AVE-763尿沉渣自动分析流水线与显微镜检查结果比较及复检规则的建立

刘天霞，王婷婷

(白银市第二人民医院检验科，甘肃白银 730900)



·临床研究·

AVE-763尿沉渣自动分析流水线与显微镜检查结果比较及复检规则的建立

刘天霞，王婷婷

(白银市第二人民医院检验科，甘肃白银 730900)

摘要:目的分析尿液干化学分析(简称干化学)和有形成分分析(简称尿流式) 及显微镜尿沉渣结果的差异，建立显微镜复检规则。方法以AVE-763尿有形成分分析仪及GEB600尿干化学分析仪构成检测流水线，对临床尿标本先用流水线进行红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、管型(CAST)及潜血(BLD)、中性粒细胞酯酶(LEU)、蛋白(PRO)检测，再用显微镜进行验证。结果GEB600和AVE-763两者检测均正常或同时异常的标本用显微镜复检，结果之间的差异无统计学意义(χ2=1.46，P=0.23)。AVE-763与GEB600两者检测结果不符合标本，经显微镜进行RBC、WBC、CAST检测,结果差异有统计学意义(χ2=16.75、15.29、79.18，P=0.001)。结论AVE-763与GEB600两者检测结果不符合时，不能以AVE-763代替显微镜尿沉渣检查，需参照相应的复检规则进行复检，保证检测结果准确性。

关键词:尿分析；自动分析；显微镜检查

常规尿液分析是临床工作中最常用的检查手段之一，对泌尿系统疾病的筛查和鉴别诊断具有重要的参考价值[1-2]。传统的尿液分析包括干化学检测和显微镜镜检中的有形成分分析两步[3]。近年来，随着自动化尿液检测技术的推广应用和持续进步，自动尿液常规分析流水线越来越多在检验科中使用，但由于尿液标本的复杂性和干化学分析仪存在方法学的局限性，干化学分析仪检测与形态学镜检结果存在差异。所以，对自动化尿常规分析发现异常的尿液标本，有待于进一步通过形态学镜检进行确认核对分析。本研究以显微镜检查为参考方法，对GEB600尿干化学分析仪检测的潜血(BLD)、中性粒细胞酯酶(LEU)、蛋白(PRO)结果和AVE-763尿有形成分分析仪检测的红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、管型(CAST)结果的可信度进行评估[4-5]，当二者检测结果不符时，则有必要以形态学镜检结果为诊断依据，进而区别假阳性或假阴性结果，达到提高检验结果准确度的目的。

1材料与方法

1.1标本来源收集本院门诊患者尿液标本870份，住院患者尿液标本990份，共计1 860份，其中来自男性927例，女性933例，年龄2～82岁，中位年龄46岁。

1.2仪器与试剂尿液流水线由GEB600尿干化学分析仪与AVE-763全自动尿有形成分分析仪组成，AVE-763分析仪使用原装配套试剂、质控品、校准品；GEB600尿干化学分析仪使用原装配套试纸条和配套质控品。显微镜采用日本Olympus光学工业株式会社生产的双目显微镜。

1.3检测方法

1.3.1自动化尿液常规分析尿液留取标准依据《临床检验操作规程(第3版)》[6]，每日随机抽取10～20份新鲜中段尿液标本，每份标本于留取2 h内分别用干化学分析仪GEB600(简称“GEB600”)及尿有形成分分析仪AVE-763(简称“AVE-763”)进行检测，尿液干化学分析仪分析指标包括BLD、LEU、PRO；尿有形成分分析指标包括RBC、WBC、CAST等，将原始检测结果备份存档。

1.3.2尿沉渣显微镜检查取混匀的尿液标本10 mL于一次性尿液专用塑料试管，以1 500 r/min离心5 min，弃去上清液，留取0.2 mL尿沉渣，轻摇离心管，使尿沉渣充分混匀，滴入专用尿沉渣计数板中，进行尿沉渣中RBC、WBC、CAST定量计数。

