尖锐湿疣患者外周血T细胞亚群及NK细胞水平及其与尖锐湿疣临床复发的关系

2016-03-25林建华梁月英东莞市凤岗医院检验科广东东莞523690

实验与检验医学 2016年1期

林建华，梁月英(东莞市凤岗医院检验科，广东东莞523690)

林建华，梁月英
(东莞市凤岗医院检验科，广东东莞523690)

摘要：目的探究尖锐湿疣患者外周血T细胞亚群及NK细胞水平及其与尖锐湿疣临床复发的关系。方法选取广东省东莞市凤岗医院2012年5月-2015年4月期间收治的55例尖锐湿疣患者，将其设为观察组，选取同期体检人员55例，将其设为对照组，对2组人员均采用免疫荧光法对外周血T细胞以及NK细胞水平进行检测，随后选择二氧化碳激光消除病例之后，患者应进行复查，并进行为期3个月的随访。结果经随访后，共复发37例患者，复发率为67.27%，同时对比观察组以及对照组的CD4+、CD8+、NK以及CD4+/CD48，且比较复发以及未复发患者的CD8+与CD4+/CD48，以P＜0.05为差异。结论尖锐湿疣患者具有细胞免疫缺陷现象，同时高危型的HPV感染患者具有较高的免疫缺陷风险，而通过检查后发现CD8+T细胞以及CD4+/CD8+能够有效的判断尖锐湿疣患者的预后状况。

关键词：尖锐湿疣；外周血T细胞亚群；NK细胞

尖锐湿疣是因为HPV感染而引发的上皮乳头瘤样增生，其主要传播途径为性接触，少数患者会通过间接接触而产生传染[1]。此病的发病率在近几年来逐年呈现上升趋势[2]。

1　资料与方法

1.1一般资料选取广东省东莞市凤岗医院2012年5月-2015年4月期间收治的55例尖锐湿疣患者，将其设为观察组，男32例，女13例，年龄25~ 68岁，平均40.3±6.4岁。患者均存在一定程度上的皮疹，而患者的发病位置则为尿道口、阴道以及包皮等位置处。在所有患者中，HPV6/11单一型例数为32例，HPV16/18单一型例数为9例，HPV6/11型以及16/18合并感染型为14例。同时选择取同期体检人员55例，将其设为对照组，其中男30例，女20例，年龄26~67岁，平均39.7±5.7岁。2组人员均未产生自身免疫性疾病以及严重慢性疾病，并已签署知情同意书。对比2组患者的一般资料，P＞0.05。

1.2方法采用流式细胞分析仪以及试剂盒对淋巴细胞亚群进行检测。采取2组检测人员的肘静脉血（2ml），并将血液放置在抗凝管中。并选择两支样管，将其标注样本编号，并在样管中标注A、B字样。将20μlCD3/CD8/CD4/CD4加入到A管中，同时将20μlCD3/CD16+56/CD45/CD19加入到B管中。随后采用反向加样法在A管以及B管中加入已经混匀的抗凝全血（50μl），并避光放置15min，此外向每管中增加450μl的FACS溶血素，当充分摇匀之后，在避光位置处放置15min，随后采用流式细胞仪对其进行检测，从而获取最终结果。

1.3复查以及随访[3]每个病例活检组织样本应采用二氧化碳激光将肉眼可以见到的疣体进行清除。患者在治疗后需要每隔两周进行一次复查，如果在以往的治疗位置以及周边1cm中所产生的新疣体，则为复发，详细的观察新产生的疣体，并采用激光进行治疗。治疗后，进行为期3个月的随访，对患者复发次数以及例数进行相应的统计。

1.4统计学处理选用SPSS 21.0统计学软件对研究中的数据进行分析以及处理，研究结果采用计数资料以及计量资料进行表示，结果则通过卡方以及T值进行检测，组间以P＜0.05为差异，具有统计学意义。

