HPLC-DAD测定不同时期安吉白茶中EGCG的含量

北 拉，蒲首丞，孙梅好

（浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江金华 321004）



HPLC-DAD测定不同时期安吉白茶中EGCG的含量

北 拉，蒲首丞，孙梅好

（浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江金华 321004）

摘 要：文章采用HPLC-DAD对不同时期安吉白茶叶中的表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的含量变化进行分析。采用AgilentC18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流动相：甲醇︰水（2%乙酸）15︰85；流速：1.0 ml/min；检测波长：276 nm；柱温：35℃。结果是EGCG线性范围为0.304～3.040μg，相关系数R2=0.999 9，平均回收率100.21%，RSD为1.04%。该方法精密度、准确度好，稳定性高，能简便、快速。

关键词：HPLC-DAD 安吉白茶 表没食子儿茶素没食子酸酯 含量

安吉白茶（AnjiwhiteTea），为山茶科（Theaceae）茶属（Camellia）双子叶木本植物。现代研究表明白茶中的EGCG成分具有显著的抗氧化、抗肿瘤、抗突变和心血管疾病等作用。文章通过对明前和明后两种不同生长期的白茶EGCG含量的测定，为以白茶为原料制备EGCG单体和EGCG提取物的茶叶加工企业提供实验依据。

1　材料与方法

1.1材料

（1）主要研究对象。安吉白茶（安吉采集和炒制）。

（2）主要试剂。表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCE）（上海源叶公司，含量：98%），甲醇为色谱纯试剂，其它试剂均为分 析纯。实验用水艾柯超纯水。

（3）主要仪器。Agilent1260型高效液相色谱仪（Agilent公司），电子分析天平（赛多利斯），恒温水浴锅（精宏公司），真空干燥箱（天呈），RA-25AA旋转蒸发仪（上海亚荣）。

1.2方法

（1）色谱条件色谱柱为AgilentC18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流动相：甲醇︰水（2%乙酸）15︰85；流速：1.0 ml/min；检测波长：276 nm；柱温：35℃。

（2）对照品溶液的制备精密称取经真空干燥24 h处理后的15.2 mg表没食子儿茶素没食子酸酯对照品，置于100 ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液，于冰箱中低温保存备用。表没食子儿茶素没食子酸酯浓度为152 μg/ml。

（3）供试品溶液的制备分别准确称取样品约1.0 g，置于500 ml平底烧瓶中，加水100 ml80℃水，置85℃水的水浴中加热回流1 h，共水浴加热回流两次，经过滤收集滤液，最后减压浓缩滤液，定容至50 ml容量瓶中，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液待测。

2　结果与分析

2.1目标组分的确定

按照1.2项色谱条件下，对照品溶液和供试品溶液分别进样10μl，DAD检测器检测分析，在波长为276 nm下是EGCG的最大吸收，DAD检测器检测记录储存200～400 nm的所有色谱，对照品与2种白茶样品的EGCG的保留时间都在8.5 min。

2.2流动相的选择

测定EGCG含量流动相为甲醇︰水系统和甲醇︰水（2%乙酸）系统，进行对比试验发现两个系统都能使EGCG分离开来（分离度R＞1.5），甲醇︰水系统中EGCG严重拖尾，而甲醇︰水（2%乙酸）系统中EGCG峰形比较好，故选择甲醇︰水（2%乙酸）15︰85为该测定方法的流动相系统。

2.3线性关系考察

精密吸取上述对照品溶液分析，进样量分别为2、4、6、8、12、16、20μl，测其峰面积，以标准溶液的进样量X（μg）为横坐标，以峰面积Y（s）为纵坐标作图，得到线性回归方程为Y=854.160X-20.854，相关系数为R2=0.9999，表明EGCG在0.152～3.040μg范围内与峰面积之间具有良好的线性关系。

2.4精密度试验

精密吸取配制的对照品溶液10μl进样，依上述色谱条件测定，重复进样5次，测定EGCG峰面积，RSD为1.6%，结果表明精密度良好。

2.5稳定性试验

分别取配制的2种供试样品溶液10μl，于0、2、4、6、8、10 h进样测定，各重复进样6次，测定目标组分的含量，以考察供试品溶液的稳定性，10 h内早白茶和晚白茶样品EGCG组分RSD分别为2.1%、2.8%。结果表明供试品溶液在10 h内基本稳定。

2.6加样回收试验

精密称取已知含量的白茶样品6份，分别精密加入一定量EGCG对照品，按供试品溶液制备方法制备样品溶液，依上述色谱条件测定含量，结果显示该方法具有较高的准确度。

2.7样品中EGCG含量的测定

分别取1.3.2项配制的2种供试品溶液10μl，按1.2项色谱条件进样测定，每样重复进样3次，求峰面积均值，按外标法计算其含量，早白茶中EGCG的含量为：81.28 mg/g，RSD为0.59%；晚白茶中EGCG的含量为：62.71 mg/g，RSD为0.97%

3　结论

采用该法对早白茶（明前主采茶期）和晚白茶（明后采茶末期）中的EGCG进行了含量分析，实验结果表明早白茶EGCG的含量为：81.28 mg/g，含量较高；晚白茶EGCG含量：62.71 mg/g，比早白茶含量低，但含量比较高。该测定白茶中EGCG含量的方法操作简单，重现性好，分析结果准确可靠，可用于白茶的质量控制。

参考文献

［1］ 于淑池，刘畅，王乘慧，等.安吉白茶茶多酚的抗氧化活性研究.时珍国医国药，2012，23（5）：1 184～1 187

［2］ 谢文钢，邵济波，韩楠，等.安吉白茶的研究进展.福建茶叶，2011，33（6）：4～7