1.4判断标准镜检结果以《临床检验操作规程(第2版)》[7]中制定的“RBC>3/HP、WBC>5/HP、CAST>1/LP”作为阳性判断标准；尿液干化学分析的参考范围由厂家提供，以BLD、LEU和PRO达到阳性阈值及以上判断为阳性；AVE-763尿有形成分分析仪的参考范围为本实验自建范围，RBC、WBC和CAST超出参考范围上限、出现非透明管型者判断为阳性。

1.5统计学处理采用SPSS19.0统计软件进行数据处理及统计学分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1AVE-763尿有形成分分析仪中细胞和管型成分的参考范围建立(1)RBC：0～8.5/μL(男)，0～13.9/μL(女)；(2)WBC：0～11.5/μL(男)，0～12.7/μL(女)；(3)CAST：0～1.2/μL。阳性判断标准如下：(1)RBC：>8.5/μL(男)，>13.9/μL(女)；(2)WBC：>11.5/μL(男)，>12.7/μL(女)；(3)CAST：>1.2/μL，出现非透明管型。

2.2GEB600和AVE-763检测结果比较两者检测均正常的标本765份，GEB600和AVE-763检测匹配项目同时异常的标本633份，包括：(1) GEB600潜血阳性和AVE-763红细胞异常398份；(2) GEB600中性粒细胞酯酶阳性和AVE-763白细胞异常336份；(3) GEB600蛋白阳性和AVE-763 管型异常16份。同一份标本可同时有2～3个匹配项目阳性，经显微镜复检结果见表1。AVE-763与GEB600检测均正常和二者检测匹配项目同时异常的标本时，显微镜检查结果与仪器检测结果之间的差异无统计学意义(χ2=1.46，P=0.23)。

2.3AVE-763与显微镜镜检结果比较AVE-763与GEB600结果不符合标本，经显微镜进行RBC、WBC、CAST检测，见表2。AVE-763检测的RBC、WBC、CAST结果与GEB600检测的BLD、LEU、PRO结果不符的标本，与显微镜镜检的RBC、WBC及CAST检测结果的差异均有统计学意义(χ2=16.75、15.29、79.18，P=0.001)。

表1　　AVE-763与GEB600相符合标本的显微镜检查

表2　　AVE-763与GEB600结果不相符的标本显微镜检查

3讨论

自动尿液常规分析流水线近年来越来越多地在检验科中使用，它将尿液自动干化学分析和有形成分分析结合起来，使尿液常规检验更加迅速、准确。但尿干化学法存在方法学的局限，如仅能检测尿清蛋白和尿中性粒细胞，不能排除尿球蛋白、尿淋巴细胞、单核细胞及细菌对细胞的干扰等。当尿液中存在过多的结晶、上皮细胞、黏液丝、大量细菌、大量细胞时，会干扰尿液有形成分分析仪的检测结果。所以即使联合使用干化学和尿流式分析仪对尿液进行常规分析检测也不能完全替代有形成分的镜检[8-9]。对此需要制定相应的复检规则，对不需要镜检的标本直接发放报告，筛选出需要镜检的标本，以保证检验结果的正确性。

本研究结果显示，应用尿液流水线AVE-763检测的RBC、WBC、CAST与GEB600检测的BLD、LEU、PRO结果均正常或同时异常的标本时，显微镜检查结果与流水线AVE-763检测结果比较，差异无统计学意义(P>0.05)。47份AVE-763与GEB600检测匹配项目同时异常的标本，显微镜检查正常者有21份为干化学蛋白阳性和尿沉渣管型异常，显微镜检查发现有大量的上皮细胞、大量WBC聚集成团及一些黏液丝；1份为隐血阳性和红细胞异常，显微镜检查是由于存在草酸钙结晶、细菌、少量精子；另外12份为干化学和尿沉渣检测WBC异常，显微镜检查发现标本含有小圆上皮细胞、细菌、扁平上皮细胞和脂肪滴等，其中以小圆上皮细胞为主。36份AVE-763与GEB600检测均正常，而显微镜检查异常者有21份为孕妇标本，显微镜检查为略超出正常的WBC；3例痛风患者，显微镜检查发现略超出正常的RBC；12例为糖尿病患者，显微镜检查为略超出正常的WBC。因此，当2种仪器RBC与BLD检测结果一致时，不再需要进行显微镜复检，有利于尿标本检测的规范化与标准化[10-11]。

