不同离心处理对全自动血型分析系统检测结果的影响

王　霞，潘　彤，杨文玲

(天津市血液中心检验科，天津 300110)

·经验交流·

不同离心处理对全自动血型分析系统检测结果的影响

王霞，潘彤，杨文玲△

(天津市血液中心检验科，天津 300110)

摘要:目的探讨血型检测中不同标本处理方式对BECKMAN PK7300全自动血型仪检测结果的影响。方法选择100例已知ABO血型标本进行3种离心处理：即3 000 r/min离心5 min(A组)、3 090 r/min离心10 min(B组)和4 000 r/min离心10 min(C组)，然后再进行ABO及Rh血型检测。结果A、B两组ABO及Rh血型正确判读率均为100%，均未出现错误和可疑结果；C组ABO及RH血型正确判读率分别为为79%和82%，分别出现可疑结果21和18例。结论作为全自动血型检测系统运行的关键环节之一，标本处理方式的合理选择会直接影响血型结果的准确性。

关键词:全自动血型检测系统；离心处理；ABO血型

ABO血型检测是献血者常规血筛检测项目之一，已有实验室开始使用全自动血型检测系统。目前使用的血型仪多为开放式检测系统，设备厂家向用户推荐部分设备使用参数。按照《血站实验室质量管理规范》、GBT22576-2008/ISO15189-2007《医学实验室质量和能力的专用要求》 、ISO/IEC15189-2007《医学实验室质量和能力的认可准则》及《血站技术操作规程》(2012版)的要求，血站血筛实验室在采用一项新的检测方法，或更换现有检测方法时，在正式投入使用之前应对与检测相关的参数进行确认。本文以BECKMAN PK7300全自动血型仪为例探讨不同标本处理方式对血型检测的结果是否造成影响。

1资料与方法

1.1一般资料来自本中心无偿献血者EDTA-K2抗凝血液标本100例，其中A、B、O及AB型各25例。

1.2仪器与试剂BECKMAN PK7300全自动血型仪(美国贝克曼公司)；标准A、B、O红细胞(上海血液生物医药)，抗A、抗B和抗D标准抗血清(上海血液生物医药)； BECKMAN PK7300全自动血型分析系统配套使用P3、P4梯形微孔板。

1.3方法在已知血型标本中挑选出100例标本其中A、B、O及AB各25例，先后进行3种离心处理：(1)使用PK7300全自动血型分析系统操作指南中推荐的标本离心参数3 000 r/min离心5 min将此组设定为A组；(2)考虑到本血站酶免与血型同为一个标本管，在保证酶免的离心要求下验证此离心条件对血型检测是否有影响，选择3 090 r/min离心10 min的离心参数此组设定为B组；(3)选择本实验室最高离心速度即4 000 r/min离心10 min作为对照组设定为C组，用以验证指南中提及高速离心影响检测结果的结论。

1.4统计学处理利用SPSS16.0统计软件进行数据分析，采用多个独立标本非参数检验的Kruskal-Wallis检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1BECKMAN PK7300全自动血型仪3种离心处理后ABO血型检测结果采用BECKMAN PK7300全自动血型仪对3种离心处理后ABO血型进行检测，并对不同组正确判读率进行比较，三组间正确判读率差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1　　3种离心ABO检测结果

2.2BECKMAN PK7300全自动血型仪3种离心处理后Rh血型检测结果 采用BECKMAN PK7300全自动血型仪对3种离心处理后Rh血型进行检测，并对不同组正确判读率进行比较，三组间正确判读率差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2　　3种离心处理Rh检测结果

3讨论

血型的正确鉴定是血站检验科最重要的常规检测之一，因为血型正确与否关系到受血者的生命安全[1]。血站质量手册中明确规定提供给临床的血液制品ABO及RH血型正确率必须为100%。国内大多数血站以往普遍采用U型微板联合酶标仪的检测方法，但该法的缺点是过程繁琐且易受人为及外界因素的影响[2]。如反应环境的温湿度、离心力大小及震荡强度等，使结果出现偏差从而造成严重的事件。目前多种血型自动化检测系统受到关注，BECKMAN PK7300以其自动化程度高、标准化、检测通量大及能实现批量化[3-4]检测等优点受到用户的青睐。BECKMAN PK7300全自动血型检测仪加样精密度高、血型结果有原始图像记录跟踪，保证检测结果的可靠性和可溯性、有效降低工作强度、防止人为错误、提高实验效率和正反定型判读准确性及节约试剂成本等优点。

本研究在仪器使用前确认研究中在仪器用户指南中注意到推荐的标本离心条件有3种：(1)转子半径15 cm转速3 000 r/min离心5 min；(2)转子半径20 cm转速2 500 r/min离心5 min；(3)转子半径30 cm转速2 000 r/min离心5 min。为此本课题对3 000 r/min离心5 min的离心条件进行确认。试验结果显示此离心条件下ABO及RH血型正确判读率均为100%。考虑到本血站的体采科的留样现状无法改变，在保证酶免检测的离心要求下验证此离心条件是否影响全自动血型仪的血型检测，因此对3 090 r/min离心10 min的离心方式来进行验证及确认，试验结果显示ABO及Rh血型正确判读率均为100%。以上2种离心方法的检测结果均达到血型定性试验正确判读率大于95%的可接受标准。为此确定3 090 r/min离心10 min作为本实验室血型检测的标本处理方法。此外，也对4 000 r/min离心10 min的检测结果ABO及RH正确判读率分别为79%和82%的原因进行了分析，可能是由于高速离心使血细胞压得过紧以至于细胞吸样受到阻碍，导致细胞加注过少再进行稀释后从而影响结果判读。3种离心处理的正确判断率比较虽然无统计学差异，但4 000 r/min离心10 min的正确判读率未达到血型定性试验判读率的要求，而且与指南推荐的参数差异较大因此离心条件不适用。综上所述，全自动血型检测中标本处理方式对检测结果起到关键作用，应遵照厂商指南中推荐条件进行验证，若当试验参数有所变化时应做好检测系统与标本前处理条件的确认与优化，以保证检测结果的准确可靠。

参考文献

[1]Kumar US,Ghosh K,Gupte SS,et al.Role of HLA antigens in Rh (D) alloimmunized pregnant women from Mumbai,Maharashtra,India[J].J Biosci,2002,27(2):135-141.

[2]陈显，刘洲君，朱绍汶，等．全自动血型仪在血型检测中的应用[J]．临床输血与检验，2014，16(3)：250-252．

[3]谢敬文，严康峰，马伟文，等．数字全自动血型仪在无偿献血者血型检测中的应用[J]．中国输血杂志，2006，19(1)：36-37．

[4]李俊杰．手工与自动血型仪检测ABO血型方法的比较[J]．中国实用医药，2011，6(8)：242-243．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.061

文献标识码：B

文章编号：1673-4130(2016)10-1433-02

(收稿日期：2016-02-03)