奥卡西平诱发轻微皮肤不良反应与HLA等位基因相关性的研究①

韩翔宇,王菊莉,曹洪涛,陶英贤,陶　德

(1.佳木斯大学,黑龙江 佳木斯 154007 2.佳木斯中心医院癫痫中心,黑龙江 佳木斯 154002)



奥卡西平诱发轻微皮肤不良反应与HLA等位基因相关性的研究①

韩翔宇1,王菊莉2,曹洪涛2,陶英贤2,陶德2

(1.佳木斯大学,黑龙江 佳木斯 154007 2.佳木斯中心医院癫痫中心,黑龙江 佳木斯 154002)

摘要：目的：对HLA-B等位基因多态测序比对统计分析以确定HLA-B等位基因分型与奥卡西平所导致的皮肤不良反应的相关性。方法：选择在佳木斯市中心医院癫痫中心确诊为癫痫的患者，使用奥卡西平单药治疗后引起不同程度皮肤不良反应的患者，抽取外周血2mL，采用聚合酶链反应直接测序方法(polymerase chain reaction-sequence based typing，PCR-SBT)对HLA-B等位基因进行检测，通过对服用奥卡西平后不同程度皮肤不良反应患者的HLA-B等位基因统计分析确定与不良反应相关的基因。结果：HLA-B*1502基因导致皮肤不良反应阳性患者2/9(P<0.05)。结论：HLA-B*1502基因与奥卡西平诱发皮肤不良反应相关。

关键词：奥卡西平; 皮肤不良反应; HLA-B基因多态

癫痫(Epilepsy)是一种较常见的神经系统慢性脑部疾患。表现为大脑神经元突发性异常放电,导致短暂的大脑功能障碍，在人群中癫痫具有7‰的患病率。目前对于癫痫的发病机制的尚未完全了解。目前研究认为，癫痫发作的主要原因是由于神经元兴奋性和抑制性神经传递的失调引起[1]。研究表明,癲痫病具有遗传性[2~4]。通过流行病学调查结合脑电图以及谱系研究等,充分证明了在原发性癫痫中具有遗传性，但不一定都有临床发作。

目前，针对癲痫病的治疗上主要采用抗癲痫药物(anti-epilepticdrugs, AEDs)来抑制癫痫发作。在我国，近些年奥卡西平(Oxcarbazepine, OXC)作为卡马西平(carbamazepine, CBZ)的有效替代品被广泛应用，但是随着奥卡西平的应用逐渐广泛，其诱发的过敏反应也逐渐增加，今年来研究表明，部分药物诱发的过敏反应与人类白细胞抗原(Human leukocyte antigens,HLA)基因的多态性相关。HLA位于6号染色体短臂上的21,31区(6p21,31)。目前在HLA基因多态中只明确了几个多态可以导致服用奥卡西平诱发的皮肤不良反映。

1对象与方法

1.1研究对象

所有入选的受试者按过敏与否分2组(过敏反应组和未过敏组)，均取自黑龙江省佳木斯市中心医院癫痫中心。由佳木斯大学批准项目，所有的被研究的患者均签署了知情同意书。2012~2014年的患者，在佳木斯中心医院癫痫中心按照患者脑电图放电异常情况，MRI是否有器质性病变以及患者临床表现综合分析诊断为癫痫的患者共25例患者分为两组。

过敏组：①因服用OXC导致cADRs的患者9例(年龄7~69岁); ②患者均为单一服用OXC导致的cADRs; ③并排除其它原因导致的皮疹(主要为轻微的斑丘疹，也有少数的严重的Stevens-Johnson综合征)。

未过敏组：确诊癫痫，单一服用奥卡西平超过3个月，并且没有出现任何不良的皮肤反应患者16例(年龄1~47岁)。

1.2方法

选择在佳木斯市中心医院癫痫中心就诊的癫痫患者，使用奥卡西平单药治疗后引起皮肤不良反应的患者抽取EDTA抗凝外周血2mL，利用采用聚合酶链反应直接测序方法(polymerase chain reaction-sequence based typing，PCR-SBT)对HLA-B*1502等位基因进行检测，通过对服用奥卡西平后不同程度皮肤不良反应患者的HLA-B*1502等位基因统计分析来确定与不良反应可能相关的基因。

2结果

对不良反应患者测序的实验结果发现。对9例服用奥卡西平诱发皮肤不良反应的患者中(包括Stevens-Johnson综合征患者2例)进行检测发现2例HLA-B*1502基因检测结果(+),测序结果见图2，阳性率为30%，Stevens-Johnson综合征的阳性率为50%,P<0.05。见图1。

