孕妇七项血液指标诊断东南亚型α-地中海贫血的价值

谭冬梅，许芳梅，叶志权，吴普昭，邬瑞霞

(广州市番禺区中心医院检验科1、妇产科2，广东 广州 511400)

孕妇七项血液指标诊断东南亚型α-地中海贫血的价值

谭冬梅1，许芳梅1，叶志权1，吴普昭1，邬瑞霞2

(广州市番禺区中心医院检验科1、妇产科2，广东 广州 511400)

目的 评价测定血红蛋白A2(HbA2)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞计数与血红蛋白比值(RBC/Hb)、红细胞计数平均红细胞体积比值(RBC/MCV)七项指标诊断东南亚型α-地中海贫血孕妇的价值。方法回顾性分析2010年6月23日至2014年11月10日期间于广州市番禺区中心医院进行α-地中海贫血基因检测且年龄段在18至30岁的女性资料共172例，所有受检者根据检测结果分为健康孕妇组(n=47)、--SEA/αα孕妇组(n=55)、--SEA/αα非孕妇组(n=34)及其他贫血孕妇组(n=36)四组，各组均数间的比较采用独立样本的t检验，并采用ROC曲线对七项指标的准确性进行评价。结果(1)--SEA/αα孕妇组与健康孕妇组的七项指标比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；(2)MCV、RBC/Hb两项指标在--SEA/αα孕妇组与--SEA/αα非孕妇组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)；(3)--SEA/αα孕妇组RBC、Hb、MCV、RBC/Hb、RBC/MCV五项指标与其他贫血孕妇组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)；(4)HbA2、RBC、MCV、Hb、RDW-CV、RBC/Hb、RBC/MCV七项指标的曲线下面积(AUC)分别为0.795、0.880、1.000、0.910、0.925、1.000、0.991；灵敏度分别为0.579、0.855、1.000、0.872、0.982、1.000、0.945；特异度分别为0.852、0.745、1.000、0.800、0.892、1.000、0.957；阳性预测值分别为0.741、0.796、1.000、0.880、0.915、1.000、0.981；阴性预测值分别为0.733、0.813、1.000、0.788、0.916、0.959、0.938。结论根据不同群体选择不同血液指标可有效筛查出妊娠合并--SEA/αα患者，但HbA2在孕妇这个群体中的诊断价值不高，不能进行有效诊断，应避免单独检测。

东南亚型；α-地中海贫血；血红蛋白；红细胞；平均红细胞体积；红细胞分布宽度变异系数

α-地中海贫血是由于珠蛋白基因缺失或突变导致的α珠蛋白链减少或缺如所致的一种遗传性溶血性贫血。东南亚型α-地中海贫血(以下简称“--SEA/αα”)是其中一种缺失2个α基因的轻型α-地贫，是最常见的一种轻型α-地贫[1]。夫妇双方均为--SEA/αα基因携带者时可能出现由于基因缺失而导致的妊娠晚期死胎或新生儿死亡，因此孕妇--SEA/αα筛查的产前筛查显得尤为重要[2]。对孕期夫妇的尽早明确生育地贫患儿的风险，是对地贫防控的最有效手段。本文通过回顾性分析--SEA/αα孕妇血红蛋白A2(HbA2)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞计数与血红蛋白比值(RBC/Hb)、红细胞计数平均红细胞体积比值(RBC/MCV)，评价该七项血液指标在筛查孕妇--SEA/αα贫血方面的价值，为临床提供依据，提高孕妇中--SEA/α α贫血筛查的诊断准确率。

1 资料与方法

1.1 一般资料 在番禺区中心医院进行α--地中海贫血基因筛查且年龄段在18～30岁共172例女性的检测数据，根据检测结果分为以下四组：(1)--SEA/αα孕妇55例，排除合并缺铁性贫血；(2)健康孕妇47例，无贫血，无缺铁，无地贫；(3)--SEA/αα非孕妇34例；(4)其他贫血孕妇36例，即血常规示贫血，地贫基因检测未见异常的孕妇。收集各组HbA2、RBC、Hb等七项血液指标数据。

1.2 主要仪器与试剂 Genen Amp System 9600 PCR基因扩增仪、DYY-6C电泳仪、GELDOCXR+凝胶成像分析系统、深圳亚能生物技术有限公司提供的全血DNA快速提取试剂盒、α-地中海贫血基因检测试剂盒、Capillarys sebia2血红蛋白电泳仪，XS-5000血细胞分析仪。

