晚期非鳞非小细胞肺癌胸苷酸合成酶和核糖核苷酸还原酶M1的表达及其与化疗疗效的关系▲

陈镜塘

(广东省东莞市人民医院肿瘤科，东莞市 523200，E-mail：chenjingtang1977@163.com)

论著·临床研究

晚期非鳞非小细胞肺癌胸苷酸合成酶和核糖核苷酸还原酶M1的表达及其与化疗疗效的关系▲

陈镜塘

(广东省东莞市人民医院肿瘤科，东莞市 523200，E-mail：chenjingtang1977@163.com)

目的 探讨胸苷酸合成酶(TS)和核糖核苷酸还原酶M1(RRM1)的表达与培美曲塞或吉西他滨联合卡铂治疗晚期非鳞非小细胞肺癌疗效的关系。方法 晚期非鳞非小细胞肺癌患者70例，分为培美曲塞+卡铂化疗组35例及吉西他滨+卡铂治疗组35例，检测培美曲塞+卡铂化疗组患者肺癌组织TS的水平和吉西他滨+卡铂化疗组患者肺癌组织RRM1的水平，分析客观缓解率(ORR)、无进展生存时间(PFS)与TS、RRM1水平的关系。结果 培美曲塞+卡铂化疗组中TS高表达患者ORR为15.8%(3/19)，低于TS低表达患者的75.0%(12/16)(P<0.05)；TS高表达患者PFS为(2.1±0.6)个月，短于TS低表达患者的(6.6±2.1)个月(P<0.05)。吉西他滨+卡铂化疗组RRM1高表达患者ORR为17.6%(3/17)，低于RRM1低表达患者ORR的72.2%(13/18)(P<0.05)；RRM1高表达患者PFS为(2.2±0.6)个月，短于RRM1低表达患者的PFS(7.1±3.4)个月(P<0.05)。结论 晚期非鳞非小细胞肺癌患者采用培美曲塞联合卡铂化疗时，TS低表达者的临床疗效较好，而采用吉西他滨联合卡铂化疗时，RRM1低表达者的临床疗效较好。

非鳞非小细胞肺癌；晚期；胸苷酸合成酶；核糖核苷酸还原酶M1；培美曲塞；吉西他滨；卡铂；客观缓解率；无进展生存时间

目前肺癌的发病率位居全世界恶性肿瘤之首，每年全球新增肺癌患者近135万例，约占因肿瘤死亡总人数的17.6%[1]。研究发现，超过50%的肺癌患者年龄大于65岁，在临床中非鳞非小细胞肺癌患者确诊时往往已属晚期，5年内死亡率较高，严重影响了老年患者的晚年生活[2]。目前，非鳞非小细胞肺癌的内科治疗多采用紫杉醇、吉西他滨、培美曲塞等第3代化疗药物联合铂类进行化疗[3]，其中培美曲塞能够抑制胸苷酸合成酶(thymidylate synthase，TS)，吉西他滨能抑制核苷酸还原酶的活性。但目前治疗缺乏个体选择性，尚无明确的指标来指导如何准确地选择有效的化疗方案。本研究通过对培美曲塞+卡铂、吉西他滨+卡铂两组一线化疗方案在晚期非鳞非小细胞肺癌患者的临床疗效进行比较，并观察患者肺癌组织TS和核糖核苷酸还原酶M1(ribonucleotide reductase M1，RRM1)的表达，以探讨TS和RRM1表达水平对两种化疗方案疗效的影响。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2011年5月至2013年12月在我院肿瘤内科就诊的非鳞非小细胞肺癌患者70例，所有入选病例均符合国际肺癌研究协会2009年第7版分期标准[4]：(1)已通过肺穿刺、纤维支气管镜活检等方法明确病理诊断，并排除鳞癌；(2)TNM分期为ⅢB或Ⅳ期；(3)Karnofsky功能评分>70分；(4)预计生存期>3个月；(5)患者入院时血常规、肝肾功能结果在正常范围，无化疗禁忌证；(6)肺内至少有1个可测量病灶。排除标准：合并其他重要脏器衰竭者；有精神病或无法配合化疗者。根据随机数字法对纳入研究的受试者分为两组，分别为培美曲塞+卡铂化疗组35例，其中男18例，女17例，年龄60～75(64.4±4.0)岁，病程0.5～3.0(1.3±0.9)年；吉西他滨+卡铂化疗组35例，其中男20例，女10例，年龄55～75(59.0±8.4)岁，病程为0.4～3.0(1.4±0.8)年。两组患者的年龄、性别、病程等资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有患者均自愿加入本研究，并签署知情同意书。

