胆囊切除术后兔血清CCK8 的变化及意义

刘振华 王宁 张帅民 徐贤刚 黎涛 石承先△

(1.贵州省人民医院肝胆外科，贵州 贵阳 550002；2.贵州省骨科医院，贵州 贵阳 550002)



胆囊切除术后兔血清CCK8 的变化及意义

刘振华1王宁2张帅民1徐贤刚1黎涛1石承先1△

(1.贵州省人民医院肝胆外科，贵州 贵阳 550002；2.贵州省骨科医院，贵州 贵阳 550002)

胆囊切除术； CCK8； oddi括约肌； 兔

Oddi括约肌(SO)生理运动在维持正常胆道动力学中起着重要作用 ,其主要受神经、体液因素调节。CCK作为胃肠肽类激素之一对SO的调节具有重要作用[1]。在CCK家族中，缩胆囊素八肽(CCK8)生理作用最大。CCK可直接作用SO内的缩胆囊素A受体(CCKAR)发挥作用。胆囊切除术后综合症(PCS)概念的提出使得SO的病理生理受到高度重视，部分病因为SO功能障碍(SOD)[2]，本实验通过观察胆囊切除术后兔血清CCK8浓度的变化，探讨CCK8与SO生理活动的关系。

1 材料与方法

1.1 实验材料与仪器 日本大耳白兔20只(购于贵州医科大学动物实验中心)，兔CCK-8 ELISA试剂盒(武汉华美生物技术有限公司)，LGR10-4.2 离心机(北京医用离心机厂)，PZF-6021型干燥箱(中国上海)，BCD-00A型冰箱(青岛海信)，ELx800UV型酶标仪(Bio-Tek公司)

1.2 各组动物处理 20只日本大耳白兔，雌雄不限，体质量(2.5±0.5) kg,经适应性饲养1周后随机分成A、B两组，每组10只。A组为对照组；B组为胆囊切除组。术前禁食12 h，禁水4 h，称重后以25%乌拉坦经耳缘静脉注射麻醉(2.5 mL/kg)。将兔固定于实验台上，剪去腹部体毛，常规消毒术野、铺敷。取上腹正中切口5 cm，逐层止血，经腹白线进入腹腔，甲状腺拉钩牵拉腹壁，以生理盐水纱布推开胃十二指肠，暴露兔肝门部，在右上腹部肝脏中找到胆囊。A组行单纯触摸胆囊后分两层关腹；B组，开腹在胆囊三角中分清结构后，胆囊管与胆囊动脉一并结扎，顺逆结合切除胆囊。术后饲养1个月，取下腔静脉血留置标本。

1.3 兔缩胆囊素八肽的测定 推开十二指肠，10 mL注射器取下腔静脉血5 mL，在生化速凝管冷凝约30 min，3 000 r/min离心机离心5 min，取上层血清2 mL，贮于-80 ℃冰箱保存待测CCK-8浓度。取完标本后经耳缘静脉注射40 mL空气处死兔。严格按照兔CCK-8 Elisa试剂盒说明书操作，用酶标仪在 450 nm 波长测量各孔的光密度(OD值)。

2 结 果

两组兔血清中CCK8浓度的比较，A组血清CCK-8浓度为(195.69±23.07) pg/mL，B组兔血清CCK8浓度为(117.72±26.55) pg/mL，B组较A组显著降低(P<0.01)。

3 讨 论

胆囊、胆总管和SO三者是统一、协调的结构，在消化系统中起着重要作用。胆胰肠结合部是人体解剖结构和生理调控最为复杂的区域之一，SO是位于胆管、胰管和十二指肠结合部位的神经肌肉复合体，是胆汁和胰液的最终流出道，胆囊平滑肌的收缩和SO开放是一组协同的过程, 也是排出胆囊内容物以及排空胆囊的生理基础。这一运动除了受丰富的内脏运动神经来支配外，还受胆囊收缩素和促胰液素等体液因素调节。

CCK最早由Ivy和 Oldberg 首先在小肠黏膜抽提液中发现,并因其有促进胆囊收缩的功能而得名[3]。根据肽段的长度不同，目前发现的CCK有CCK83,CCK58,CCK39,CCK22,CCK8,CCK1等[4]，其中CCK8的生理效应最大。生理条件下 ,由十二指肠黏膜分泌的CCK使胆囊收缩时也伴有SO舒张,而胆囊舒张时则SO呈收缩状态。有研究[5]显示餐后生理剂量CCK通过非肾上腺素能—非胆碱能抑制性神经元介导抑制SO的周期性收缩和降低SO基础压 ,促使胆囊排空；此外,刺激迷走神经使胆囊收缩而SO松弛。相反,切断迷走神经后胆囊扩张而SO收缩。这种胆囊与SO活动在功能上的协调关系受神经和体液的双重调节。Q.Zheng等[6]对家兔进行胆囊空肠吻合后SO紧张性收缩加强,而自发性收缩减弱,其原因为手术后SO对激素作用的敏感性下降了，提示在SOD的病人行胆囊空肠吻合可能起不了治疗作用。但胆囊切除术后，胆囊与oddi括约肌的这种协调关系是否受影响并不清楚。G.T.Krishnamurthy等[7]研究发现 ,括约肌痉挛病人在使用CCK8后胆囊收缩，胆汁返流入肝内外胆管，而停止注射时胆汁返流人胆囊。然而在临床上可见到，在胆囊切除术后，在除外胆管结石及上腹其他疾病后，仍有近10%的患者发生类似胆绞痛的症状，一般称为PCS，其原因并不十分清楚。本实验显示，胆囊切除术后CCK8的浓度明显下降。这种下降是否会使Oddi括约肌紧张度增加，松弛不够，是否就是胆囊切除术后暴饮暴食后胆汁排出受限而诱发胆绞痛的原因，有待进一步研究。

[1] 徐华, 吴叔明. Oddi氏括约肌的运动功能及影响因素[J]. 国外医学：消化系疾病分册,2003,23(4):239-242.

[2] Toouli J. The sphincter of Oddi and acute pancreatitis-revisited[J]. HPB (Oxford),2003,5(3):142-145.

[3] Tusher V G, Tibshirani R, Chu G. Significance analysis of microarrays applied to the ionizing radiation response.[J]. Proc Natl Acad Sci USA,2001,98(9):5116-5121.

[4] 陈大庆, 倪宏. 缩胆囊素生物学作用的多样性[J]. 国外医学：儿科学分册,2002,29(3):164-166.

[5] Dong M, Sonoda Y, Kawamoto M, et al. Duodenum is important for the sphincter of Oddi motor response to cholecystokinin octapeptide in conscious dogs[J]. J Gastroenterol,2005,40(4):389-395.

[6] Zheng Q, Chen Y. The Effects of Cholecystojejunostomy and Biliary Drainage on Biliary Motor[J].Huazhong UnivSci Technolog Med Sci，2002,22:144-147.

[7] Kurishnamurthy GT.Kurishnamurthy S，Waston RD.Characterization of basal hepatic bile flow and the effects of intravenous cholecystokinm on the live.sphincter.and gallbladder in patients with sphincter of Oddi spasm[J].Eur J Nucl Med Mol Imaging，2004，31：85-93.

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