1.3 α-地中海贫血基因检测方法 抽取静脉血3 ml加入含有抗凝剂的紫色血常规管中，用深圳亚能生物技术有限公司提供的全血DNA快速提取试剂盒提取人基因组DNA。应用跨越断裂点PCR(GAP-PCR)的技术原理进行检测，即在待检的缺失基因片段引物进行扩增，再通过琼脂糖凝胶电泳，根据电泳片段大小判断检测样品的基因型。

1.4 血红蛋白分析 运用毛细管血红蛋白电泳的原理于法国sebia公司生产的Capillarys sebia2全自动血红蛋白电泳仪上检测，检测样品中HbA2的含量。

1.5 血细胞分析 采用日本SYSMEX-XE-5000血细胞分析仪检测样品中RBC、Hb、MCV、RDW-CV、RBC/Hb比值、RBC/MCV比值等指标。

1.6 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件进行数据分析，计量资料以均值±标准差(±s)表示，各组均数间的比较采用独立样本t检验，以P＜0.05为检验水准。以基因诊断结果为金标准，通过受试者工作曲线(ROC)评价七项指标对孕妇东南亚型α-地中海贫血筛查的价值。

2 结 果

2.1 各组血细胞分析结果 --SEA/αα孕妇组与健康孕妇组相比，七项指标差异均有统计学意义(P＜0.05)，--SEA/αα孕妇组与--SEA/αα非孕妇组相比，MCV、RBC/Hb两项指标差异有统计学意义(P＜0.05)，而--SEA/ αα孕妇组与其他贫血孕妇组相比，RBC、Hb、MCV、RBC/Hb、RBC/MCV五项指标差异具有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

2.2 ROC曲线 对--SEA/αα孕妇组和健康孕妇组测定结果进行分析，以敏感性为纵坐标，以(1-特异性)为横坐标，作图绘成ROC曲线。各指标的ROC曲线如图1、图2所示。

2.3 各项指标诊断--SEA/αα的性能评价 根据图1、图2，我们将ROC曲线所得的各项评价指标结果绘制成表格，见表2。曲线下面积RBC/Hb=MCV＞RBC/ MCV＞RDW-CV＞RBC＞HbA2；灵敏度：RBC/Hb=MCV＞RDW-CV＞RBC/MCV＞Hb＞RBC＞HbA2；特异度：RBC/ Hb=MCV＞RBC/MCV＞RDW-CV＞Hb＞HbA2＞RBC：阳性预测值：RBC/Hb=MCV＞RBC/MCV＞RDW-CV＞Hb＞RBC＞HbA2；阴性预测值：MCV＞RBC/Hb＞RBC/MCV＞RDW-CV＞RBC＞Hb＞HbA2。

表1 各组血细胞分析结果(±s)

表1 各组血细胞分析结果(±s)

注：a表示--SEA/αα孕妇组与健康孕妇组相比较，P＜0.05；b表示--SEA/αα孕妇组与--SEA/αα非孕妇组相比较，P＜0.05；c表示--SEA/αα孕妇组与其他贫血孕妇组相比较，P＜0.05。

组别--SEA/αα孕妇组(n=55)健康孕妇组(n=47) --SEA/αα非孕妇组(n=34)其他贫血孕妇组(n=36) HbA2(%) 2.44±0.21a2.80±0.34 2.40±0.31 2.52±0.33 RBC(1012/L) 4.95±0.50ac4.21±0.38 5.17±0.72 4.07±0.47 Hb(g/L) 108.38±10.35ac126.91±9.67 109.47±16.61 99.36±11.05 MCV(fl) 69.11±3.23abc90.89±5.08 67.24±4.51 78.99±8.46 RDW-CV(%) 15.49±1.33a12.92±1.42 15.97±2.74 16.24±2.84 RBC/Hb(1012/g) 0.045±0.0016abc0.033±0.0021 0.047±0.0032 0.041±0.0055 RBC/MCV(10-3/L2) 0.082±0.005 0.047±0.0061 0.077±0.013 0.052±0.0017

