针灸治疗失眠症的基础研究概况

2016-04-05吴建丽姜凡于杰王宇杜冬梅梅荣军

上海针灸杂志 2016年11期

吴建丽,姜凡,于杰,王宇,杜冬梅,梅荣军

针灸治疗失眠症的基础研究概况

吴建丽,姜凡,于杰,王宇,杜冬梅,梅荣军

(黑龙江中医药大学,哈尔滨 150040)

通过文献检索归纳和总结近10年来国内外对针灸促眠作用的基础研究概况,分析了针灸对睡眠剥夺导致脑内神经递质、免疫细胞因子、抗氧化防御系统、激素、神经电生理等方面的异常均有良性调节作用,发现针灸是通过神经-内分泌-免疫系统进行的多途径、多靶点发挥促眠作用。从文献角度表明了针灸治疗失眠症的有效性,同时也为进一步的基础研究提供一些参考和指导。

针灸疗法;失眠症;综述

失眠症(insomnia)是指由身体和环境因素引起的入睡困难、睡眠深度过浅、早醒等症状,是一种常见的睡眠障碍,属于中医学“不寐”范畴。随着分子生物学、免疫学、基因组学、神经电生理学等学科发展,针灸促眠作用的机制研究已经取得了一定的成果,笔者查阅近10年来国内外关于针灸治疗失眠症基础实验研究的相关文献并加以总结,现报告如下。

1 针灸对失眠症脑内神经递质的影响

睡眠与脑干网状结构、下丘脑、大脑皮质等中枢结构密切相关,这些结构中含有的神经递质可以维持正常的睡眠觉醒周期[1],脑内与睡眠相关的神经递质主要有单胺类和氨基酸类两种,因此,针灸可以通过调节这类物质的释放改善睡眠。

睡眠相关的单胺类神经递质主要有5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA),睡眠剥夺可导致大鼠脑内这类物质含量发生改变,其中DA、NE被认为与觉醒状态密切相关[2]。兰妮等[3]发现氯苯丙氨酸(PCPA)失眠大鼠用电针刺神门、三阴交穴治疗后失眠行为明显改善,通过检测不同时间点下丘脑内5-HT、5-HIAA和NE的含量表达,证实电针的镇静催眠作用且后效应可持续12 h以上。周艳丽[4]分别针刺5组腧穴对失眠大鼠进行治疗,结果针刺各组大鼠脑内5-HT免疫阳性细胞数量均增多,而DA的阳性细胞数与模型组无差异,表明针刺可能提高5-HT的含量促进睡眠,而非抑制DA合成。木日根吉雅等[5]采用温针法刺激“顶会穴、赫依穴、心穴”,用高效液相法(HPLC-ECD)测定失眠大鼠下丘脑、海马、前额皮质内的DA含量变化,发现温针组和地西泮组下丘脑的DA含量无显著差异,证明温针法治疗失眠疗效与地西泮相同。

g-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)是参与睡眠调节最重要的氨基酸类神经递质,Glu在中枢神经元的突触传递间起兴奋性作用,大量释放兴奋性增高导致失眠[6],而GABA起抑制性作用,二者的平衡对睡眠起着关键作用。阮继源[7]运用针刺百会、印堂穴治疗失眠大鼠,给予50 Hz的电针刺激,结果与模型组比较,电针组GABA含量明显升高,Glu、Glu/GABA比值明显降低,GABAA受体阳性细胞数增多,提示电针是通过多靶性综合作用提升中枢抑制功能来促进睡眠。木日根吉雅等[8]观察温针法对失眠大鼠海马部位的Glu、GABA含量的影响,发现温针组可显著降低失眠大鼠海马内Glu含量和升高GABA含量,降低大脑兴奋性,调整睡眠周期。刘祖丽等[9]发现不同强度电针对睡眠紊乱大鼠下丘脑GABA含量及受体GABRA1的表达影响差异显著,治疗5 d后,GABA阳性神经元表达量较多, GABRA1mRNA表达升高,且2 V强度刺激较1 V改变明显,说明2 V的镇静催眠作用效果更优。李裕和等[10]对运动性失眠大鼠采用从百会穴沿督脉方向针刺干预,1星期后发现针刺能降低大鼠脑内Glu水平治疗运动性失眠。蒋洁等[11]观察3种电针波形对失眠大鼠下丘脑内氨基酸类神经递质的影响,发现疏波低频电针能更好地调节Glu和GABA的含量和比值,降低神经应激功能而达到镇静安神的作用。

