血清EB病毒抗体检测在鼻咽癌中的作用与地位*1

2016-03-10魏世鸿综述王小虎审校

国际检验医学杂志 2016年10期

关键词：鼻咽癌诊断

魏世鸿综述，王小虎审校

(甘肃省肿瘤医院放疗科，甘肃兰州 730050)

·综述·

血清EB病毒抗体检测在鼻咽癌中的作用与地位*1

魏世鸿综述，王小虎审校

(甘肃省肿瘤医院放疗科，甘肃兰州 730050)

关键词:鼻咽癌；EB病毒抗体；诊断；疗效预后

鼻咽癌是我国常见的恶性肿瘤之一，尤其是在广东省和香港南部地区等讲粤语的人群中高发[1-2]。EB病毒(EBV)是一种传染性单核细胞增多症，与鼻咽癌、伯基特淋巴瘤以及多种淋巴瘤的发生密切相关[3]。被病毒感染的细胞具有EBV的基因组，并可产生各种抗原，感染EBV的鼻咽癌患者根据EBV核抗原，早期抗原，膜抗原，衣壳抗原均产生相应的IgG和IgA抗体，故绝大多数鼻咽癌患者血清中有抗EBV抗体的存在[4]，其水平随着病情的变化而发生变化，是鼻咽癌的诊断、治疗后疗效判定和预后的可靠指标之一。

1血清EBV抗体水平在鼻咽癌诊断中的作用

1.1血清EBV抗体水平单独检测在鼻咽癌诊断中的作用血清EBV抗体水平检测是潜在的肿瘤诊断方法，EBV衣壳抗原抗体是伴随鼻咽癌发生发展的唯一生物标记，其作为单一检测在鼻咽癌中的作用是有限的，但其水平检测可作为鼻咽癌早期筛选的工具是可行的[5-6]。在中山市进行的一项鼻咽癌人口普查研究报道，血清中EBV衣壳抗原抗体IgA(EBV-VCA/IgA) 阳性的人群其发生为鼻咽癌的相对危险度(RR)比健康人群高5.8倍[7]。由EBV-VCA/IgA的检测有较高的假阳性，为鼻咽癌的诊断带来一定的困难。此外，EBV早期抗原抗体IgA (EBV-EA/IgA)是一个非常特殊的生物标记物，它的测定通常是与EBV-VCA/IgA同时用于鼻咽癌的诊断，联合检测可以提高鼻咽癌诊断的阳性率[7]。

1.2血清EBV抗体联合其他标志物检测在鼻咽癌诊断中的作用人体感染EBV后，可产生对应的抗原，如EBV核抗原，早期抗原，膜抗原，衣壳抗原均可以产生相应的IgG和IgA抗体，并存在于鼻咽癌患者的血清中，由于单一抗体检测的价值有限，需要多个抗体进行联合检测的提高检测的敏感性。并且与其他标记物联合的抗体检测较单一抗体检测更能提高鼻咽癌诊断的准确性。

1.2.1EBV-VCA/IgA、EBV-EA/IgG、EBV-EA/IgA联合检测为探讨鼻咽癌患者中EBV-VCA/IgA联合EBV早期抗原抗体IgG (EBV-EA/IgG)检测在鼻咽癌诊断中的作用，李筱莉等[8]用酶联免疫吸附试验对300例鼻咽癌患者同时检测血清EBV-VCA/IgA、EBV-EA/IgG和EBV-EA/IgA 3种抗体，评价在鼻咽癌的血清学诊断和筛查中单项和联合检测EBV抗体对的价值，结果显示联合检测EBV-VCA/IgA和EBV-EA/IgG灵敏度可高达97.2%，明显高于单项EBV-VCA/IgA、EBV-EA/IgG或EBV-EA/IgA的检测。EBV-VCA/IgA联合EBV-EA/IgA检测提高了鼻咽癌筛查的准确率，陈云等[9]用酶联免疫吸附试验法检测228例鼻咽癌患者的血清标本，102例正常健康体检者血清标本中EBV特异性EBV-VCA/IgA和EBV-EA/IgA抗体水平，结果显示联合检测EBV特异性EBV-VCA/IgA和EBV-EA/IgA诊断鼻咽癌，阳性预测值达到99%，具有较高的诊断意义。