1.2 治疗方法 (1)培美曲塞+卡铂化疗组：给予注射培美曲塞二钠(美国礼来公司生产，进口药品注册号：H20110035)及卡铂(百时美施贵宝公司生产，进口药品注册号：H20110231 )治疗，方案为于第1天予培美曲塞二钠(500 mg/m2)及卡铂静脉滴注，21 d为一个周期[5]；(2)吉西他滨+卡铂化疗组：采用注射吉西他滨(美国礼来公司生产，进口药品注册号：H20110535)及卡铂治疗，方案为于第1天及第8天予吉西他滨(1 000 mg/m2)静脉滴注，第1天予卡铂(300～400 mg/m2)静脉滴注，21 d为一个周期[6]。

1.3 TS和RRM1的检测 化疗前行手术治疗获取患者的肺癌组织石蜡标本切片，采用美国罗氏公司TS免疫组化试剂盒和RRM1免疫组化试剂盒，采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-perosidase，S-P)法检测TS、RRM1的表达，检测相应肺癌组织的TS或RRM1表达水平，培美曲塞+卡铂化疗组仅检测TS表达，吉西他滨+卡铂化疗组仅检测RRM1表达，操作步骤全部严格按试剂盒说明进行，由同一人完成标本的免疫组化检测、微波修复抗原，以山羊血代替一抗作阴性对照[7]。TS、RRM1表达结果判定：采用光镜下观察，TS、RRM1表达阳性为胞浆中出现棕黄色染色，TS、RRM1表达阴性为胞浆中未出现或仅见极个别棕黄色染色[8]；表达程度根据每高倍镜下100个细胞中可见阳性细胞所占的百分率计算，阳性细胞率≥75%为TS、RRM1高表达，<75%为TS、RRM1低表达[9]。

1.4 疗效评估方法 治疗后6个月根据实体瘤的疗效评价标准，临床疗效分为：完全缓解(complete response，CR)为患者靶病灶消失时间长于4周；部分缓解(partial response，PR)为患者靶病灶长径总和在超过4周的时间内缩小高于30%；稳定(stable response，SR)为患者靶病灶长径总和缩小但并未达到部分缓解的标准；疾病进展(progressive disease，PD)为患者靶病灶长径总和增大[10]。客观缓解率(objective response rate，ORR)为CR+PR占总例数的比例；无进展生存时间(progression-free survival，PFS)为治疗开始到肿瘤复发或进展的时间。本研究随访至2014年10月。

1.5 统计学分析 采用SPSS 20.0统计软件进行分析，符合正态分布的计量资料采用(x±s)表示，比较采用t检验，非正态分布的计量资料采用中位数表示，采用秩和检验；计数资料采用χ2检验；以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组的临床疗效 70例患者共化疗306个周期，平均化疗3.6个周期，均可评价临床疗效。培美曲塞+卡铂化疗组CR 3例(8.6%)、PR 12例(34.3%)、SR 13例(37.1%)、PD 7例(20.0%)，ORR为42.9%(15/35)，中位PFS为5.3个月(1.6～9.0个月)。吉西他滨+卡铂化疗组CR 1例(2.9%)、PR 15例(42.9%)、SR 11例(31.4%)、PD 8例(22.9%)，ORR为45.7%(16/35)，中位PFS为5.5个月(1.5～10.0个月)；两组患者ORR及PFS比较，差异无统计学意义(χ2=0.674，P=0.765；χ2=0.845，P=0.642)。

2.2 两组TS、RRM1不同表达水平患者ORR的比较 培美曲塞+卡铂化疗组中，TS高表达患者ORR为15.8%(3/19)低于TS低表达患者的75.0%(12/16)(χ2=12.434，P<0.001)。RRM1高表达患者的ORR为17.6%(3/17)低于RRM1低表达患者的72.2%(13/18)(χ2=8.409，P=0.014)。

2.3 两组TS、RRM1不同表达水平患者PFS的比较结果 培美曲塞+卡铂化疗组中，TS高表达患者PFS为(2.1±0.6)个月，短于TS低表达患者的(6.6±2.1)个月(t=4.563，P<0.001)；吉西他滨+卡铂化疗组中，RRM1高表达患者PFS为(2.2±0.6)个月，短于RRM1低表达患者的(7.1±3.4)个月(t=4.532，P<0.001)。

3 讨 论

晚期非鳞非小细胞肺癌是临床中常见的肺部恶性肿瘤之一，大多数晚期非鳞非小细胞肺癌患者确诊时病情已处于晚期，严重影响了治疗的效果[11]。培美曲塞二钠是近年来研制出的一种多靶点化疗药物，其主要通过干扰晚期非鳞非小细胞肺癌细胞复制过程中叶酸代谢途径，如抑制TS、二氢叶酸还原酶、甘氨酸核糖核苷甲酰基转移酶而发挥抗肿瘤作用[12]。吉西他滨是通过抑制核苷酸还原酶的活性，破坏晚期非鳞非小细胞肺癌细胞复制的二氟核苷类抗代谢物抗癌药，通过杀伤处于S期(即DNA合成期)的晚期非鳞非小细胞肺癌细胞，同时也阻断晚期非鳞非小细胞肺癌细胞由G1向S期过渡，从而发挥抗肿瘤作用[13]。

