纯净水，每天一次，连续给药15d。除正常对照组外，其余各组继续饲喂含20%酵母浸粉饲料。每3d称重1次，根据体重变化，矫正给药剂量。给药第15d后，小鼠眼球取血致死，并仔细剥离肝脏，在每只小鼠肝脏的相同部位秤取肝组织0.2 g，以液氮速冻，保存于-80℃冰箱备用。

1.4.2血清UA、Cr和BUN水平测定小鼠血液经室温静置30min后，3000rpm离心15min取上层血清，参照试剂盒说明书测定UA、Cr和BUN的浓度。

1.4.3肝脏酶活力测定取0.2g肝组织，加入1.8mL质量分数为0.85%的生理盐水，制备成10%的肝组织匀浆，3000rpm离心15min，取上层清液，参照试剂盒说明书分别测定肝脏XOD、ADA酶活力。其中，XOD的酶活力单位定义为每克组织蛋白在37℃每分钟转化1μmol的底物所需的酶量；ADA的酶活力单位定义为每毫克蛋白在37℃和底物作用60min产生1μg氨所需的酶量。参照试剂盒说明书测定酶活力。

1.5统计学方法

实验数据统计分析采用SPSS 18.0软件，计数资料以±s表示，组间数据比较采用t检验方法。P小于0.05视差异为有统计学意义。

2　结果与讨论

2.1白芍总苷对小鼠血清UA、Cr和BUN水平的影响

与正常对照组比较，模型对照组小鼠血清UA升高，差异有统计学意义（P小于0.05），Cr和BUN没有显著改变；与模型对照组比较，白芍总苷低剂量组和高剂量组均可降低小鼠UA水平，差异有统计学意义（P小于0.05），以白芍总苷高剂量组作用更为明显。白芍总苷对于小鼠血清Cr和BUN没有显著影响，见表1。

表1　白芍总苷对高尿酸血症小鼠UA、Cr和BUN的影响（±s，n=12）Tab.1　Effect of total glucosides of paeony on UA, Cr and BUN in hyperuricemia mice（±s, n=12）

表1　白芍总苷对高尿酸血症小鼠UA、Cr和BUN的影响（±s，n=12）Tab.1　Effect of total glucosides of paeony on UA, Cr and BUN in hyperuricemia mice（±s, n=12）

与正常对照组比较：△P小于0.05；与模型组比较：*P小于0.05。

组别正常对照组模型对照组别嘌醇组白芍总苷低剂量白芍总苷高剂量剂量/g·kg-10.04 2 4 UA/μmol·L-1129.62±35.72 276.25±88.96△112.77±36.34*203.76±40.63*188.91±35.20*Cr/μmol·L-1550.21±46.20 534.60±58.94 560.82±47.36 544.23±69.33 528.66±53.45 BUN/mmol·L-13.35±0.28 3.42±0.33 3.29±0.25 3.39±0.13 3.41±0.22

2.2白芍总苷对小鼠肝脏XOD、ADA酶活力的影响

与正常对照组比较，模型对照组小鼠肝脏XOD 和ADA活性明显升高（P小于0.05）。与模型对照组比较，白芍总苷低剂量组和白芍总苷高剂量组小鼠肝脏XOD和ADA活性显著降低（P小于0.05）。结果显示，白芍总苷能抑制高尿酸血症小鼠模型肝脏XOD和ADA活性，见图1、2。

图1　白芍总苷对高尿酸血症小鼠XOD活性的影响（±s，n=12）Fig.1　Effect of total glucosides of paeony on activity of XOD in hyperuricemia mice（±s, n=12）

与正常对照组比较：△P小于0.05；与模型对照组比较：*P小于0.05。

图2　白芍总苷对高尿酸血症小鼠ADA活性的影响（±s，n=12）Fig.2　Effect of total glucosides of paeony on activity of ADA in hyperuricemia mice（±s，n=12）

与正常对照组比较：△P小于0.05；与模型对照组比较：*P小于0.05

2.3讨论

高尿酸血症是嘌呤代谢紊乱导致的尿酸含量从而引发的疾病[10]。其发病原因主要与尿酸的生成和排泄这两个复杂的代谢过程有关，是由嘌呤代谢特异性酶活性的异常或缺失引起，另外还可以由肾脏病变、内分泌疾病、机体用药等导致尿酸排泄障碍。现代医学对高尿酸血症的治疗途径主要为减少内源性尿酸的生成以及促进尿酸排出，前者主要通过有效的抗氧化抑制核酸氧化分解同时抑制嘌呤代谢为尿酸，后者可通过适度碱化尿液来实现。同时采用药物或手术治疗，并注意调整饮食结构[11,12]。

目前，常用化学药物治疗高尿酸血症，不良反应较多，停药后复发率较高[13 ]，而中医药在高尿酸血症的治疗方面有一定的独特优势，其起效温和，作用持久，不良反应发生率较低。中医多将高尿酸血症归属痹证、白虎历节、痛风、淋证或水肿等范畴，其病因病机较为复杂，辨证分型尚不统一[14]，因此，在传统中医理论指导下，确定高尿酸血症辨证分型和发现疗效确切的中药显得尤为重要。

3　结论

本研究采用白芍总苷探讨其对高尿酸血症小鼠模型的保护作用。研究发现白芍总苷可降低小鼠血清UA水平（P小于0.05），降低小鼠肝脏XOD和ADA活性（P小于0.05），对小鼠血清Cr和BUN水平影响不大。初步判断白芍总苷对高尿酸血症小鼠模型具有一定的保护作用，主要通过降低血清UA水平以及抑制肝脏XOD和ADA活性来实现。其具体机制还需要进一步探讨，本研究结果对于白芍总苷研究利用奠定了一定的基础。

参考文献

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Experimental study of total glucosides of paeony on reducing the level of uric acid

DAI Yun1，2，YANG Lin1，2，ZHU Li-ping1，2*
（1.Huangshi Central Hospital, Affiliated Hospital of Hubei Polytechnic University, Huangshi 435000, China；2.Hubei Key Laboratory of Kidney Disease Pathogenesis and Intervention, Huangshi 435000, China）

Abstract：The effect of total glucosides of paeony on reducing the level of uric acid were studied. 60 male mice were randomly divided into normal control group, model control group, Allopurinol group（40mg·kg(-1)）and total glucosides of paeony groups（2g·kg(-1)and 4g·kg(-1)）, with 12 mice in each group. The mice fed with 20% yeast powder were used to establish the hyperuricemia model. The levels of uric acid（UA）, creatinine（Cr）and blood urea nitrogen（BUN）were detected at 15th day. In addition, xanthine oxidase（XOD）and adenosine deaminase （ADA）activity in mice liver were determined for the mechanism preliminarily. Compared with model group, the level of UA, XOD and ADA activity decreased in total glucosides of paeony groups. The total glucosides of paeony had protection effect on Hyperuricemia mice model.

Key words：total glucosides of paeony；hyperuricemia；mice；uric acid

通讯作者：朱莉萍（1971-），女，本科，副主任药师。

作者简介：戴芸（1974-），女，主管药师，1997年毕业于中国药科大学药学专业，大专学历，研究方向：临床药学。

收稿日期：2015-11-11

DOI：10.16247/j.cnki.23-1171/tq. 20160368

中图分类号：R965

文献标识码：A