东莞地区珠蛋白生成障碍性贫血筛查及基因谱分析

邵锦欢,肖　翔,张达秀,钟阳青

(东莞市塘厦医院检验科，广东东莞 523721)



·论著·

东莞地区珠蛋白生成障碍性贫血筛查及基因谱分析

邵锦欢,肖翔,张达秀,钟阳青

(东莞市塘厦医院检验科，广东东莞 523721)

摘要:目的了解东莞地区珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)的发生率及基因谱特征。方法收集2014年6月至2015年5月来该院就诊的门诊/住院患者的血液，根据血常规、电泳结果筛查疑似病例，再进行Gap-PCR和反向斑点杂交法(RBD)确诊地贫类型。结果7 845 例样本中疑似病例1 132例，疑似病例中检出α和β地贫共662例，地贫基因总携带率为8.44%(662/7 845)。其中α-地贫412例，占5.25%，最常见的为αα/--SEA、-α3.7/αα两型分别占α-地贫的61.17%和17.48%，还检测出1例HKαα/--SEA混合型；β-地贫250例占3.19%，最常见的为βCD41-42/βN、βIVS-Ⅱ-654/βN、βCD17/βN这3型分别占β-地贫基因型的37.6%、23.2%和16.0%；α-地贫复合β-地贫12例占0.18%。结论广东省东莞市为地贫高发地区，应该加强婚前检查、遗传咨询，减少地贫患儿的出生率，提高人口素质。

关键词:珠蛋白生成障碍性贫血；基因谱；流行病学调查

珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫),它是一种单基因遗传病，可导致遗传性溶血性贫血，分为α-珠蛋白生成障碍和β-珠蛋白生成障碍两种类型[1-2]。本病高发于地中海沿岸及东南亚各国，我国以南方地区多见，尤以广东、广西和海南为甚[3]，据报道广东省地贫基因的携带率达 11.07%左右[4]。地贫特别是重型地贫已给患儿的家庭和社会带来了巨大的损失和负担[5]，是导致出生缺陷高发，以及围产儿和婴儿死亡的一个主要原因[6]。国际国内的研究均表明，通过婚前、孕前检查及产前筛查等防控措施可有效减少地贫患儿的出生[7]。本文通过调查和分析本地区的地贫基因携带率为遗传质询和产前检查提供依据。

1资料与方法

1.1一般资料2014年6月至2015年5月来本院就诊的门诊/住院患者总7 845例，其中男性2 806例，女性4 039例,年龄1月至83岁。

1.2仪器与试剂血常规分析仪使用日本SYSMEX XE-5000血液分析仪；血红蛋白电泳分析使用法国Sebia全自动电泳分析仪做琼脂糖凝胶电泳；基因检测使用深圳亚能公司的诊断试剂盒。所有仪器均使用配套试剂。

1.3方法

1.3.1标本收集每一个实验对象使用EDIA抗凝管采集血液2～3 mL；初筛阳性的患者采集枸橼酸钠抗凝血3 mL进行PCR检测。

1.3.2初筛每一份标本都使用SYSME XE-5000血液分析仪进行血常规检测，观察红细胞平均体积(MCV)和平均血红蛋白水平(MCH)两项指标，MCV<80 fL、MCH<27 pg则使用琼脂糖凝胶电泳进行血红蛋白电泳检测。血红蛋白电泳异常的标本判断为初筛阳性。

1.3.3地贫基因分析初筛阳性的标本使用亚能生物技术(深圳)有限公司的试剂盒分别检测α-地贫基因和β-地贫基因；其中α-地贫基因检测3种常见缺失型，分别为-SEA、-α3.7、-α4.2和3种我国常见的非缺失型，分别为αQSα、αWSα、αCSα；β-地贫基因17种突变，分别为41-42M、654M、-28M、71-72M、17M、13EM、IVS-Ⅰ-IM、27/28M、43M、-29M、31M、-32M、-30M、14-15M、CAPM、IntM、IVS-I．5M。检测操作严格按照试剂说明书的要求进行。

2结果

2.1地贫基因携带情况7 845例样本中地贫初筛阳性例数为1 132例。初筛阳性的样本检测出地贫基因总数为662例，其中α-地贫412例占62.36%，β-地贫250例占37.64%，其中α-地贫复合β-地贫有12例占0.18%。

2.2α-地贫基因检测本次调查共检测出α-地贫基因412例，试剂盒声明的3种缺失型和3种非缺失型都有检出，其中最常见的为αα/--SEA、-α3.7/αα两型分别占α-地贫的61.17%和17.48%，其次为ααCS/αα、-α3.7/--SEA、αWSα/aa这3种基因类型，分别占α-地贫的5.83%、4.85%、2.91%。本次还检测出1例HKαα/--SEA混合型。

2.3β-地贫基因检测共检出β-地贫250例，其中最常见的为βCD41-42/βN、βIVS-Ⅱ-654/βN、βCD17/βN这3型分别占β-地贫基因型的37.6%，23.2%和16.0%，其次为β-28/βN、βE杂合子、βCD71-72/βN这3种基因型，分别占8.80%、4.80%、4.00%。此外本研究还检测出基因型βIVS-1-1，βCD27/28，β-29/βN 和βCD43/βN 等少见基因型。