2 针灸对失眠症免疫细胞因子的影响

现代医学认为睡眠是一种稳态机制,与机体的神经-内分泌-免疫调节相关,剥夺睡眠可以影响免疫细胞因子的新陈代谢[12-13],进而反馈于内分泌激素调节失眠。现已发现有促眠的细胞因子主要有白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)[14]。陈丽华等[15]采用酶联免疫法检测睡眠剥夺大鼠海马IL-1b、IL-2及TNF-a含量变化观察针灸的抗睡眠剥夺作用,结果发现电针明显降低海马内这些细胞因子含量改善睡眠,提示细胞因子可能参与了大鼠的睡眠调节。周艳丽等[16]观察比较针刺不同腧穴对失眠大鼠脑内细胞因子含量的影响,实验表明针刺各组均可以提高PCPA失眠大鼠脑内IL-1和TNF的含量,其中申脉、照海组调节作用最好。宋媛等[17]用麦粒灸法观察不同穴位处方对失眠大鼠下丘脑细胞因子的影响及处方间差异,结果显示麦粒灸可能通过提高IL-1b、TNF-a、IL-6的含量作用睡眠-觉醒周期治疗失眠,且神门、三阴交穴组效果优于其他穴组。程少冰[18]通过针刺不同时段睡眠剥夺大鼠模型观察对血清细胞因子水平的影响,发现针刺可提高失眠大鼠血清IL-1b、IL-2、IL-6、TNF-a的含量治疗失眠,且治疗时间越长效果越明显。

3 针灸对失眠症抗氧化防御系统的影响

有研究[19-20]表明,睡眠剥夺能加快新陈代谢,增加自由基,造成实验动物血液、心、脑等多个组织氧化应激加剧,降低了超氧化物歧化酶(SOD)抗氧化酶的活性,形成大量脂质过氧化物丙二醛(MDA),因此,实验中常把MDA和SOD作为机体氧化水平的检测指标。何亮[21]发现在睡眠剥夺后,由于组织内活性氧增多,SOD的活性也是动态变化的,在睡眠剥夺初期,SOD含量先增高,当72 h后的某个时间点,由于机体的抗氧化能力变弱SOD的活性就会下降,并且还发现雌鼠抵抗氧化应激能力更强。肖爱娇等[22]发现热敏灸疗法能改善失眠大鼠的昼夜节律,缩短逃避潜伏期,通过艾灸穴位调动机体的抗病机制,提高血清中SOD活性和降低MDA的含量而达到改善睡眠的效果。吴北峰等[23]利用电项针和黄芪注射液分别干预剥夺睡眠大鼠,通过分光光度计检测大鼠脑干内SOD含量变化,发现两种方法均减轻氧化应激反应,抑制其对中枢系统的神经毒性作用,但在保护神经元细胞方面,电项针效果更优。王雪梅等[24]观察针刺四神聪和足三里对睡眠紊乱型小鼠的影响, 7 d后用黄嘌呤法测定SOD,结果两组腧穴均可调整小鼠睡眠节律,增强SPD活性,且四神聪组穴效果更优。