图1 HbA2、MCV、Hb的ROC曲线

图2 RBC、RDW-CV、RBC/Hb、RBC/MCV的ROC曲线

表2 各项指标诊断--SEA/αα的性能评价

3 讨 论

--SEA/αα地中海贫血HbA2值多处于正常范围的低值，一些在妊娠中常发生贫血的如缺铁性贫血，HbA2值同样处于正常范围的低值，因此临床上难以用HbA2值对两者进行鉴别。本文结果显示：--SEA/αα孕妇组的HbA2低于健康孕妇组，在与--SEA/αα非孕妇组及其他贫血孕妇组比较差异无统计学意义。另外根据以上统计结果，可知HbA2的曲线下面积为0.795，相比其余六项指标，其灵敏度、阳性预测值、阴性预测值等均不高，证明其对于孕妇--SEA/αα的诊断价值相对其余六个指标是最低的。有资料显示，HbA2值对静止型或标准型α-地中海贫血患者的检出率低，阳性率仅为35%[7]，这与本文统计结果相符。若按传统的地中海贫血筛查只作血红蛋白电泳HbA2值检测，则极易漏诊。因此，在筛查地中海贫血时，不能单靠HbA2值检测[3]，要结合其他指标，才能提高筛查准确率。

--SEA/αα孕妇组分别与健康孕妇组、其他贫血孕妇组相比，RBC、MCV、Hb三项指标差异最为明显，差异均有统计学意义，组间差距基本上不存在重叠。这是由于--SEA/αα地中海贫血病血红蛋白生成障碍，直接影响红细胞数量和质量，所以有关血红蛋白及红细胞检查指标改变较为明显。通过比较各指标的AUC、RBC、MCV、Hb三项指标的的诊断价值均比较高，综合比较，最好的是MCV(AUC=1.000)，其次是Hb (AUC=0.910)，再者是RBC(AUC=0.880)。因此，此三项指标可作为孕妇--SEA/αα型地中海贫血筛查的重要指标[5]。但在--SEA/αα孕妇组与--SEA/αα非孕组之间，上述三项指标中只有MCV差异有统计学意义。--SEA/αα孕妇比--SEA/αα非孕妇MCV增大。就是说--SEA/αα妇女怀孕后，MCV会增大，如果我们单采用MCV作为筛查标准，孕妇比非孕妇漏筛概率增大。故此，孕妇--SEA/αα地贫不能单靠HbA2值和MCV值，要结合其他指标，减少漏检[1]。--SEA/αα孕妇组的RBC、Hb两项指标均高于其他原因贫血孕妇组，差异具有统计学意义，说明其他原因引起的贫血较--SEA/αα地贫引起的贫血的程度大。--SEA/αα孕妇组的MCV值低于其他原因贫血孕妇组，差异具有统计学意义，说明--SEA/αα地贫的小细胞程度比其他原因引起的贫血大。这可能与其他原因引起的贫血组的种类较多有关。

RDW-CV是反映红细胞异质性的重要指标，表示红细胞形态改变的程度，与健康孕妇组相比，--SEA/αα孕妇组的RDW-CV较大，而在--SEA/αα孕妇组与--SEA/αα非孕组之间，--SEA/αα孕妇组与其他贫血孕妇组之间，此指标差异无统计学意义。这与其他文献结论不符，这可能与本文所统计的孕妇其他原因贫血的种类较多和本研究人群为孕妇有关。在ROC曲线图上其曲线下面积达0.925，并且灵敏度、特异度等均大于0.9，可作为--SEA/αα孕妇组与健康孕妇组鉴别的一个重要指标。

RBC/Hb是指单位血红蛋白含量的红细胞数，代表红细胞反应性增生的程度与细胞低色素程度的关系，而RBC/MCV是指单位平均红细胞体积的红细胞数，代表红细胞反应性增生的程度与小细胞程度的关系，将--SEA/αα孕妇组分别与健康孕妇组及其他贫血孕妇组相比，此两项指标均表现为增高，差异有统计学意义。说明在孕妇发生--SEA/αα地中海贫血时，红细胞反应性增生程度大于细胞色素下降程度以及细胞平均体积减少程度。而与--SEA/αα非孕组相比，--SEA/αα孕妇组的RBC/Hb则表现为降低，可能是由于妊娠期间胎儿生长发育、血容量增加，对营养的摄取不足，RBC及Hb相对降低，--SEA/αα孕妇RBC下降程度较Hb下降程高所致。由于这两项指标的AUC值均大于0.9，诊断准确性较高，因此可以作为--SEA/αα孕妇与--SEA/αα非孕妇之间优良的筛查指标。

综上所述，结果显示孕妇和非孕妇的血液学指标存在明显差异。通过--SEA/αα孕妇与健康孕妇、--SEA/αα非孕妇及其他原因贫血孕妇之间的比较，我们可以掌握不同群体间差异最显著的指标，重新为孕妇建立相关的血液学筛查指标的标准。这有益于提高孕妇东南亚型α-地中海贫血筛查鉴别能力，且具备方便、快捷、成本低廉的特点，符合初筛指标原则[6]。各实验室可自行建立本实验室的的鉴别指标参考值，可更大的提高筛查的准确性。

[1]喻晶,张恋.孕妇珠蛋白生成障碍性贫血的临床血液学筛查指标分析[J].现代检验医学杂志,2013,28(1):138-140.

