基质金属蛋白酶-2、CD147在腮腺多形性腺瘤中的表达研究

唐瑞平，伍爱民，郑本强，李 敬，邓 凌，何 红（荆楚理工学院医学院，湖北省荆门市第二人民医院：口腔医院，口腔科，湖北荆门448000）

基质金属蛋白酶-2、CD147在腮腺多形性腺瘤中的表达研究

唐瑞平1，伍爱民1，郑本强2，李 敬3，邓 凌1，何 红1（1荆楚理工学院医学院，湖北省荆门市第二人民医院：2口腔医院，3口腔科，湖北荆门448000）

目的：探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）以及CD147在腮腺多形性腺瘤患者中的临床表达效果，为腮腺多形性腺瘤的预测、发生及转归提供意义参考.方法：选取1998－01/2011－01于湖北省荆门市第二人民医院确诊并接受治疗的多形性腺瘤初发瘤患者30例，多形性腺瘤复发瘤患者30例作为观察组，另外选取30例健康人的正常腮腺组织作为对照组.治疗前对两组患者的MMP-2以及CD147进行检测，比较两组患者的阳性率；观察组患者进行一定的治疗干预，对两组患者的MMP-2以及CD147含量进行再次检测，并比较两组患者的阳性率.结果：治疗前，MMP-2和CD147在初发瘤和复发瘤患者体内的阳性表达率明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，MMP-2和CD147在初发瘤和复发瘤患者体内的阳性表达率和对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：MMP-2和CD147与腮腺多形性腺瘤的发病有着直接关系，在临床诊断时，其可作为有意义的肿瘤标志物，为预测该病的发生及转归提供有效的临床参考.

基质金属蛋白酶-2；CD147；腮腺多形性腺瘤

0 引言

多形性腺瘤（pleomorphic adenoma）又称混合瘤（mixed tumor），是最常见的涎腺肿瘤，约占所有涎腺肿瘤的60%，约80%发生在腮腺，10%在下颌下腺.它是胞膜情况不定的、以镜下结构的多形性而不是细胞的多形性为特征的肿瘤，最常见的是上皮和变异肌上皮成分与粘液样或软骨样成分的混合.目前尚不明确，但任何单一因素都不能成为其绝对致病原因，可能是多种内在及外在因素相互作用下导致细胞基因突变的结果.该病任何年龄均可发生，以30～50岁多见，女性较男性多见［1－2］.通常表现为缓慢生长的椭圆形或圆形肿块，常无自觉症状，病史较长.肿瘤界限清楚，质地中等，多数直径在2～125 px；小的肿瘤通常形成光滑、可活动的实性肿块；较大者则倾向于隆起并影响表面皮肤或粘膜，扪诊呈结节状，高起处常较软，可有囊性变，低凹处较硬，多为实质性组织；多次复发者可形成固定的肿块.临床上以手术治疗为常见方式，近年来虽在手术方法上作了改进，由沿肿瘤包膜作单纯的剜除术到在正常腺体组织内的区段性切除，但仍有8%～13%的复发率.因此，在临床中寻找多形性腺瘤的标志物对疾病的治疗、预防以及转归都有重要意义［3］.目前，越来越多的研究表明，基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、CD147经其他学者在其它生物学领域研究表明可能与肿瘤复发相关.为了探讨二者与多形性腺肿瘤之间的关系，提高临床对该疾病的预防和治疗能力，湖北省荆门市第二人民医院于1998－01/2011－01尝试对MMP-2、CD147与肿瘤之间的关系进行探讨，取得理想效果，现报道如下.

1 资料和方法

1.1 一般资料选取1998－01/2011－01于湖北省荆门市第二人民医院进行确诊并接受治疗的多形性腺瘤初发瘤患者30例，多形性腺瘤复发瘤患者30例作为观察组，此外，根据相应条件，选取30例健康人的正常腮腺组织作为对照组，其中在初发组，男13例，女17例，年龄28～70（平均46.51±3.74）岁；在复发组，男14例，女16例，年龄31～69（平均47.82±4.01）岁；而在健康人的对照组，男12例，女18例，年龄30～68（45.33±3.98）岁.所有患者在年龄、性别等一般性资料方面比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性.

1.2 方法

1.2.1 标本处理 标本均经10%甲醛固定，石蜡包埋，制成3 μm厚切片，进行HE及免疫组化染色.

1.2.2 免疫组化 采用SP染色法，抗体为羊抗人MMP-2多克隆抗体，羊抗人CD147多克隆抗体，SP试剂盒和DAB显色试剂盒.常规免疫组化染色，DAB显色.以PBS代替一抗做阴性对照，用已知CD147、MMP-2阳性的肺癌组织切片做阳性对照.

1.2.3 手术治疗 多形性腺瘤的治疗方法为手术切除，应在肿瘤包膜外正常组织内切除.位于腮腺浅叶的肿瘤应行肿瘤及腮腺浅叶切除、面神经解剖术；位于腮腺深叶的肿瘤需同时摘除深叶.在可能的情况下，术中保留腮腺咬肌筋膜、腮腺主导管及耳大神经，可减少手术并发症.

1.3 观察指标采用德国莱卡病理图像分析仪（DMR＋Q550型）进行免疫组化结果分析，全部切片均由2位不了解临床资料的高年资病理医师在光镜下评价.在200倍视野中阳性瘤细胞占全部瘤细胞比例的平均值为阳性率，CD147以细胞膜及胞质内出现棕黄色颗粒为阳性结果，MMP-2以细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性结果.当结果＞10%时，即可记为阳性（＋），结果判定根据阳性染色深浅程度和阳性细胞百分比综合判断评分［4］.