4 针灸对失眠症血清激素的影响

睡眠剥夺可以导致下丘脑-垂体-肾上腺轴的异常(HPA)亢进,其分泌的生长激素释放激素(GHRH)[25]、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ATCH)[26]、食欲素(ORX)[27]以及松果体分泌的褪黑素(MT)[28]等对睡眠调节有重要意义。赵丽等[29]用艾灸双侧肾俞、足三里穴法干预睡眠剥夺大鼠,造模后发现HPA轴功能亢进,负反馈调节减弱,血清ATCH和CRH水平显著增高,艾灸治疗后含量均降低,说明可通过艾灸法调节HPA轴激素水平改善睡眠。肖爱娇等[30]发现热敏灸对剥夺睡眠大鼠的血清内分泌激素含量有影响,PCPA法导致失眠后,大鼠昼夜节律紊乱、体重减轻,血清中ACTH、GH等激素水平升高,热敏灸可通过双向调节作用恢复激素到正常水平而恢复睡眠周期。窦锡彬等[31]利用艾灸足三里和针刺百会、神门穴的方法治疗失眠患者50例,发现这种联合法可抑制ORX、CRH、ACTH的合成和分泌,恢复HPA轴的功能治疗失眠。吴绮雯[32]采用电针神门、三阴交穴观察对心理应激失眠型大鼠HPA功能的影响,与模型组对比,电针治疗后大鼠脑组织内的CRH以及血浆内ACTH含量均明显减少,抑制了HPA轴的功能,降低了兴奋通路,纠正了异常睡眠状态。刘臻等[33]在不同4个时间点检测大鼠血清MT节律变化,发现在16时出现峰值,20点出现谷值,睡眠剥夺后MT浓度呈降低趋势而节律发生紊乱,电针干预后节律又得到良好恢复。

5 针灸对失眠症神经电生理的影响

脑电图(EEG)是描记脑神经细胞的生物电活动后经过放大的脑电波形,具有较强的时间分辨率和空间结合优势,广泛用于针灸疗效和机制的研究中。睡眠觉醒周期根据脑电波频率和振幅被人为地分为觉醒期(W)、慢波睡眠(SWS)和快波睡眠(REMS)。有研究[34-35]发现,睡眠剥夺后睡眠总时间变短,SWS的S3、S4期变短或消失,觉醒期时间延长。张建新[36]证实电针刺激风池供血穴配合针刺百会、四神聪穴可以延长SWS、REMS和总睡眠时间,说明电针对睡眠时间、睡眠深度、醒来次数均有调节恢复睡眠周期。白妍等[37]观察电针太阳、印堂穴对剥夺睡眠大鼠脑电活动的影响,用16道生理信号记录脑电信号,发现大鼠的睡眠时间延长,SWS2期明显延长,在总睡眠中所占的比例增加,提示电针是通过增加慢波睡眠时间和睡眠深度改善睡眠结构来促进睡眠。傅鸿亮等[38]通过针刺印堂、合谷(双)、足三里(双)的方法治疗失眠患者36例,1个疗程后进行24 h动态脑电检查,发现针刺治疗后脑电SWS睡眠增加,总有效率达97.2%。刘臻等[33]观察电针对失眠大鼠睡眠-觉醒昼夜节律的影响,经穴选用申脉、照海穴,电针频率2 Hz,结果表明干预后电针经穴组W期减少、SWS增多,且短时程睡眠持续时间有减少趋势。

6 讨论

睡眠-觉醒周期是与脑内多个神经结构相关的主动节律性活动,与神经和体液的调节密切相关。近年来的研究已经充分证实了针灸的促眠作用及其相关作用机制,实验表明针灸是通过干预5-HT、5-HIAA、NE、IL-1、TNF、SOD、MDA、CRH、ACTH等一系列物质水平调整睡眠觉醒周期发挥着镇静催眠作用,是在神经递质、免疫因子、内分泌激素及应激反应等神经-内分泌-免疫系统发挥的综合作用,这对针灸的临床治疗和深入的基础研究有重要指导意义。但研究中仍有许多不足之处,①干预选穴多样繁杂,对腧穴特异性处方的研究较少,不同针灸穴位处方组间缺乏比较;②实验研究中忽视刺法和灸法的量学要素作用,较少阐述量学要素对促眠作用的影响;③疗效观测指标缺乏时间点的对比,针灸治疗的最佳效应时间较少研究;④失眠机理研究已经深入到蛋白、基因、信号分子、离子通道等分子层面,但针灸促眠作用在此方面研究较少见报道。