AVE-763与GEB600结果不符合标本，经显微镜进行RBC、WBC、CAST检测结果存在明显差异，研究显示:(1)RBC检测AVE-763为阳性，GEB600为阴性，显微镜检测阴性，多见于尿液中存在草酸钙结晶、真菌、细菌、非定型结晶等的干扰；AVE-763为阳性，GEB600为阴性，显微镜检测阳性，分析原因可能是由于尿液中还原性物质维生素C的浓度大于100 mg/L时，使干化学法检测潜血呈假阴性结果；AVE-763为阴性，GEB600为阳性，显微镜检测阴性，可能是因为干化学法通过对破损的红细胞和游离血红蛋白或肌红蛋白发生过氧化物酶反应所致。(2)WBC检测AVE-763为阳性，GEB600为阴性，显微镜检测阴性，可能尿中含有较多肾小管上皮细胞、某些结晶与黏液同时存在，导致尿沉渣分析仪误判，致使WBC出现假阳性[12]；AVE-763为阳性，GEB600为阴性，显微镜检测阳性，可能因为GEB600仅能检测中性粒细胞中的酯酶成分，而单核细胞和淋巴细胞不含有酯酶成分，而尿标本中的WBC又是以单核细胞和淋巴细胞为主，也可能是使用了庆大霉素，对干化学造成负干扰表现为假阴性；AVE-763为阴性，GEB600为阳性，显微镜检测阴性，可能是由于尿液在膀胱贮存时间过长或标本放置时间延长导致WBC破坏，酯酶释放到尿液中。(3)AVE-763检测CAST为阳性，GEB600检测PRO为阴性，可能是干化学法检测PRO的原理采用指示剂误差法，当尿液pH<3时，以及临床大量应用青霉素、呋喃类药物时，均可造成PRO的假阴性；也可能是因为GEB600仅能检测尿清蛋白，在慢性肾小球肾病进展过程中，常见成分升高的先后顺序为：尿黏蛋白、尿微球蛋白、尿管型、尿清蛋白，所以CAST阳性会比PRO阳性出现得更早一些。因此，当2种仪器CAST与PRO检测结果存在差异时，有必要用传统的显微镜方法复检。

综上所述，尿液流水线具有操作流程简便、快捷、图像真实、重复性好、可以降低劳动强度、资料易保存等优点，但干化学分析仪对尿液的物质是间接检测，方法缺乏特异性。尿有形成分分析仪检测RBC、WBC、CAST时，易受结晶、上皮细胞、黏液丝、大量细菌和细胞的干扰。所以，为了提高检测结果的准确性，只有尿有形成分分析仪、干化学分析仪及人工显微镜镜检有机结合，联合应用，才能减少假阴性及阳性的发生。笔者认为有以下几种情况的尿液标本必须进行显微镜检查：(1)干化学法检查的BLD、LEU异常，而尿沉渣检查RBC、WBC正常者；(2)干化学检查的BLD、LEU正常，而尿沉渣检查RBC、WBC异常者；(3)干化学检查的PRO阳性，而尿沉渣检查CAST阴性者；(4)干化学检查的PRO阴性，而尿沉渣检查CAST阳性者；(5)肾病科的患者及妊娠女性；(6)尿沉渣结果显示有大量结晶或小圆上皮细胞出现时；(7)本次结果与最近一次结果有明显差异者。

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(收稿日期：2015-11-08)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.054

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)03-0406-03