TS属于一种同源二聚体胞浆酶，可以作为限速酶参与体内脱氧核糖核酸生物合成所需的胸腺嘧啶核苷酸的起始合成过程[14]。晚期非鳞非小细胞肺癌细胞内的DNA 合成水平高于正常细胞，因此在没有外源性胸腺嘧啶的情况下，TS的活性受到抑制。研究表明TS已成为化疗过程中一项非常重要的疗效检测指标[15]，而RRM1是核苷酸结合位点之一，常作为化疗药物的作用靶点[16-17]。本研究结果显示，培美曲塞+卡铂化疗组中TS高表达患者ORR为11.2%，低于TS低表达患者的46.3%(P<0.05)；TS高表达患者PFS为(2.1±0.6)个月，短于TS低表达患者的(6.6±2.1)个月(P<0.05)；这说明培美曲塞化疗的疗效可能与TS表达有关，TS低表达者的疗效更好，获得的PFS较长。而吉西他滨+卡铂化疗组RRM1高表达患者ORR为14.2%，低于RRM1低表达患者ORR的58.9%(P<0.05)；RRM1高表达患者PFS为(2.2±0.6)个月，短于RRM1低表达患者的PFS(7.1±3.4)个月(P<0.05)，这说明吉西他滨化疗的疗效与RRM1表达有关，RRMI低表达者的疗效较好且PFS较长。

综上所述，晚期非鳞非小细胞肺癌患者采用培美曲塞联合卡铂化疗时，TS低表达者的临床疗效较好，而采用吉西他滨联合卡铂化疗时，RRM1低表达者的临床疗效较好。本研究采用随机分组及回顾性分析的方法评估TS、RRM1对这两种治疗方案疗效的影响，存在一定的局限性，有待下一步进行相关前瞻性研究，以更好地指导临床化疗方案的选择。

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Relationship of thymidylate synthase and ribonucleotide reductase Ml expressions with efficacy of chemotherapy for treatment of advanced non-squamous non-small cell lung cancer

CHENJing-tang

(DepartmentofOncology,DongguanPeople′sHospital,Dongguan523200,China)

Objective To explore the relationship of thymidylate synthase(TS) and ribonucleotide reductase Ml(RRM1) expressions with efficacy of pemetrexed or gemcitabine combined with carboplatin for the treatment of advanced non-squamous non-small cell lung cancer.Methods Seventy patients with advanced non-squamous non-small cell lung cancer were divided into pemetrexed+carboplatin group(n=35) and gemcitabine+carboplatin group(n=35).The expression level of TS in lung cancer tissues was detected in the pemetrexed+carboplatin group,and the expression level of RRM1 in lung cancer tissues was detected in the gemcitabine+carboplatin group.The relationship of objective response rate(ORR) or progression-free survival(PFS) with TS and RRM1 expression levels was analyzed.Results In pemetrexed+carboplatin group,the ORR of patients with high TS expression levels was lower than that of patients with low TS expression levels[15.8%(3/19)vs. 75.0%(12/16),P<0.05];the PFS of patients with high TS expression levels was less than that of patients with low TS expression levels[(2.1±0.6) monthsvs. (6.6±2.1) months,P<0.05].In the gemcitabine+carboplatin group,the ORR of patients with high RRM1 expression levels was lower than that of patients with low TS expression levels[(17.6%(3/17)vs. 72.2%(13/18),P<0.05];the PFS of patients with high RRM1 expression levels was less than that of patients with low RRM1 expression levels[(2.2±0.6) monthsvs. (7.1±3.4)months,P<0.05].Conclusion For patients with advanced non-squamous non-small cell lung cancer,the patients with low TS expression levels have superior efficacy when receiving the chemotherapy of pemetrexed and carboplatin,whereas the patients with low RRMI expression levels have superior efficacy when receiving the chemotherapy of gemcitabine and carboplatin. 【Key words】 Non-squamous non-small cell lung cancer,Advanced,Thymidylate synthase,Ribonucleotide reductase M1,Pemetrexed,Gemcitabine,Carboplatin,Objective response rate,Progression-free survival

广东省东莞市医疗卫生科技计划项目(201110515001105)

陈镜塘(1977～)，男，本科，主治医师，研究方向：肿瘤内科学。

R 734.2

A

0253-4304(2016)07-0945-04

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.07.15

2016-03-31

2016-06-20)