[1] Franco-Perez J, Ballesteros-Zebadua P, Custodia V, Paz C. Major ner- uotransmitters involved in the regulation of sleep-wake cycle[J]., 2012,64(2):182-191.

[2] Berridge CW, Schmeichel BE, Espana RA. Noradrenergic modulation of wakefulness /arousal [J]., 2012,16(2):187-197.

[3] 兰妮,赵仓焕,徐拥建.失眠大鼠5-HT、5-HIAA、NE的针刺时效研究[J].黑龙江中医药,2013,42(2):48-49.

[4] 周艳丽.针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内神经递质5-HT、DA影响的实验研究[J].中医中医基础医学杂志,2012,18(8):887-888.

[5] 木日根吉雅,阿古拉,王月洪,等.蒙医温针对失眠大鼠脑组织多巴胺含量的影响[J].中国民族医药杂志,2014,20(7):50-51.

[6] Shi YF, Yu YQ. The roles of gultamate in sleep and wakefulness[J]., 2013,42(5):583-590.

[7] 阮继源.电针对失眠大鼠脑内谷氨酸、g-氨基丁酸含量及g-氨基丁酸A型受体表达的影响[J].中华中医药杂志,2013,28(12):3657- 3660.

[8] 木日根吉雅,阿古拉.蒙医温针对失眠大鼠海马中Glu、GABA、ACh含量的影响[J].中国民族医药杂志,2014,20(6):43-44.

[9] 刘祖丽,唐成林,余敏,等.不同强度电针对PCPA失眠大鼠下丘脑g-氨基丁酸及受体的影响[J].生命科学研究,2011,15(3):236-240.

[10] 李裕和,张林挺.针刺对运动性失眠大鼠大脑内一氧化氮及谷氨酸含量的影响[J].河南中医,2009,29(6):554-556.

[11] 蒋洁,赵百孝,哈略,等.不同波形电针对PCPA致失眠大鼠下丘脑5-HT和Glu、GABA含量的影响[J].上海针灸杂志,2015,34(7):678 -681.

[12] Kang WS, Park HJ, Chung JH,. REM sleep deprivation increases the expression of interleukin genes in mice hypothalamus[J]., 2013,556(1):73-78.

[13] 刘诗翔,刘枢晓,孔繁一,等.大鼠低氧低温睡眠剥夺后血清TNF-a和IL-6水平变化的研究[J].疑难病杂志,2011,10(12):914-916.

[14] Weschenfelder J, Sander C, Kluge M,. The influence of cytokines on wakefulness regulation: clinical relevance, mechanisms and meth- odological problems[J]., 2012,24(2):112-126.

[15] 陈丽华,胡幼平,罗荣,等.电针百会、三阴交对大鼠睡眠剥夺细胞因子的影响[J].上海针灸杂志,2009,28(11):678-681.

[16] 周艳丽,叶险峰.针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内细胞因子IL-1、TNF-a含量影响的实验研究[J].中国中医基础医学杂志, 2012,18(4):419-420.

[17] 宋媛,赵仓焕,任莉.不同穴位处方麦粒灸对失眠大鼠下丘脑细胞因子IL-1b、TNF-a、IL-6含量的影响[J].中国中医基础医学杂志, 2009,15(4):304-305.

[18] 程少冰.针刺不同时段睡眠剥夺所致失眠大鼠模型行为学及多种细胞因子水平的影响[D].广州:广州中医药大学,2010:36-39.