[2]毛锦江.血细胞分析对妊娠合并地中海贫血筛查的价值[J].中国妇幼健康研究,2010,21(4):498-500.

[3]黄瑛,郭柳薇.东南亚缺失型地中海贫血的临床血液学分析[J].实用性妇产科杂志,2009,25(8):504-505.

[4]董孝平,魏炳华.血细胞分析对妊娠合并地中海贫血筛查的价值[J].临床和实验医学杂志,2011,10(8):617-618.

[5]蒋晴.妊娠合并轻型地中海贫血的筛查及妊娠结局分析[J].健康之路,2014,13(3):85.

[6]喻晶,郑金龙.采用ROC曲线分析东南亚缺失型珠蛋白合成障碍性贫血的血液学指标[J].现代检验医学杂志,2011,26(5):58-61.

[7]方红辉,谭曙明.101例α-地中海贫血基因携带者血常规参数测定及分析[J].山东医药,2009,49(23):102-103.

[8]汪国庆,周玉球.妊娠期MCV和MCH指标筛查珠蛋白生成障碍性贫血的价值[J].国际检验医学杂志,2011,32(8):859-863.

Value of seven blood indicators for the diagnosis of pregnancy with Southeast Asian type α-thalassemia.

TAN Dong-mei1,XU Fang-mei1,YE Zhi-quan1,WU Pu-zhao1,WU Rui-xia2.Department of Clinical Laboratory1, Department of Obstetrics and Gynecology2,Guangzhou Panyu Central Hospital,Guangzhou 511400,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo evaluate the clinical value of hemoglbbin A2(HbA2),red blood cell(RBC),hemoglbbin(Hb),mean corpuscular volume(MCV),red blood cell distribution width-coefficient of variation(RDW-CV), ratio of RBC to Hb,ratio of RBC to MCV in the screening of Southeast Asian type α-thalassemia during pregnancy.MethodsThe clinical data of 172 women(aged 18～30 years old)who received α-thalassemia gene detection in our hospital from June 23,2010 to November 10,2014 were retrospectively analyzed.According to test results,the subjects were divided into four groups:47 cases of healthy pregnant women(healthy pregnant group),55 cases of--SEA/αα pregnant women(--SEA/αα pregnant group),34 cases of--SEA/αα non-pregnant women(--SEA/αα non-pregnant group), and 36 cases of pregnant women with other types of anemia(anemia pregnant group).Each group were detected and analyzed by independent-samples t-test.ROC curves were used to evaluate the accuracy of the seven indicators.Results(1)--SEA/αα pregnant group and healthy pregnant group showed no statistically significant difference in the seven indicators(P＜0.05).(2)--SEA/αα pregnant group and--SEA/αα non-pregnant group showed statistically significant difference in MCV,RBC/Hb(P＜0.05).(3)--SEA/αα pregnant group and anemia pregnant group had statistically significant difference in RBC,Hb,MCV,RBC/Hb,RBC/MCV(P＜0.05).(4)The area under the curve(AUC)of HbA2,RBC,MCV, Hb,RDW-CV,RBC/Hb,RBC/MCV were 0.795,0.880,1.000,0.910,0.925,1.000,0.991.The sensitivity was 0.579, 0.855,1.000,0.872,0.982,1.000,0.945,and the specificity was 0.852,0.745,1.000,0.800,0.892,1.000,0.957,respectively.The positive predictive values were 0.741,0.796,1.000,0.880,0.915,1.000,0.981,and the negative predictive values were 0.733,0.813,1.000,0.788,0.916,0.959,0.938.ConclusionChoosing different blood parameters based on different groups can effectively screen out patients of pregnancy with--SEA/αα.The diagnostic value of HbA2in this group of pregnant women is not high,which can not diagnose effectively and should be avoided to be detected alone.

Southeast Asian type;α-thalassemia;Hemoglobin;Red blood cell;Mean corpuscular volume;Red idth-coefficient of variation

R556

A

1003—6350（2016）05—0760—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.05.025

2015-04-17)

谭冬梅。E-mail：tuutuu7868@163.com