2　结果

2.1病例复发次数以及复发率经过3个月的随访，共复发例数为37例，复发率为67.27%；而6/11单一型的复发例数为32例，16/18单一型的复发例数为9例，6/11/16/18的复发例数为10例，3种类型经过比较以P＜0.05为差异，详见表1。

表1　病例复发次数以及复发率的分布结果

2.2对比2组检测人员外周血部分淋巴细胞周群的检测结果对2组人员的外周血部分淋巴细胞周群进行检测，其2组间CD3+通过对比P＞0.05无差异，不具有统计学意义；而对比2组CD4+、CD8+、NK以及CD4+/CD48以P＜0.05为差异，详见表2。

2.3对比复发以及未复发患者外周血部分淋巴细胞周群的检测结果对患者进行检测后，其复发患者的CD3+、CD4+以及NK与未复发患者进行对比，无显著差异，不具有统计学意义，P＞0.05；而对比复发患者与未复发患者的CD8+以及CD4+/CD48，以P＜0.05为差异，详见表3。

表2　对2组检测人员外周血部分淋巴细胞周群的检测结果进行对比

表3　对复发以及未复发患者外周血部分淋巴细胞周群的检测结果进行对比

3　讨论

人体是否可以抵抗HPV局部感染则依靠于人体是否能够在感染过程中形成较为强大的免疫应答，而辅助性T细胞亚群（Th1/Th2）在抗HPV免疫中具有一定的重要意义[4，5]。而Th1/Th2的比值能够进行动态维持，从而确保机体中的免疫功能得以正常进行。此外，在病毒、肿瘤进行清除以及诱导免疫耐受等相关内容具有一定的重要原因[6，7]。大量的临床研究表明，伴随患者病情的不断加深，HPV感染患者体中的Th1以及Th2间所存在的平衡状态被消除，也就是Th1/Th2会产生漂移现象。然而当机体中产生参加到抗体介导的Th2细胞应答时，其CD8+T细胞与自身产生的IL-4、IL-5等Th2型细胞因子具有一定的优势，会对细胞免疫存在一定的免疫抑制性，同时会使CD4+T细胞的增殖产生一定的分化抑制现象，IL-2以及IFNγ的分泌现象逐渐缓解，使得HPV病情发展过快，致使机体对病毒产生相应的耐受作用[8]。

在此研究中，对患者采用特异性荧光抗体进行标记，选择流式细胞仪对55例患者外周血T细胞亚群进行检测，而通过检测能够看出，观察组患者的CD4+T以及CD4+/CD8+比值明显小于对照组，同时CD8+T细胞明显大于对照组；此外，CD4+/CD8+比值明显低于未复发的患者，但是对比CD3+T以及CD4+T后，无显著差异，无统计学意义。

就目前而言，经验有学者通过研究证明高危型HPV16/18型感染的患者其体重具有CTL水平经诱导后所出现的耐受现象，因此具有较高的复发率[9]。而此研究经过分析后发现，低危型HPV6/ 11单一感染患者的复发次数明显少于单一或者混合型HPV16/18的患者，同时CD8+T细胞明显少于后者，与此同时外周血CD4+/CD8+的比值明显大于后者。所以，在确定尖锐湿疣疾病发生、复发以及预后的重要环节中，Th1以及Th2细胞间所产生的作用被损害，也就是说降低CD4+/CD8+的比值具有一定的重要作用，会在引发细胞免疫缺陷的整个过程中，其CD8+T细胞的提升明显比CD4+T细胞的减少更具有意义[10]。为此，我们认为由于CD8+T细胞自身所发生的免疫抑制性细胞对CD4+T细胞在功能上起到一定的抑制效果，而这种效果则比数量上的抑制存在更为显著的关系[11]。HPV6/11型感染患者就较高的CD4+/CD8+比值，并对机体起到一定的诱发作用，从而产生一定强度的细胞免疫反应，而和HPV16/18型感染的患者相比较而言，其CD4+/CD8+比值并不高，所以会产生免疫耐受现象[12]。

