龙血树组织培养和快速繁殖

胡如芳 曾建国 吴雪松 周青 贺珑 周琴 郭逸榴

（吉安市林业科学研究所 江西吉安 341000）

龙血树组织培养和快速繁殖

胡如芳 曾建国 吴雪松 周青 贺珑 周琴 郭逸榴

（吉安市林业科学研究所 江西吉安 341000）

本文通过科学的实验和严谨的分析来研究剑叶龙血树组织培养和快速繁殖。

龙血树；组织培养

龙血树（拉丁学名：Dracaena），为百合科、龙血树属植物。亚灌木、灌木或乔木。叶长剑形，有短叶柄，叶面常具各种斑点和条纹，叶密生顶枝，约40种，分布于亚洲和非洲的热带与亚热带地区。我国有5种，产南部，属国家二级濒危保护植物。性喜高温多湿、阳光充足的环境，但对光照的适应范围较广，十分耐荫。生长温度为15～30℃，一般安全的越冬温度要在5℃左右，对土壤要求不严。龙血树具有重要的观赏价值，株形整齐，茎干挺拔，叶形叶色多姿多彩，中、小盆花可点缀书房、客厅和卧室，为现代室内装饰的优良，名贵观叶植物。

1 材料和方法

1.1 外植体

在取龙血树的外植体之前，先对龙血树的整棵植株进行消毒处理，方法是用1g/L的70％甲基托布津可湿性粉剂水溶液进行喷洒，每隔3d喷一次，看到植株及盆土淋湿为止，连续喷洒3次。选取接种材料为优良的腋芽或顶芽和茎段作为外植体。

1.2 外植体的消毒

外植体采集前控制水分、淋杀菌剂的预处理方法可降低材料的污染率，提高诱导的成功率。把取来的外植体在自来水上冲洗干净后，在加有少量洗洁精的水中浸泡5min，自来水冲洗20min，再用75％的乙醇浸泡30s，随后用无菌水冲洗3～4次，再放在饱和漂白粉水中消毒10min，无菌水冲洗4～5次；最后在0.1％升汞中消毒4min，用无菌水冲洗5次。在无菌条件下，借助手术刀，将消过毒的材料（用无菌滤纸吸干水分），切成0.5cm大小备用。

1.3 试验方法

1.3.1 M S培养基的配方与配制方法

在 实 验 过 程 中 ， 大 量 元 素 ：KNO3、NH4NO3、MgSO47H2O、KH2PO4、CaCl22H2O，大量元素按照扩大20倍来配制母液。微量元素：MnSO44H2O、ZnSO47H2O、H3BO3、KI、Na2MoO42H2O、CuSO45H2O、CoCl26H2O，微量元素母液扩大100倍。铁盐：Na2-EDTA、FeSO47H2O；有机物质：肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素（VB1）、盐酸吡哆醇（VB6），铁盐和有机物质也是按照扩大100倍来配制母液。

1.3.2 植物生长调节剂的配制

6-BA（母液）：浓度为1mg/mL（溶于少量1mol/L盐酸后以蒸馏水定容）；NAA（母液）：浓度为1mg/mL（先用少量95％乙醇溶解后以蒸馏水定容）。

2 实验结果和分析讨论

2.1 初代培养

把消过毒后的材料接种于诱导培养基上，外植体培养15d后，外植体边缘开始萌动出现愈伤组织，长势快；初代培养30d后愈伤组织为颗粒状，继续培养，颗粒状的组织最终形成丛生的小芽。将丛生的小芽和嫩绿色的愈伤组织转接到诱导培养基。培养基的配方为：MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.5mg/L的培养基。

2.2 增值、继代培养基筛选结果

经实验结果得出结论，培养基中添加不同浓度的6-BA对芽的增殖影响很大，同时还影响芽的分化、增殖、伸长和生长。随着浓度升高增殖倍数也在增加，芽的长度则表现为随浓度升高而降低。当6-BA增加的浓度达到一定值，如达到2.5mg/L时，芽的生长开始表现不正常，部分出现玻璃化现象。在接种芽数一定的情况下，随着6-BA浓度的增加，增殖芽树在不断的增加，增殖的倍数也在增加，但是平均的芽长在逐渐的减少。

2.3 根诱导培养基筛选结果

以1/2MS培养基为基本培养基，分别加入NAA 0.5mg/L、IBA 0～1.0mg/L的植物生长调节剂，将增殖获得的丛生芽剪切成约2cm的茎段，接种于6种不同生根培养基上，每种培养基各接种20瓶，每瓶接种10株。接种约4周开始生根，30d后统计芽苗出根情况。以上培养基都添加蔗糖30.0g/L，琼脂0.8％，活性炭0.1％，pH5.5。

3 结论

通过用龙血树的顶芽或腋芽、茎段作外植体，建立了龙血树的组织培养和再生体系。结果表明：龙血树腋芽、顶芽或茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L，诱导率达95％。选择MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+30g/L的蔗糖+8g/L琼脂培养基有利于壮芽；选择MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L+30g/L的蔗糖+8g/L琼脂培养基有利于芽增殖继代；培养45d左右，每个外植体分化形成的再生小植株数达8～20个；在1/2MS+IBA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭0.1％的培养基中诱导生根效果最好。

[1]靳静晨，卜 媚，罗雪枫，陈雄进，谭家壮.A tissue culture technique for rapid propagation of Dracaenacambodiana Pierre ex Gagnep.广西农业科学，2010，41（8）：755～757.

[2]何旭君，刘善辉，冯远来，林晓萍，张华通.海南龙血树组织培养快速繁殖技术研究.广东林业科技，2006，22（1）：22～25.

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2016-11-13