1.2.2EBV-VCA/IgA、EBV-EA/IgA、EBV-特异性DNA酶及EB病毒DNA联合检测罗耀凌等[10]收集160例治疗前的鼻咽癌患者和76例健康成人的血清和血浆，应用免疫酶染色法检测血清EBV-VCA/IgA、EBV-EA/IgA及检测EBV-特异性DNA酶抗体，同时用实时荧光定量聚合酶链反应(QR-PCR)分析血浆EB病毒DNA来评估其在诊断鼻咽癌中的价值，结果显示单项检测时对鼻咽癌患者诊断的敏感性和特异性EBV-VCA/IgA为90.0%和89.5%，EBV-EA/IgA为75.0%和94.7%，EBV-特异性DNA酶为76.3%和90.8%，EB病毒DNA为68.8%和88.2%；联合检测的敏感性和特异性分别为98.8%和84.2%。因此可以看出联合检测可以明显提高血清学检测在鼻咽癌筛查和诊断中的价值。

1.2.3EBV-VCA/IgA与热休克蛋白70联合检测Chen等[11]收集38例鼻咽活检的鼻咽癌患者的新鲜组织标本和血清学标本，结果HSP70表达和含量与血清EBV-VCA/IgA滴度呈正相关。也有研究报道提示鼻咽癌细胞中EB病毒随癌细胞增生加速而增多，可能是患者EBV-VCA/IgA滴度升高的原因[12]；也可能是EB病毒等因素刺激导致了热休克蛋白70的表达；亦可能与热休克蛋白70表达使EBV感染的肿瘤细胞得以大量增殖有关。热休克蛋白70在鼻咽癌组织中表达与鼻咽癌发生危险度有关[13]。这些都为鼻咽癌的联合诊断提供了可靠的理论依据。

1.2.4EBV-VCA/IgA、铁蛋白、细胞角蛋白19片段联合检测黄玲莎等[14]采用免疫酶法及电化学发光免疫分析等技术，检测184例鼻咽癌患者，其中52例鼻咽良性疾病患者、82例正常对照者血清中的EBV-VCA/IgA、铁蛋白及细胞角蛋白19片段的表达水平。结果鼻咽癌组EBV-VCA/IgA、铁蛋白、细胞角蛋白19片段敏感性分别为79.3%、46.7%、42.4%，3项联合检测敏感性为92.4%，与单项检测比较差异具有统计学意义(P<0.05)。EBV-VCA/IgA、铁蛋白、细胞角蛋白19片段联合检测对鼻咽癌的诊断具有较高的临床价值。

1.3血清EB病毒抗体在鼻咽癌患者分期中的作用鼻咽癌分期是根据个体内原发肿瘤以及播散程度来描述恶性肿瘤的严重程度和受累范围，临床上鼻咽癌的分期主要依据是MR、CT、PET-CT等影像学资料，蔡永林等[15]收集211例未经治疗的鼻咽癌患者的血清，用酶联免疫吸附试验检测Rta/IgG、EBV核抗原抗体IgA，用免疫酶法检测EBV-VCA/IgA及EBV-EA/IgA抗体，按“92分期法”进行分期，分别计算各T、N、M分期及临床分期的各抗体阳性率及抗体水平并进行统计学分析。结果鼻咽癌各T、N、M分期及临床分期组Rta/IgG抗体rA值差异均无统计学意义(P>0.05)；T1期的EBV核抗原抗体IgA 的Ra值明显低于其他T分期，N0期明显低于其他N分期，临床Ⅰ期明显低于其他临床分期(P<0.05)；EBV-VCA/IgA、EBV-EA/IgA抗体滴度各N分期及临床分期间比较，差异有统计学意义(P<0.05)。在早期鼻咽癌中EBV核抗原抗体IgA表达水平相对较低；而EBV-VCA/IgA、EBV-EA/IgA水平与淋巴结转移程度呈相关性，对临床分期有一定的参考价值。罗耀凌等[10]通过临床试验观察发现EBV特异性DNA酶抗体阳性率随着临床分期升高而增加，罗晚媛等[16]研究发现血浆EBV-DNA 拷贝数和鼻咽癌的分期有直接关系，证明了在不同分期的鼻咽癌患者中，EBV-DNA 的水平是有差异的。

1.4血清EB病毒抗体在鼻咽癌组织分型中的作用鼻咽癌以鳞状细胞癌较多，其分化程度越高，EBV-VCA/IgA抗体滴度越低。有研究报道鼻咽癌多数为低分化鳞癌，产生EBV-VCA/IgA抗体滴度高，而高分化鳞癌患者EBV-VCA/IgA滴度较低。

1.5血清EB病毒抗体在鉴别诊断中的作用大量研究表明EBV感染与鼻咽癌的发生发展密切相关，EBV相关抗体如VCA-IgA、EA-IgA和RTA-IgG等可作为鼻咽癌辅助诊断的血清学指标[17-18]。多项研究结果显示：VCA-IgA和EA-IgA联合检测，在鼻咽癌血清学诊断中虽然具有互补作用，但敏感度不高，检测时多项指标联合有互补的作用，可用于高发地区鼻咽癌人群的筛查和早期诊断，建议其中一项阳性者应该进行相关检查或定期复查，以便提高早期无症状鼻咽癌检出率；如果任意两项以上指标为阳性时，应当高度怀疑鼻咽癌可能，实现早期无症状鼻咽癌的准确诊断[19-20]。