NK细胞以及活化NK细胞的逐渐减少能够使降低人体中抵抗病毒的能力。而患者体中的NK细胞自身所具有的活性是通过CD4+T细胞所分泌出的IL-2以及IFNγ实行调节的[8，13]。在此研究中，尖锐湿疣患者外周血NK细胞的比例明显少于对照组患者，然而在复发以及未复发的患者中并无显著差异[14]。所以，在对此疾病产生影响的原因中，NK细胞所具备的活性明显重要于细胞的数量。曾有学者经过研究后发现尖锐湿疣患者外周血中的NK细胞其IL-2的表达能力呈现下降趋势，同时经过研究证明，观察组患者中的IL-2如果呈现加强趋势，其复发率以及平均复发次数也会随之降低，两者所表现出的则是负相关[15]。

综上所述，对患有尖锐湿疣患者采用相关检测方法，按照检测后的最终结果来选择治疗方法，以此来提升临床治疗效果，大大降低了复发率以及复发次数，同时将患者的病程时间减少，消除患者在治疗过程中所产生的心理负担以及压力。然而对没有产生复发指征的患者而言，应对其进行局部治疗，以免因为过度医疗而使患者产生负担，或者增加了复发的几率。

参考文献

[1]陆松松，吴迪，贾玫.蛋白C的检测方法及研究进展[J].实验与检验医学，2013，31(4)：297-299.

[2]谭立明.ELISA法检测的影响因素及其对策[J].实验与检验医学，2013，31(4)：300-305.

[3]杜贵萍，邵燕丽，余俊.血清心脏型脂肪酸结合蛋白在急性心肌梗死发生早期的变化[J].实验与检验医学，2013，31(4)：320-321.

[4]Liang C，Duan R，Lai CC.Check coagulation determination of molecular markers in children the value of early diagnosis of infectious disease complicated with DIC[J].JExp Lab Med，2013，31 (4)：322-325.

[5]温丽丽，李金明.流行性出血热发热期外周血T淋巴细胞亚群与血小板的检测[J].实验与检验医学，2013，31(4)：326-327.

[6]陈玉，王艳琴，蔡利励，等.尿Netrin-1与NGAL联合检测在成人体外循环术后急性肾损伤早期诊断中的意义[J].实验与检验医学，2013，31(4)：328-330.

[7]马小波，梁朝霞，刘玲玲，等.分析前因素对新生儿低血糖症诊断的影响[J].实验与检验医学，2013，31(4)：348-349.

[8]Farmers RX.Pseudo platelet critical value analysis[J].JExp Lab Med，2013，31(4)：349-350.

[9]吴开明.2型糖尿病肾病患者同型半胱氨酸及C反应蛋白联合检测的临床意义[J].实验与检验医学，2013，31(4)：362-363.

[10]魏方，张鹏，范德胜.慢性病毒性肝炎患者抗核抗体检测的临床意义[J].实验与检验医学，2013，31(4)：364-366.

[11]Li N，Chen Y.Investigation and analysis of health check-up crowd obesity[J].JExp Lab Med，2013，31(4)：379-381.

[12]杨健平，朱丰秀，黄棋.赣州市2007年至2012年新发现HIV感染者CD4检测结果分析[J].实验与检验医学，2013，31(4)：381-383.

[13]李泽文.超氧化物歧化酶(SOD)检测对老年性疾病病情和预后监测的临床意义[J].实验与检验医学，2013，31(4)：396-397.

[14]詹泰然，胡维，周红英.无偿献血者用血费用直报模式探讨[J].实验与检验医学，2013，31(4)：397-399.

[15]李黎，陆梅.柳州地区健康人群血清总胆红素和直接胆红素参考范围调查[J].实验与检验医学，2013，31(3)：268-270.

(收稿日期2015-09-28；修回日期2015-11-12)