江苏、安徽等地3株水禽大肠杆菌的药敏试验
2016-03-04秦淑美
秦淑美
中图分类号:S858.3 文献标识码:B 文章编号:1673-1085(2015)06-0033-02
摘要:水禽的各年龄段都易感大肠杆菌病,给水禽的养殖造成很大的损失。检测病死水禽分离到的大肠杆菌对自制的药敏试纸的敏感性,找出合理预防和控制大肠杆菌病的敏感药物。
关键词:水禽源大肠杆菌;药敏;诊治
水禽大肠杆菌病是水禽感染致病性大肠杆菌引起的一种急性或慢性的细菌性传染病。水禽感染大肠杆菌后,由于其年龄、抵抗力以及大肠杆菌的致病力、感染途径等不同因素,会产生许多症状和病变不同的病。如急性败血症、气囊炎、肝周炎、心包炎、卵黄性腹膜炎、输卵管炎、眼炎、关节炎、肉芽肿。大肠杆菌病的病原由某些血清型的大肠杆菌所致,雏鹅有O1、O2、O6等血清型,雏鸭有O78、O8、O7、O73、O19等血清型,产蛋鹅有O2K39、O2K1、O39等血清型。
笔者采取3株来自江苏、安徽等地的雏鹅、雏鸭的心血及纤维素性渗出物、母鹅的变性卵泡等作为被检病料分离到大肠杆菌,通过对自制的药敏试纸敏感性检测,找到科学防治水禽大肠杆菌的药物。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 病料 ①江苏姜堰10日龄鹅,肝肿大,有纤维素性渗出,腹腔中有未被吸收的卵黄;②安徽合田种鹅,患病死亡的母鹅卵黄性腹膜炎,凝固蛋白,输卵管里黄色纤维素性渗出物;③江苏扬州15日龄鸭,肝肿大,有包膜,易剥离,有不凝心血,关节红肿。
1.1.2 药敏试验培养基 营养琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯平板培养基。
1.1.3 自制药敏试纸 分别为1-林可霉素(15mg/片)、2-庆大霉素(2mg/片)、3-卡那霉素(12.5mg/片)、4-环丙沙星(2mg/片)、5-复方磺胺嘧啶(10mg/片)、6-强力霉素(5mg/片)、7-复方甲氧嘧啶(10mg/片)、8-链霉素(2000单位/片)、9-氟哌酸(1mg/片)、10-氟苯尼考(15mg/片)。
1.2 方法
1.2.1 细菌分离 1#:姜堰雏鹅:无菌取肝、纤维素性渗出物接种血琼脂平板和营养琼脂平板、麦康凯培养基,37℃有氧培养。
2#:安徽合田种鹅:无菌取变性卵泡接种血琼脂平板和普通琼脂平板、麦康凯平板培养基。37℃有氧培养。
3#:扬州雏鸭:无菌取肝、脑、关节,接种血琼脂平板,37℃,5%CO2厌氧培养和有氧培养24h后,厌氧培养和有氧培养都形成灰白色单个菌落,挑取单个菌落重新划线麦康凯培养基,24h形成红色菌落。
1.2.2 染色镜检 分离到的细菌挑取单个菌落进行革兰氏染色镜检。
1.2.3 细菌生化鉴定 根据细菌的培养特征、染色形态特征,挑取单个菌落接种大肠杆菌微量生化鉴定管,置37℃恒温箱培养24h,观察结果。能够分解葡萄糖和甘露醇,产酸;分解阿拉伯糖、木胶糖、鼠李糖、麦芽糖、乳糖;不分解侧金盏花醇和肌醇;能产生靛基质,不产生尿素酶和硫化氢。符合上述生化反应的,确定为大肠杆菌。
1.2.4 血清学鉴定 将被检菌株的培养物分成2份,一份经121℃高压蒸汽加温2h,破坏K抗原,一份加0.5%福尔马林摇匀后37℃放置24h。分别用各种单因子抗O血清和抗OK血清对处理后的两份菌液作凝集试验。如该菌株含有K抗原,则各种抗O血清不能使经福尔马林处理的菌液凝集,但可被各种抗OK血清中的一种凝集。经高压蒸汽加热的菌液可被一种单因子抗O血清所凝集。
1.2.5 药敏试验 将分离到的大肠杆菌进行药敏试验。挑取适量细菌培养物,以划线方式将细菌涂布到营养琼脂培养基上。将含有定量抗菌药物的试纸片贴在已接种了细菌的琼脂表面上,37℃,培养24h。抑菌圈的大小反映出细菌对药物的敏感程度。
2 结果
2.1 细菌分离 三组病料均分离到灰白色、湿润、光滑、不溶血、边缘整齐、麦康凯培养基呈红色菌落、镜检均为G-杆菌。
2.2 这3株细菌经鉴定均为大肠杆菌。
2.3 分离到的细菌血清型为O6、O39、O19。
2.4 药敏试验结果 见表1。
这3株来自不同日龄的鹅和鸭,有着不同的血清型的大肠杆菌,对药物的敏感性大不同,但它们同时对氨基苷类的庆大霉素、卡那霉素高敏感。1#姜堰雏鹅株还对链霉素高敏感,2#合田种鹅株还对氟苯尼考高敏感,3#扬州雏鸭还对环丙沙星和5-复方磺胺嘧啶高敏感。
3 治疗
根据药敏试验结果,给出如下治疗方案:
3.1 姜堰雏鹅,建议养殖户挑出有症状病鹅,隔离饲养,肌肉注射庆大霉素2mg/kg·w,每日2次,连用3d。
3.2 合田种鹅,挑出病重的母鹅淘汰。症状较轻的母鹅,隔离饲养,肌肉注射庆大霉素3mg/kg·w。每日2次,连用5d。检查公鹅的阴茎,有肿大、在不同部位有脓性或干酪样结节的,淘汰。
姜堰雏鹅和合田种鹅群中其它无症状的鹅,饲料中添加林可霉素,每只禽3.0mg/kg或饮水17mg/kg进行预防。
3.3 扬州雏鸭,症状明显的治疗同姜堰雏鹅。其它鸭饲料或饮水中添加环丙沙星,1g药粉加入5kg饲料,或1g药粉加入10kg水进行预防。
这三群鹅和鸭,经过治疗,3d后病情得到控制。禽群中不再出现死亡病例。7d后,鹅群及鸭群恢复原有的采食量,精神状况良好。
4 体会
大肠杆菌是动物肠道中的常在菌,10%~15%的大肠杆菌属于有致病力的血清型。水禽场卫生条件差、地面潮湿、舍内通风不良、氨气味大、饲养密度过高等易诱发本病。初生雏禽的感染是由于种蛋被传染,因此,应注意育雏期保温及饲养密度,改善通风,降低灰尘,勤于除粪,减少氨气的含量;禽舍、孵化器及用具经常清洁和消毒。
禽群中发现发病或死亡的禽只,应及时细菌分离,进行药敏试验,找出该菌较敏感的几种药,添加到饲料和饮水中,会取得较理想的效果。但是,有时也会出现药敏试验很敏感的药,而实际应用效果很差,这时就要更换敏感药,找到最有效的治疗药物。
由于养殖过程中不科学、盲目滥用抗菌药,致使疾病发生后,对治疗药物的选择就显得困难,特别是长时间饲养的场地,只能选择不常用的药物治疗,若药物不敏感有效,不仅造成了药物的浪费,而且还延误了病情,给养殖户造成很大的经济损失。因此,在养殖水禽的过程中,科学合理用敏感药物预防,对控制大肠杆菌病非常重要。endprint