2型糖尿病肾病患者血清生长分化因子-15的表达及其临床意义

2016-03-06许峥嵘卫志锋武艳丽胡丽梅张秋子

海南医学 2016年5期

许峥嵘，卫志锋，武艳丽，胡丽梅，张秋子

(1.河北北方学院附属第一医院内分泌科，河北张家口 075000；2.河北北方学院附属第一医院肾内科，河北张家口 075000；3.天津市第二医院内分泌科，天津 300010)

许峥嵘1，卫志锋2，武艳丽3，胡丽梅1，张秋子1

目的探讨2型糖尿病肾病患者血清生长分化因子-15(GDF-15)的表达情况及临床意义。方法选择2011年12月至2015年2月在我院内分泌科进行治疗的2型糖尿病患者520例，根据尿白蛋白的含量水平分为正常白蛋白尿组(n=192)和微量白蛋白尿组(n=185)以及大量白蛋白尿组(n=143)，应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测并比较每组患者的血清GDF-15水平。结果正常白蛋白尿组患者血清GDF-15为(704.5±82.5)pg/ml，微量白蛋白尿组患者为(864.0±85.4)pg/ml，大量白蛋白尿组患者为(1 773.9±113.5)pg/ml。正常白蛋白尿组和微量白蛋白尿组患者的血清GDF-15水平明显低于大量白蛋白尿组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)；微量白蛋白尿组的血清GDF-15水平明显高于正常白蛋白尿组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。多元线形回归分析显示，微量白蛋白(mAlb)与白蛋白(Alb)呈负相关，与GDF-15呈正相关（P＜0.05）。结论2型糖尿病肾病患者在临床的不同时刻血清GDF-15也会发生变化，患者血清GDF-15的高表达对病情的诊断和预后评价具有重要价值。

2型糖尿病肾病；生长分化因子-15；表达；临床意义

2型糖尿病肾病是2型糖尿病特异性微血管并发症，也是患者常见的慢性并发症之一[1]。根据相关数据统计[2]，约有20%的2型糖尿病患者会发生糖尿病肾病，且其患病人数逐年增多。以往对2型糖尿病肾病的肾损害情况一般使用尿微量白蛋白(mAlb)进行预测[3]。近年来，有关生长分化因子-15 (GDF-15)作为一种新型血管疾病标志物引起了学者们广泛关注。GDF15是转化生长因子-β超家族成员之一，目前已有研究发现，在缺氧、缺血、炎症以及心力衰竭时血清GDF-15表达水平升高，但对2型糖尿病肾病治疗中GDF-15表达情况报道较少[4]。为探讨2型糖尿病肾病患者血清GDF-15表达情况及其临床意义，笔者进行了相关研究，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2011年12月至2015年2月在我院内分泌科就诊的2型糖尿病患者520例，患者均符合1999年WHO制定的糖尿病诊断标准。将520例2型糖尿病患者根据尿白蛋白的含量水平分为正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组。正常白蛋白尿组192例，其中女性85例，男性107例，年龄32～73岁，平均(54.4±8.2)岁，mAlb＜30 mg/24 h；微量白蛋白尿组185例，其中女性80例，男性105例，年龄32～74岁，平均(53.8±6.3)岁，30 mg/24 h≤mAlb＜ 300 mg/24 h；大量白蛋白尿组143例，其中女性59例，男性84例，年龄33～72岁，平均(53.9±9.8)岁，mAlb≥300 mg/24 h。三组患者的年龄、计算体质指数(BMI)比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 收集数据测量各组患者身高、体重、收缩压、体重指数(BMI)。同时，记录患者的一般并发症情况。

1.2.2 收集标本各组患者空腹情况下实施抽静脉血3 ml，并根据试剂盒的要求将其放置于普通的干燥试管内，检测三组患者的血脂、糖化血红蛋白、空腹血浆葡萄糖以及肝肾功能等。同时还要留下血样，在静止后1 h左右进行血清分离，保存温度为-80℃，以方便进行血清肌酐(sCr)、白蛋白(Alb)、生长分化因子-15(GDF-15)水平肾小球滤过率(eGFR)测定。

1.2.3 检测方法采用双抗体夹心ELISA法检测血清GDF-15水平，选用武汉博士德生物工程有限公司的试剂盒，在使用过程中要遵照说明书实施，OD值的测定使用Multiskan Mk3，并对血脂、糖化血红蛋白、空腹血浆葡萄糖以及肝肾功能等进行检测。应用美国雅培公司全自动生化仪C8000测定sCr和Alb，选用四川迈克生物科技有限公司的试剂盒。并根据sCr自动计算eGFR。

