液相色谱仪在生物技术中的应用

孟祥玉

( 牡丹江医学院基础医学院,黑龙江　牡丹江　157011)



液相色谱仪在生物技术中的应用

孟祥玉

( 牡丹江医学院基础医学院,黑龙江牡丹江157011)

摘要：液相色谱仪可应用于生物化学、生物医学、环境化学等方面的分析研究。随着现代医学的发展，采用液相色谱法进行生物技术研究已经成为一种常规方法。鉴于此，针对应用液相色谱法进行生物技术研究时出现的常见问题进行分析，并提出合理的解决办法。

关键词：液相色谱仪；故障；医学生物技术

随着现代医学的发展，采用液相色谱法进行生物技术研究已经成为一种常规方法。目前，在生物化学、生物医学、环境化学等实验室均配备液相色谱仪等先进大型仪器，但是在操作者使用过程中仪器往往会出现不同的问题，亟待解决。鉴于此，以下针对应用液相色谱法进行生物技术研究时出现的常见问题进行分析，并提出合理的解决办法。

1仪器配置

液相色谱仪组成包括高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分。

2故障一

2.1故障现象

进样阀故障。

2.2分析与解决方法

可能原因之一为手动进样阀转动异常。解决方法为若转子太紧，应调整转子的松紧度；若转子密封损坏，应更换或调整转子密封。可能原因之二为手动进样阀载样异常，解决方法是当进样器污染、定量环阻塞和管路阻塞时，对该部分应清洗或更换；当进样阀安装异常时，可重新安装调整。

3故障二

3.1故障现象

漏液故障。

3.2分析与解决方法

可能原因之一为泵漏液，解决方法是若放空阀、比例阀、脉冲阻尼器、压力传感器、泵密封、混合器密封和单向阀等损坏，应维修或更换。可能原因之二为接头处漏液，解决方法是若松动可拧紧，若被污染可及时清洗，若损坏则需维修或更换。可能原因之三为进样阀漏液，解决方法是当转子密封损坏、废液管阻塞和定量环阻塞时，应维修或更换；若进样口密封松动，应重新调整；若进样针头尺寸不符合，应使用适合的进样针；若废液管中产生虹吸，应保持废液管高于废液液面。可能原因之四为检测器漏液，解决方法是当废液管阻塞、流通池阻塞、手紧接头漏液、流通池窗破碎和流通池垫片损坏时，应维修或更换。可能原因之五为色谱柱漏液，解决方法是若筛板厚度不符合，应使用合适的筛板；若卡套内有填料，应拆卸清洗后重新安装；若尾端接头松动，可适当拧紧。

4故障三

4.1故障现象

压力异常。

4.2分析与解决方法

可能原因之一为压力波动，解决方法是若单向阀或泵密封损坏，应维修或更换；若泵中有气体，可以采用溶剂脱气、从泵中除去气体；若脱气不充分，需要重新过滤一遍、溶剂脱气；由于流动相粘度的变化引起的压力波动，可以使用梯度洗脱。 可能原因之二为压力持续偏低，解决方法是若系统漏液或控制器失常，应维修或更换；若流速设定过低，可以调整流速；若色谱柱选择不符合，应选择适合的色谱柱；若柱温过高，则应适当降低温度。可能原因之三为压力持续偏高，解决方法是若进样阀损坏、控制器异常，应维修或更换；若保护柱或在线过滤器阻塞，应清洗或更换；若流动相使用不当或出现缓冲盐的结晶沉淀，应使用恰当的流动相、冲洗柱塞杆；若柱前筛板堵塞，应反冲色谱柱、更换筛板或色谱柱；若流速设定过高，可以调整流速；若色谱柱选择不符合，应选择适合的色谱柱；若柱温过低，则应适当提高温度。 可能原因之四为没有压力显示和流动相流动，解决方法是若保险丝、单向阀、柱塞杆和控制器损坏，则应维修或更换；若是电源问题，应接通电源开机；若泵头内有空气，应采用溶剂脱气、启动泵抽出空气；若流动相不足，应补充流动相、更换入口滤头；若漏液，应维修或更换手紧接头。可能原因之五为流动相流动正常，但没有压力显示，解决方法是若为仪表压力传感器损坏，应维修或更换。

5小结

液相色谱仪是大型精密仪器，若出现故障维修较困难。实验室管理人员应定期培训，熟练掌握该仪器的使用及维护，尽量避免仪器发生故障，从而更好地确保实验的顺利进行。采用液相色谱法的研究人员也应适当掌握部分仪器故障、实验分析等问题的处理方法，从而能够更好地开展医学生物技术等实验研究，确保实验结果的真实可靠。

参考文献：

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[2]JJANG Q, XU T, HUANG J, et al.Analysis of vitamin E metabolites including carboxychromanols and sulfated derivatives using liquid chromatography tandem mass spectrometry[J].J Lipid Res,2015(9):8.

[3]LEI Z, JING L, QIU F, et al.Construction of an Ultrahigh Pressure Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectral Library of Plant Natural Products and Comparative Spectral Analyses[J].Anal Chem, 2015 21,87(14):7373-7381.

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The Application and Maintain of Liquid Chromatograph in Medical Biotechnology

MENG Xiangyu

( Basic Medical Science College, Mudanjiang Medical University, Heilongjiang Mudanjiang 157011， China)

Abstract：Liquid chromatography can be used in the analysis of biological chemistry, biomedicine, environmental chemistry and so on. With the development of modern medicine，the research of biological technology could be carried by liquid chromatography. The aim is to solve common problems in the application of liquid chromatography in biological technology research.

Key words:Liquid chromatograph; failure; medical biotechnology

中图分类号：TH 833

文献标识码：A

作者简介：孟祥玉(1987—),男,助教，硕士，主要从事医学生物技术方向研究。

收稿日期：2015 - 09 - 21

文章编号：1006-446X(2016)02-0068-03