[19] Lima AM, de Bruin VM, Rios ER,. Differential effects of paradoxical sleep deprivation on memory and oxidative stress[J]., 2014,387(5):399-406.

[20] 徐孝平,潘永明,冷晓霞,等.睡眠剥夺对大鼠抗氧化应激的影响及中药的干预作用[J].浙江中医药大学学报,2011,35(2):234-237.

[21] 何亮.睡眠剥夺对不同性别小鼠氧化应激水平的研究[D].兰州:兰州大学,2013:26-28.

[22] 肖爱娇,付勇,王河宝,等.热敏灸对PCPA致失眠大鼠SOD、MDA的影响[J].江西中医药大学学报,2014,26(2):44-47.

[23] 吴北峰,黄日龙,彭艳.电项针对大鼠睡眠剥夺诱发氧化应激反应影响机制研究[J].针灸临床杂志,2011,27(6):75-78.

[24] 王雪梅,胡斌,高希言.针刺四神聪对睡眠紊乱模型小鼠免疫功能影响的实验研究[J].中医研究,2007,20(7):17-20.

[25] Schussler P, Yassouridis A, Uhr M,. Growth hormone-releasing hormone and corticotropin-releasing hormone enhance non-rapid-eye- movement sleep after sleep deprivation[J]., 2006,291(3):549-556.

[26] Machado RB, Tufik S, Suchecki D. Modulation of sleep homeostasis by corticotrophin releasing hormone in rem sleep-deprived rats[J]., 2010:326151.

[27] Galvão Mde O, Sinigaglia-Coimbra R, Kawakami SE,. Paradoxical sleep deprivation activates hypothalamic nuclei that regulate food intake and stress response[J]., 2009,34(8):1176-1183.

[28] 吴燕川,魏海峰,叶翠飞,等.高效液相色谱法测定睡眠剥夺大鼠松果体内褪黑素含量[J].首都医科大学学报,2009,30(3):399-401.

[29] 赵丽,江钢辉.艾灸对慢性疲劳综合征模型大鼠的行为及下丘脑-垂体-肾上腺轴激素水平的影响[J].山东中医杂志,2014,33(4): 301-303.

[30] 肖爱娇,王河宝,刘海云.热敏灸对失眠大鼠模型血清内分泌激素水平的影响[J].江西中医学院学报,2013,25(4):32-35.

[31] 窦锡彬,张红参,李克明,等.壮医药线点灸联合针刺对失眠患者血浆Orexin及HPA轴的影响[J].右江民族医学院学报,2013,35(1): 9-11.

[32] 吴绮雯.电针神门、三阴交对心理应激失眠大鼠HPA轴功能的影响研究[D].成都:成都中医药大学,2013:44-46.

[33] 刘臻,赵娜,谢晨,等.电针对失眠大鼠睡眠-觉醒昼夜节律及褪黑素节律的影响[C].睡眠疾病临床与相关基础研究学术交流会暨继续教育培训班论文集,2014:50-58.

[34] 张恒义,邵晓卓,周俊.睡眠剥夺疲劳模型大鼠脑电分析[J].航天医学与医学工程,2011,24(5):341-344.

[35] 路英智,任清涛,吴英丽,等.睡眠剥夺对健康成人睡眠脑电图的变化观察[J].现代电生理学杂志,2014,21(1):19-22.

[36] 张建新.针灸结合酸枣仁汤治疗失眠的实验研究[J].辽宁中医药大学学报,2011,13(5):221-222.

[37] 白妍,张倩,东红升,等.电针太阳、印堂穴对戊巴比妥钠所致大鼠睡眠脑电活动的影响[J].针灸临床杂志,2006,22(2):36-37.

[38] 傅鸿亮,张雷.针灸治疗失眠前后脑电波变化的临床观察[J].光明中医,2014,29(3):570-571.

2016-03-11