1.3 观察指标观察三组患者GDF-15浓度变化情况，并分析肾损害程度与血清GDF-15水平的相关性。

1.4 评定方法 GDF-15评定标准为＜1 200 ng/L为正常，轻度升高为1 200～1 800 ng/L，明显升高为＞1 800 ng/L。

1.5 统计学方法应用SPSSl5.0统计软件进行数据分析，所有计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间均数比较采用t检验，若方差不齐采用t′检验。多组间比较采用方差分析，进一步两组比较采用LSD和SNK检验，相关性采用多元线性回归分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患者的临床资料比较大量白蛋白尿组、微量白蛋白尿组eGFR、Alb显著低于正常白蛋白尿组，血清GDF-15水平显著高于正常白蛋白尿组，差异具有统计学意义(P＜0.05)；微量白蛋白尿组eGFR、Alb显著低于正常白蛋白尿组，血清GDF-15水平显著高于正常白蛋白尿组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 三组患者的临床资料比较(±s)

注：与正常白蛋白尿组比较，aP＜0.05；与微量白蛋白尿组比较，bP＜0.05。

组别正常白蛋白尿组微量白蛋白尿组大量白蛋白尿组F值P值GDF-15(pg/ml) 704.5±82.5 864.0±85.4a1773.9±113.5ab12.975 0.008例数192 185 143 BMI(kg/m2) 23.9±3.2 25.1±3.3 24.6±3.3 2.097 0.462 sCr(µmol/L) 73±22 81±29a118±51ab12.634 0.000 eGFR(ml·min-1·1.73 m-2) 102.6±18.2 81.0±12.3a54.8±8.8ab14.453 0.000 Alb(g/L) 40.5±4.2 39.5±3.4a33.1±7.0ab6.367 0.045 HDL(mmol/L) 1.01±0.08 1.00±0.05 1.16±0.05ab3.932 0.048

2.2 mAlb为自变量的多元线性回归分析经过数据对比分析后发现，mAlb与Alb呈负相关，与GDF-15呈正相关(P＜0.05)。回归方程为mAlb= 4 138.53-120.07Alb+0.34 GDF-15，见表2。

表2 mAlb为自变量的多元线性回归分析

3 讨论

糖尿病肾病是2型糖尿病患者重要的微血管并发症之一，也是造成终末期肾病的首位原因[5]。目前研究认为，糖尿病肾病主要由于肾小球系膜细胞增生，毛细血管壁增厚所致，其中血管再生扮演着重要角色。GDF-15属于转化生长因子-β的一种，在生理情况下GDF-15在前列腺和胎盘中的表达较高，在其他组织器官中的表达较低[6]。而在缺氧、缺血、炎症以及肿瘤等病理情况下也可出现高表达，表达高是由于受到了保护因子(P53、AP1)的影响。同时，GDF-15作用于病变部位的TGF-β受体，起到抗炎等保护作用[7-8]。近年来有研究发现，GDF-15在肾脏病变时表达水平增加，其水平与肾小球功能存在一定的关系。而糖尿病肾病是2型糖尿病患者重要的微血管并发症之一，也可能引起GDF-15的变化[9]。

本研究应用ELISA法对于不同临床阶段糖尿病肾病患者进行检测，结果大量白蛋白尿组、微量白蛋白尿组eGFR、Alb显著低于正常白蛋白尿组，血清GDF-15水平显著高于正常白蛋白尿组，差异具有统计学意义；微量白蛋白尿组eGFR、Alb显著低于正常白蛋白尿组，血清GDF-15水平显著高于正常白蛋白尿组。表明在糖尿病肾病患者的早期和糖尿病肾病患者GDF-15水平异常升高。目前已有研究表明血糖升高可以引起GDF-15水平升高。由于高血糖具有细胞毒性可以导致血管内皮细胞损伤，激活Akt途径，而GDF-15与高血糖对细胞内皮损伤有共同的信号转导通路，因此在糖尿病肾病患者中可以发生GDF-15水平异常升高[10]。另一方面，糖尿病肾病患者发生血管内皮损伤可以引起肾脏血管内皮脂质沉积，引起GDF-15水平异常升高[11]。本研究还对GDF-15相关性进行了分析，结果显示mAlb与Alb呈负相关，与GDF-15呈正相关。提示通过对2型糖尿病患者血清GDF-15水平的检测可以对糖尿病肾病的诊断和评估有重要作用。以往对于2型糖尿病肾病的肾损害情况的预测，可以使用尿微量白蛋白(mAlb)进行预测，但由于部分2型糖尿病患者在mAlb升高之前已有GFR的下降，或者在患者进行药物治疗后mAlb明显改善，但患者器质性病变仍然存在，给糖尿病肾病的诊断和治疗带来了困难[12]。而GDF-15可以反映器官的炎症反应情况和血管病变情况，可以有效避免药物治疗带来的假阴性，同时GDF-15敏感性也较mAlb高，这对糖尿病肾病的诊断和评估有重要应用价值[13]。

综上所述，2型糖尿病肾病患者在临床的不同时刻血清GDF-15也会发生变化，患者血清GDF-15的高表达情况对病情的诊断、评价具有重要价值。

[1]Bootcov MR,Bauskin AR,Valenzuela SM,et al.Value of plasma growth differentiation factor-15 in diagnosis and evaluation of type 2 diabetic nephropathy[J].J South Med Univ,2014,34(3):387-390.