2.4α-地贫复合β-地贫基因检测本次共检出12例复合型，其中-α3.7/αα复合βCD41-42/βN基因型3例，αWSα/aa复合β-28/βN基因型2例，-α3.7/αα复合βE杂合子、-α3.7/αα复合βCD17/βN αWSα/aa，αWSα/aa复合βIVS-Ⅰ-1，αα/--SEA复合βCD17/βN，αα/--SEA复合βCD71-72/βN，ααCS/αα复合βIVS-Ⅰ-16种基因型各1例。

3讨论

地贫是一种血红蛋白病，是由于调控珠蛋白合成的基因缺失或突变引起的一种单基因隐性遗传病。最常见的为α-地贫和β-地贫两种类型。

α-地贫基因位于16号染色体短臂13区3带(16 P13.3)。其缺陷主要为缺失型和非缺失型，缺失型主要包括左侧缺失(-α4.2)、右侧缺失(-α3.7)和缺失两个α珠蛋白基因的东南亚型(-SEA)。非缺失型主要为基因突变(αTα)。在中国人中最常见的突变类型主要有3种，分别为αQSα、αWSα、αCSα。本研究中共发现了412例α-地贫基因缺陷者，其中东南亚型(-SEA)占61.17%，右侧缺失(-α3.7)占17.48%，点突变ααCS 占5.83，-a3.7/--SEA占4.85%，这4种基因型占了α-地贫基因基因总数的89.33%。α-地贫基因总缺陷率为5.25%，这与相关研究报道结果相符。

β-地贫基因位于11号染色体短臂1区2带(11P1.2)，其主要为点突变。我国常见的突变类型有17种，分别为41-42M、654M、-28M、71-72M、17M、13EM、IVS-I-IM、27/28M、43M、-29M、31M、-32M、-30M、14-15M、CAPM、IntM、IVS-I-5M。在本次调查中一共检出β-地贫基因缺陷250例，其中βCD41-42/βN、βIVS-Ⅱ-654/βN、βCD17/βN这3种分别占37.6%、23.20%、16.0%。β-地贫基因总缺陷率为3.19%。

本研究还检测出了12例α-地贫复合β-地贫和1例HKαα/-SEA复合地贫。HKaa是种极少见的非平衡交叉连接，表现为在同一条染色体上同时含有-a3.7缺失的交叉连接片段[8-9]。基因型为HKaa/aa的患者易被诊断为-a3.7/αα，与健康者比较，HKαα/αα患者的球蛋白mRNA 水平无明显不同。

地贫为染色体隐性遗传病，如果夫妇双方均为携带者，则他们的后代中有1/2的概率为地贫基因携带者，有1/4的概率为地贫患者。目前对于轻型地贫还没有有效的治疗方法，重症α-地贫常出现死胎和出生后水肿随后死亡，重症β-地贫在出生后3～6月出现贫血症状，只能通过造血干细胞移植能是患者得到长期的血液学疗效，否则需要长期输血来维持生命。无论是造血干细胞移植还是输血治疗对于一个家庭来说都是一个沉重的负担。因此加强婚前检查和遗传质询，提高地贫检出率，优生优育减少地贫患儿的出生率对于家庭和社会都有重要意义。

参考文献

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[5]Kojima M,Hosoda H,Date Y,et al.Ghrelin is a growth-hormone-releasing acylated peptide from stomach[J].Nature,1999,402(6762):656-660.

[6]朱慧明．24 743例婚检人群地中海贫血筛查情况分析[J]．中国妇幼保健，2011，26(23)：3598-3599．

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Thalassemia gene detection and investigate in Dongguan

ShaoJinhuan,XiaoXiang,ZhangDaxiu,ZhongYangqing

(DepartmentofClinicalLaboratory，TangxiaHospitalofDongguan,Dongguan,Guangdong523721，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the type of gene mutation and its distribution in patients with thalassemia in Dongguan．Methods7 845 specimens collected from the patients and individuals with physical examination in our hospital from June 2014 to May 2015 were performed according to the results of routine blood and electrophoresis screening with suspected cases．The specimens with phenotype positive were definitely verified the thalassemia type by using Gap-PCR and reverse dotblot(RDB).ResultsAmong 7 845 specimens，suspected cases of 1 132 cases,662 specimens were finally diagnosed as α-thalassemia and β-thalassemia,with the thalassemia carrying rate of 8.44%(662/7 845),including 412 cases(5.25%) of a-thalassemia.The most common type of αα/--SEA,-α3.7/αα accounted for 61.17% and 17.48% in α-thalassemia,also detected HKαα/--SEA mixed type in 1 case and 250 cases(3.19%) of β-thalassemia cases．The most common type of βCD41-42/βN，βIVS-Ⅱ-654/βN，βCD17/βN accounted for 37.6%，23.2%,16.0% in β-thalassemia.The α-thalassemia composite β-thalassemia for 12 cases(0.18%).ConclusionDongguan city of Guangdong province is a high incidence area of thalassemia.Premarital examination,genetic counseling should be strengthened,and reduce the birth rate of the thalassemia children to improve the quality of the population.

Key words:thalassemia；genotypes；epidemiological investigation

(收稿日期：2015-12-22)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.031

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)09-1230-02

作者简介：邵锦欢，女，主管技师，主要从事分子诊断工作研究。