图1HLA-B*1502基因比例

图2　HLA-B*1502基因测序

3讨论

在使用抗癫痫药物治疗过程中发生皮肤药物不良反应(cutaneous adverse drug reactions, cADRs)导致停药是影响癫痫治疗的一种最常见原因。在抗癫痫药物治疗期间，cADRs多数是不可预测的具有潜在的致命危险。cADRs的临床表现不同，从轻微的斑丘疹(mild maculopapular exanthema, MPE)，相对严重一些的超敏反应(hypersensitivity syndrome, HSS)，到极为严重的皮肤大疱病变:Stevens-Johnson综合征(Stevens-Johnson syndrome, SJS)，中毒性表皮坏死溶解症(toxic epidermal necrolyis, TEN)分4种皮肤不良反应表现形式，SJS与TEN是同一种不良反应的不同表现形式，皮肤剥脱面积小于10%为SJS，而大于30%为TEN[5]。各种形式的抗癫痫药物(AEDs)诱导的cADRs接近10%。MPE比HSS或SJS/TEN更常见，在所有AEDs使用者中整个发生率为2.8%。卡马西平诱发的皮肤不良反应相关基因的报道有很多，一些东亚人口研究 (汉人与泰人)证明，卡马西平(Carbamazepine)或苯妥英钠(Phenytoin) 会导致携带HLA-B*1502 基因出现SJS综合症有强烈的反应[6~8]。可以明确的是HLA-B*1502基因与卡马西平诱发的Stevens-Johnson综合征明确相关[9,10]，SJS是"多型性红斑"的一种，能影响表皮的细胞死亡，导致真皮与表皮分离，是一种可致命的皮肤疾病。奥卡西平以副作用小，耐受性好，奥卡西平与其他药物间的相互作用比卡马西平少，由于卡马西平与奥卡西平的相似性，目前已知HLA-B*1502基因与奥卡西平诱发的Stevens-Johnson综合征明确相关。 关于卡马西平诱发的皮肤不良反应与HLA-B*1502基因之间的关系有很多研究，而且研究比较深入，基本可以确定两者之间的相关性。奥卡西平诱发的皮肤不良反应与HLA-B*1502基因也有少量报道，但都处于在奥卡西平诱发的SJS与HLA-B*1502基因的相关性上的探讨，在奥卡西平诱发的皮肤不良反应与哪些基因有关的研究目前尚处于摸索阶段，原因在于对奥卡西平诱发的皮肤不良反应不容易鉴别(尤其是不强烈的皮肤不良反应)很难确定其是因为药物导致的不良反应，还是由于其他原因导致的皮肤反应。

参考文献：

[1]Ling Z Y,Sun Y,JiangJ F.New development about safe questions of carbamazepine in epileptic[J].China Mod Med,2010,17(13):13-14

[2]Yalcin O.Genes and molecular mechanisms involved in the epileptogenesis of idiopathic absence epilepsies[J].Seizure,2012,21(2):79-86

[3]Galaaopoulou AS.Mutations affecting GABAergic signaling in seizures and epilepsy[J].Pflugers Arch,2010,460(2):505-523

[4]Macdonald RL,Kang JQ,Gallagher MJ.Mutations in GABAA receptor subunits associated with genetic epilepsies[J].J Physiol,2010,588(11):1861-1869

[5]Xiao LL,Hao GQ.HLA genotyping by automatic Semi-quantitative polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide[J]. Di Yi Jun Yi Da Xue Xue Bao,2003,23(1):58-61

[6]Burton JM,Peebles GA,Binder DK,et al.Transcortical coolinginhibits hippocampal-kindled seizures in the rat[J].Epilepsia,2005,46(12):1881-1887

[7]Boison D,Scheurer L,Tseng JL,et al.Seizure suppression in kindled rats by intraventricular grafting of an adenosine releasing synthetic polymer[J].Exp Neurol,1999,160(1):164-174

[8]Balazs I,Beekman J,Neuweiler J,et al.Molecular typing of HLA-A,B,DRB using a high throughput microarray format[J].Human Immun,2001,62:850-857

[9]Fa-yun Hu,Xin-tong Wu,Dong-mei An ,et al.Pilot association study of oxcarbazepine-induced mild cutaneous adverse reactions with HLA-B*1502 allele in Chinese Han population[J].Seizure,2011,20(2):160-162

[10]McCormack M,Alfirevic A,Bourgeois S,et al.HLA-A*3101 and carbamazepine-induced hypersensitivity reactions in Europeans[J].N Eng J Med,2011,364(12):1134-1143

(收稿日期：2015-07-30)

中图分类号：R971+.6

文献标识码：B

文章编号：1008-0104(2016)01-0039-02

作者简介：韩翔宇(1987～)男，黑龙江鹤岗人， 硕士。通讯作者：王菊莉(1964~)女，黑龙江佳木斯人，博士，教授，主任医师， 硕士研究生导师。E-mail：hanxiangyu1987@126.com。

基金项目：佳木斯大学研究生科技创新项目，编号：LM2014_050。