2血清EB病毒抗体水平在鼻咽癌放疗效果及预后的判断

在临床中，鼻咽癌放疗效果及预后主要依靠磁共振(MR)、计算机断层扫描(CT)及功能影像如PET-CT等。而上述检查费用昂贵且对人体有损害。血清EB病毒抗体作为肿瘤临床标记物在鼻咽癌的筛查、早期诊断、鉴别诊断上已得到充分的肯定和广泛的应用。但其水平与疗效及预后的关系，在国内外尚存在一定的分歧[21]。Neel等[22]报道，治疗前北美鼻咽癌患者的VCA/IgG、EA/IgA和EA/IgG 水平均不能反映预后；长期随访结果提示，治疗后系列EB病毒血清学水平也不能准确地预测鼻咽癌患者的治疗效果[23]。而国内凌伟等[24]报道，中国广东省四会市鼻咽癌患者EBV-VCA/IgA抗体水平无论在单因素还是多因素分析均显示与患者的总生存时间有相关，在治疗前VCA/IgA效价越高，其生存时间越短。Liu等[25]研究发现，治疗前VCA/IgA效价水平是影响鼻咽癌患者生存的预后因素，而VCA/IgG则与局部控制相关，刘孟忠等[26]则报道，治疗前VCA/IgA 高水平组鼻咽癌患者的生存期明显短于低水平组患者。蔡永林等[27]研究发现，治疗前鼻咽癌患者高滴度的EB病毒VCA/IgA、EA/IgA抗体水平提示在治疗结束后，远处转移或其局部复发的风险较高，认为VCA/IgA、EA/IgA可为鼻咽癌患者预后判断、个体化治疗提供帮助。

3EBV-VCA/IgA与肿瘤相关物质群的鼻咽癌治疗前后检测意义

肿瘤相关物质群(TSGF)是一种新型的肿瘤标记物，是数种国际公认的与恶性肿瘤生长相关的糖类物质和代谢物的统称。当肿瘤产生时，血液中TSGF水平升高，是肿瘤早期发现及放化疗、转移、复发的重要线索。聂林等[28]研究发现，鼻咽癌患者放疗后血清肿瘤相关物质群水平和阳性率均明显下降，患者放疗前后血清EBV-VCA/IgA水平和阳性率降低，鼻咽癌患者血清TSGF水平与病变程度有关，临床各分期TSGF水平也升高，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间差别无显著性，但Ⅳ期与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间差异有显著性，说明TSGF水平可以反应病变程度，并且可以和血清EB病毒联合反映病变的程度，为临床诊断提供一定的参考。

4EB病毒血清检测在鼻咽癌随访中的作用

放疗为目前鼻咽癌最有效的治疗方法，随访中多借助CT、MRI、正电子发射断层显像(FDGPET)等。但鼻咽癌放疗后局部复发和纤维化在平扫和常规增强的CT或MRI图像上呈相近的密度,造成影像学鉴别困难。目前VCA-IgA和EA-IgA在肿瘤普查和辅助诊断中有较大意义，也有学者发现定量检测血浆EBV-DNA水平对监测鼻咽癌放疗后有无复发及转移有意义,可作为鼻咽癌放疗后监测复发及转移的有效指标[29]。谢莹等[30]经过Meta分析发现定量PCR检测外周血中血浆和血清中的EBV-DNA是监控NPC治疗后肿瘤是否完全消退和是否发生复发及远处转移有效和可靠的方法。可考虑临床上推广应用。

综上所述，血清EBV抗体具有辅助诊断鼻咽癌的作用，其治疗前后血清EBV抗滴度幅度的变化一定程度上可以提示鼻咽癌患者治疗的情况。并且对于鼻咽癌患者的放疗生物效果及预后做出辅助性的判断，可以更好的对患者进行综合治疗，并改善其预后。由于鼻咽癌患者晚期的治疗疗效和预后影响因素相对比较多，所以在其疗效预测和预后判断方面的研究相对较少，需要进一步研究探讨血清EBV抗体在晚期鼻咽癌中的应用价值。

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*基金项目:甘肃省科技厅创新团队资助项目(098TTCA009)；甘肃省科技厅科技发展资助项目(0912TCXA009)。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.032

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)10-1380-03

(收稿日期：2015-12-18)