[2]韩俊霞,成兴波,熊佩华,等.2型糖尿病巨噬细胞抑制因子-1水平的改变及其临床意义[J].中国糖尿病杂志,2013,21(3):226-228.

[3]Maria L,Hans HP,Anders J,et al.Plasma growth differentiation factor-15 independently predicts All-Cause and cardiovascular mortality as well as deterioration of kidney function in type 1 diabetic patients with nephropathy[J].Diabetes Care,2010,33(7):1567-1572.

[4]Merel EH,Dick DZ,Magdalena M,et al.Growth-differentiation factor 15 predicts worsening of albuminuria in patients with type 2 diabetes[J].Diabetes Care,2012,35(11):2340-2346.

[5]Macisaac RJ,Jerums G.Diabetic kidney disease with and without albuminuria[J].Current Opinion in Nephrology&Hypertension,2011, 20(3):246-57.

[6]包国祥,傅利星.2型糖尿病肾病患者血清腺苷脱氨酶和尿微量清蛋白与肌酐比值的相关性研究[J].中国全科医学,2013,16(10): 3413-3414.

[7]朱征,杨敏,黄倩.糖尿病并发症患者血清腺苷脱氨酶测定的临床意义[J].现代检验医学杂志,2010,25(1):76-77.

[8]高阳,陈思娇,杨红艳,等.糖尿病肾病患者尿微量清蛋白与肌酐比值的相关因素研究[J].中国全科医学,2011,14(2C):598-600.

[9]热衣汉·西里甫,帕提古丽·阿斯讨拜,桑晓红.糖尿病肾病患者尿微量清蛋白相关因素研究[J].中国全科医学,2012,15(8C): 2755-2758.

[10]胡伟,胡孝彬,陈江,等.2型糖尿病肾病患者血清同型半胱氨酸、脂蛋白(α)和胱抑素C测定结果分析[J].海南医学,2014,25(20): 3009-3011.

[11]郑利平,李世葵,曾贝贝.2型糖尿病患者检测血清腺苷脱氨酶临床意义分析[J].国际检验医学杂志,2013,34(1):104-105.

[12]陈红霞,楼晓佳,周莉莉.2型糖尿病患者超敏C反应蛋白和尿微量蛋白检测的临床意义援[J].浙江医学,2010,32(2):183-184.

[13]张金蓉.糖尿病患者尿微量白蛋白、糖化血红蛋白及血脂联合检测的临床意义[J].实用临床医药杂志,2010,14(11):103.

Expression and clinical significance of growth differentiation factor-15 in serum of patients with type 2 diabetic nephropathy.

XU Zheng-rong1,WEI Zhi-feng2,WU Yan-li3,HU Li-mei1,ZHANG Qiu-zi1.1.Department of Endocrinology,the First Affiliated Hospital of Hebei North University,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA;2.Department of Nephrology,the First Affiliated Hospital of Hebei North University,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA;3.Department of Endocrinology,Tianjin Second Hospital,Tianjin 300010,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of growth differentiation factor-15(GDF-15)in the serum of patients with type 2 diabetic nephropathy.MethodsA total of 520 patients with type 2 diabetic nephropathy in Department of Endocrinology in our hospital from December 2011 to February 2015 were selected and divided into normal albuminuria group(n=192)and microalbuminuria group(n=185)and mass albuminuria group (n=143)according to the levels of albumin.Enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)was used to detect the levels of serum GDF-15,which were compared between the three groups.ResultsThe level of GDF-15 was(704.5±82.5)pg/ml in normal albuminuria group,(864.0±85.4)pg/ml in microalbuminuria group,and(1 773.9±113.5)pg/ml in mass albuminuria group.The level in normal albuminuria group and microalbuminuria group was significantly lower than that in mass albuminuria group(P＜0.05),and the level in microalbuminuria group was significantly higher than that in normal albuminuria group(P＜0.05).Multiple linear regression analysis showed that mAlb was negatively correlated with Alb and positively correlated with GDF-15(P＜0.05).ConclusionSerum GDF-15 may change at different clinical time points in the patients with type 2 diabetic nephropathy,and high expression of GDF-15 has great value in evaluating the diagnosis and prognosis.

Type 2 diabetic nephropathy;Growth differentiation factor-5;Expression;Clinical significance

R587.2

1003—6350（2016）05—0717—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.05.010

2015-04-9)

河北省张家口市科技攻关项目（编号：1321100D）

许峥嵘。E-mail：xuzhengrong3@126.com