1.4 统计学处理采用SPSS13.0统计学软件对数据进行分析，计数资料用%表示，行χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义.

2 结果

2.1 治疗前各组患者CD147、MMP-2阳性率比较治疗前，CD147、MMP-2在初发组和复发组患者体内的阳性表达率明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05，表1）.

表1 治疗前各组患者CD147、MMP-2阳性率比较（n＝30）

2.2 治疗后各组患者CD147、MMP-2阳性率比较治疗后，CD147、MMP-2在初发组和复发组患者体内的阳性表达率与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05，表2）

表2 治疗后各组患者CD147、MMP-2阳性率比较（n＝30）

3 讨论

多形性腺瘤是腮腺最常见的肿瘤，占腮腺肿瘤的60%～70%，属于交界性肿瘤，具有一定的侵袭性生长特性，即使在手术完全成功的情况下仍然存在13%的复发率［5－6］.多次复发的多形性腺瘤具有恶变倾向，发生于小唾液腺的多形性腺瘤恶性程度较高.近年来虽在手术方法上作了改进，由沿肿瘤包膜作单纯的剜除术到在正常腺体组织内的区段性切除，但仍有8%～13%的复发率.有研究［7－8］表明，复发瘤细胞具有较高的增殖活性.因此，如何对多形性腺瘤进行有效的预防和治疗是提高肿瘤患者治愈率的关键［9－10］.本研究从MMP-2、CD147在正常腮腺、腮腺初发多形性腺瘤、复发多形性腺瘤中的阳性表达，判断MMP-2、CD147在腮腺多形性腺瘤种植复发中的协同作用，从而为临床判定肿瘤术后复发提供重要依据，从初步的实验结果来看，取得了理想的效果［5－7］.本研究显示，MMP-2在初发组有14例呈现阳性表达，在复发组有16例呈现阳性表达，阳性率分别占46.67%和53.33%，而对照组仅有2例出现阳性状况，由此来看，初发组和复发组MMP-2的阳性率明显高于对照组，而在CD147阳性表达方面，初发组有17例患者呈阳性症状，复发组有23例呈现阳性状况，分别占56.67%和76.67%，而对照组仅有10.00%的患者出现阳性反应，由此来看，初发组和复发组CD147的阳性率明显高于对照组.综合分析可知，MMP-2、CD147在腮腺初发及复发多形性腺瘤中阳性率较正常人明显提高；之后，对初发组和复发组进行一定的治疗干预，再次对三组研究对象进行MMP-2、CD147阳性检测表达，结果发现，治疗后，MMP-2、CD147在三组患者的体内的阳性表达率均无明显性差异，综合治疗前的阳性率可以推断，MMP-2、CD147可视为多形性腺瘤的标志物，在一定条件下，可为多形性腺瘤早期诊断、治疗以及预后提供有效参考［11－13］.

MMP-2作为基质金属蛋白酶的一种，主要由正常结缔组织及肿瘤组织合成、分泌，可以破坏基质的降解平衡，可以促使肿瘤细胞间脱粘附，促进瘤细胞突破由基底膜和细胞外基质构成的组织学屏障，以达到侵袭周围组织和远处转移，从而直接影响调节着肿瘤细胞的基因表达；CD147是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白，最早从肺癌细胞系LX-1中被分离出来，刺激成纤维细胞产生MMPs，促进肿瘤血管的生成，其水解产物影响着肿瘤细胞的生长、浸润和转移［8－11］.由此可知，MMP-2、CD147的阳性表达率与肿瘤细胞有着直接的关系，其协同表达可以作为判定肿瘤的发病、术后复发倾向的重要指标，为腮腺多形性腺瘤的预测、发生及转归提供有效的临床参考.

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ExpressionstudyofMMP-2，CD147in parotid pleomorphic adenoma

TANG Rui-Ping1，WU Ai-Min1，ZHENG Ben-Qiang2，LI Jing3，DENG Ling1，HE Hong1

1Medical College，Jingchu University of Technology；Second People'sHospitalofJingmen：2Stomatologicalhospital，3Department of Stomatology，Jingmen 448000，China

AIM：To investigate the expression of MMP-2 and CD147 in patients with parotid pleomorphic adenoma so as to provide reference for prediction，occurrence and prognosis of parotid pleomorphic adenoma.METHODS：A total of 30 patients with incipient tumors of pleomorphic adenoma and 30 patients with recurrent tumor of pleomorphic adenoma admitted into Second People's Hospital of Jingmen from January 1998 to January 2011 were selected as the observation group，another 30 cases of normal parotid tissue from healthy people were selected as the control group.The content of MMP-2 and CD147 were detected before the treatment，and then the positive rates of two groups were compared；After the treatment，the positive rates of two groups were compared again.RESULTS：Before the treatment，the rates of MMP-2 and CD147 positive expression in patients with incipient tumors and recurrent tumors were obviously higher than those of control group，with statistically significant differences（P＜0.05）；After the treatment，there was no statistically significant difference between the rates of MMP-2 and CD147 positive expression in patients with incipient tumors and recurrent tumors（P＞0.05）.CONCLUSION：There is a direct relationship between MMP-2，CD147 and the incidence of parotid pleomorphic adenoma，which can be as tumor markers in the clinical diagnosis，so as to provide reference for prediction，occurrence and prognosis of parotid pleomorphic adenoma.

MMP-2；CD147；Parotid pleomorphic adenoma

R739.8

A

2095-6894（2016）12-22-03

2016－09－20；接受日期：2016－10－08

唐瑞平.副主任医师，副教授.Tel：0724-2495100 E-mail：trptts＠163.com