丙酮在腔镜活检小组织快速诊断中的应用

2016-03-12刘九菊李宝玉

国际检验医学杂志 2016年1期

关键词：丙酮

周　宏，刘九菊，李宝玉

(1.甘肃省华亭县人民医院检验科，甘肃华亭 744100；2.甘肃省华亭县妇幼保健院，甘肃华亭 744100)

丙酮在腔镜活检小组织快速诊断中的应用

周宏1，刘九菊2△，李宝玉1

(1.甘肃省华亭县人民医院检验科，甘肃华亭 744100；2.甘肃省华亭县妇幼保健院，甘肃华亭 744100)

摘要:目的建立简便快捷的腔镜小组织活检流程，缩短腔镜小组织病理诊断时间。方法利用丙酮能与水、乙醇、石蜡相溶的物理特点，建立简便快捷的应用丙酮对腔镜活检小组织标本256例进行快速石蜡切片制作并进行病理诊断。结果应用该法进行组织标本处理及石蜡制片，缩短了病检时间，具有适用范围广、制片质量好、诊断快速等优点。单片出片所需的时间为3～4 h(常规需48～72 h)，制成的蜡块可切出3～5 μm的薄片，切片染色后组织结构和细胞形态清晰，切片优良率达到95%，切片合格率达到100%，与常规切片病理诊断符合率达到100%。结论利用丙酮进行快速石蜡切片制作，取得了很好的效果，值得推广应用。

关键词:腔镜活检；快速诊断；丙酮

胃镜、肠镜等腔镜的检查诊断与治疗具有微创、痛苦小、恢复快等优点，是外科发展的趋势和追求目标，腔镜直视下取活检组织进行病理诊断是腔镜检查的重要一环，对早期肿瘤的诊断与治疗具有重要意义。

常规病理诊断制片技术要经过10 %甲醛固定、不同浓度梯度的酒精脱水、二甲苯透明、浸蜡等多个过程，历时2～3 d，给临床及时诊断、尤其是外地就诊患者造成很大不便。不断提高制片质量，缩短制片时间一直是病理技术中不断研究的课题[1]。近2年来，本科利用丙酮能与水、乙醇、石蜡相溶的物理特点，经过反复试验，建立了简便快捷的方法，应用丙酮对腔镜活检小组织标本256例进行了快速石蜡切片制作，取得了很好的效果，值得推广应用，现将结果报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料收集本院2012年1月至2014年3月作病理诊断活检小组织标本共256例，其中胃镜活检小组织标本116例、肠镜活检小组织标本48例、膀胱镜活检小组织标本36例、宫腔镜活检小组织标本22例、鼻腔镜活检小组织标本14例，其他活检组织小于0.5 cm×0.3 cm×0.2 cm的组织标本20例，其中男性病例156例，女性病例100例，年龄35～83岁，平均年龄56.5岁。

1.2仪器与试剂丙酮(分析纯，天津市富宇精细化工有限公司生产)、石蜡(熔点58℃，由上海华灵康复器械厂生产)、HE染液(购自珠海贝索生物技术有限公司)；徕卡RM2025轮转式石蜡切片机、徕卡BIOMED生物显微镜、亚光YB-6LF生物组织石蜡包埋机、亚光YT-7F生物组织摊片烤片机。

1.3方法活检小标本经取材编号后滴少许5%伊红着色标记，用纱纸包好，再用回形针夹好纱纸以防组织漏出，投入盛装丙酮的试剂瓶中，进行固定、脱水、透明60～120 min(具体视组织标本大小、质地及丙酮试剂使用日期而定)[2-4]，在熔融好的石蜡中浸蜡60～120 min。按常规将组织块进行包埋、切片、染色。

2结果

应用该法进行组织标本处理及石蜡制片，单片出片所需的时间为3～4 h(常规需48～72 h)[5]，制成的蜡块可切出3～5 μm的薄片，切片染色后组织结构和细胞形态清晰，切片优良率达到95%，切片合格率达到100%。

256例标本其中食道鳞状细胞癌18例，食道腺癌12 例，食道慢性炎40例，胃窦、胃体腺癌16例，胃窦、胃体慢性炎30例，结肠腺癌12例，结肠溃疡20例，结肠息肉16例，膀胱移行细胞癌16例，膀胱移行上皮瘤4例，膀胱炎16例，子宫平滑肌瘤5例，子宫内膜息肉17例，鼻腔息肉14例，其他20例。与常规切片病理诊断符合率达到100%。

3讨论

常规病理诊断制片技术要经过10 %甲醛固定、不同浓度梯度的酒精脱水、二甲苯透明、浸蜡等多个过程，历时2～3天，给临床及时诊断、尤其是外地就诊患者造成很大不便。不断提高制片质量，缩短制片时间一直是病理技术中不断研究的课题[6-7]。近2年来，本科利用丙酮能与水、乙醇、石蜡相溶的物理特点，经过反复试验，建立了简便快捷的应用丙酮对腔镜活检小组织标本256例进行了快速石蜡切片制作，取得了很好的效果，值得推广应用。

本法单用丙酮进行一步操作而完成常规标本需固定、脱水、透明三部操作过程及使用甲醛、酒精、二甲苯等多种试剂，既节约了试剂又缩短了病检时间。具有适用范围广、制片质量好、诊断快速等优点，其优势在于：(1)减少病理诊断制片操作环节，缩短诊断和患者就诊时间。(2)避免小组织标本随同常规标本操作造成的过度脱水引起的组织变脆现象。(3)减少因常规操作使用甲醛、二甲苯等有害试剂对环境和操作人员的损害。(4)本法还可用于标本量较少和没有脱水机的医院病理科处理常规标本，不过要延长常规组织在丙酮中的浸泡时间。

丙酮在腔镜活检小组织快速病理诊断中的应用是病理检查的一个好方法，更适用于基层医院病理科及时了解患者肿瘤的良恶性，以期取得最好治疗效果，同时可减少患者就诊等待时间，方便边远地方群众。此法的应用对基层医院病理诊断有十分重要的意义。

为了能确保制片的质量，在本法操作中要注意以下两点：

(1)由于外检标本的组织结构不同，在本法操作中要根据具体情况对组织块在丙酮中的工作时间进行控制，如乳腺、淋巴结、皮肤及新鲜的组织标本，在丙酮中的作用时间可适当延长，以便制出好的切片。

(2)在本法操作中要注意保持丙酮的浓度，且在操作过程中要使标本完全浸入工作液里，防止因组织固定、脱水、透明、浸蜡不好而难以制成好的切片，影响病理诊断。

参考文献

[1]楚广民.超声波快速石蜡切片的制备[J].诊断病理学杂志，2001，8(2)：366-368.

[2]中华医学会.临床操作技术规范：病理学分册[M].北京：人民军医出版社，2004：37-38.

[3]王强，王学德，王勇，等.超声微波快速石蜡切片在微小组织中的应用[J].诊断病理学杂志，2004，4(2)：226-228.

[4]刘海萍，王星斗.常规石蜡切片脱水方案的调整与实验[J].实用医技杂志，2004，6(4)：427-427.

[5]徐建勤，程国平.含蜡组织块脱水不足的补救[J].临床与实验病理学杂志，2010，20(3)：378-378.

[6]谢丽微，周玲玲，周伶俐.不同固定液对延迟处理标本的HE制片的影响[J].温州医学院学报，2010，21(5)：512-513.

[7]肖军兰，张功亮.丙酮在冷冻切片制片中的应用[J].赣南医学院学报，2005，28(5)：601-601.