不同炮制方法在大黄遗传毒性减毒中的应用价值探究

2016-02-06南香兰

中国卫生标准管理 2016年17期

南香兰

南香兰

目的探究不同炮制方法在大黄遗传毒性减毒中的应用价值。方法分别使用醋蒸法、醋炒法炮制生大黄，建立污染物致突变性检测（AMES）实验检测其效果，比较结果差异性。结果醋蒸［TA97的S9阴性、阳性值分别为（244.5±9.1）、（250.1±8.0）］的大黄样品除醋蒸样品在代谢非活化条件下呈阳性外，菌株TA97、TA98、TA100及TA102的致突变性都呈现阴性结果，醋炒大黄结果仍呈阳性。结论醋蒸法炮制后能有效降低大黄毒作用，醋炒法炮制后大黄减毒效果不明显。

炮制；大黄遗传毒性；减毒

【Abstract】

Objective To explore the application value of different processing methods in the genetic toxicity reduction of rhubarb. Methods Using vinegar steamed method，vinegar fried method of raw rhubarb，the establishment of pollutant mutagenicity test experiment to detect its effect，compare the difference between the results. Results Steaming with vinegar［TA97 S9negative and positive values respectively（244.5±9.1），（250.1±8.0）］ of Rhubarb Samples from vinegar steamed samples in non metabolic activation is positive，strains TA97，TA98，TA100 and TA102 induced mutagenicity showed negative results，vinegar fried rhubarb results is still positive. Conclusion With vinegar steaming method can effectively reduce the large effect of vinegar fried by pornography，vinegar fried method of the effect is not obvious.

【Key words】Processing，Rhubarb genetic toxicity，Attenuated

大黄具有清湿热、攻积滞、祛瘀、解毒等功效［1］，主要成分为蒽醌类衍生物，能以游离状态存在，也可以结合存在［2］。但大黄在有药用价值之余也存在一定毒性作用［3］。有研究显示［4］，大剂量生大黄片可导致受孕雌性大鼠出现虚证表现，增加死胎率。本次研究分别使用醋蒸法、醋炒法炮制200 g生大黄，探究不同炮制方法在大黄遗传毒性减毒中的应用价值。报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

将同批次的200 g生大黄中药材分成2组，每组100 g，分别使用醋蒸法、醋炒法进行炮制。实验使用试剂有二甲基亚砜、敌克松等。使用菌株为组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100及TA102，经专家鉴定符合实验要求。

1.2方法

1.2.1炮制方法分别使用醋蒸法、醋炒法进行炮制100 g生大黄中药材。醋蒸法：向100 g生大黄中加入18 g醋，其搅拌均匀后，将醋与生大黄混合物放入锅中加热，蒸透30 min后取出，放凉备用。

醋炒法：向100 g生大黄中加入18 g醋，均匀搅拌，醋与生大黄混合物闷透后，将其放入锅中翻炒，至大黄表面呈焦黄色后取出放凉备用。

1.2.2污染物致突变性检测（AMES）实验方法使用平皿掺入法，大黄浓度梯度分别为每表面皿0.05 mg、0.05 mg、0.10 mg、0.50 mg、2.50 mg、5.00 mg检测突变性，经过2种炮制方法后使用毒性最强的5.00 mg/表面皿的生大黄浓度进行实验，阳性对照：代谢活化组使用20μg/表面皿的2-AF；TA100非代谢活化使用50 pg/表面皿的叠氮钠；其它菌株非代谢活化时使用50μg/表面皿的敌克松。阴性对照：0.1 ml/表面皿的二甲基亚砜。

1.3观察指标

观察记录使用不同炮制方法后大黄的AMES实验结果。

1.4统计学方法

根据SSPS 19.0统计学软件对收集到的研究资料和数据进行分析处理，计量资料采用t 检验，以表示。P＜0.05表明差异有统计学意义。

2　结果

生大黄菌株TA97的S9阴性、阳性值分别为（451.3±7.4）、（410.5±6.8），TA98的S9阴性、阳性值分别为（44.5±12.1）、（46.7±10.8），TA100的S9阴性、阳性值分别为（363.2±7.2）、（390.1±5.9），TA102的S9阴性、阳性值分别为（443.7±8.7）、（458.2±9.2）。醋蒸法菌株TA97的S9阴性、阳性值分别为（244.5±9.1）、（250.1±8.0），TA98的S9阴性、阳性值分别为（50.3±6.8）、（41.3±8.6），TA100的S9阴性、阳性值分别为（142.3±9.3）、（162.2±6.0），TA102的S9阴性、阳性值分别为（432.2±7.9）、（242.4±7.6）。醋炒法菌株TA97的S9阴性、阳性值分别为（431.3±8.0）、（397.1±7.2），TA98的S9阴性、阳性值分别为（41.5±9.2）、（37.2±10.3），TA100的S9阴性、阳性值分别为（168.3±8.2）、（177.3±9.4），TA102的S9阴性、阳性值分别为（465.9±8.1）、（422.1±6.8）。醋蒸大黄样品除醋蒸样品在代谢非活化条件下呈阳性外，菌株TA97、TA98、TA100及TA102的致突变性都呈现阴性结果，醋炒大黄结果仍呈阳性。

3讨论

大黄药性一般情况下较为安全，但大量使用生大黄后易导致中毒，出现恶心呕吐、腹绞痛等症状［5］。进行炮制后应用于临床治疗，可降低毒副作用，但炮制方法繁多，寻找有效降低生大黄遗传毒性的炮制方法尤为重要。

大黄在加工、炮制过程中，以结合方式存在的蒽醌类物质减少，游离状态蒽醌类物质增大，减弱泻下作用［6］。醋蒸炮制后，大黄在高温条件下蒽醌化合物苷键出现断裂，产生毒性较弱的游离态蒽醌物质，降低大黄遗传毒性［7］。污染物致突变性实验可用来进行环境毒理学实验分析［8］，本次研究显示，醋蒸大黄样品除醋蒸样品在代谢非活化条件下呈阳性外，菌株TA97、TA98、TA100及TA102的致突变性都呈现阴性结果，醋炒大黄结果仍呈阳性。

［1］邹志远，宋有涛，杨雷，等. 不同炮制方法对大黄的遗传毒性的减毒效果的研究［J］. 辽宁大学学报：自然科学版，2011，38（4）：338-342.

［2］李会芳，马永刚，肖小河，等. 基于四膜虫生物热活性的大黄炮制减毒研究［J］. 中草药，2012，43（1）：103-105.

［3］赵昱波. 不同炮制和煎煮时间对大黄沉降药性的影响研究［J］.中国卫生标准管理，2015，6（25）：139-140.

［4］花胜利，肖热风，赖怀恩. 不同炮制方法对大黄遗传毒性减毒效果的研究［J］.亚太传统医药，2014，10（11）：27-28.

［5］朱钦翥，陈维，张立实. 大黄素和大黄酸的体外遗传毒性评价［J］. 癌变·畸变·突变，2011，23（1）：65-67.

［6］谢明. 不同炮制方法大黄中的蒽醌含量比较［J］. 海峡药学，2014，26（4）：80-82.

［7］祝婷婷，刘晓，汪小莉，等. 大黄不同方法炮制后药理作用及化学成分变化研究进展［J］. 中国新药杂志，2016，25（8）：883-887.

［8］于朝霞. 不同炮制方法对大黄遗传毒性减毒效果的影响［J］.医学信息，2015，28（32）：153.

Application Value of Different Processing Methods in the Genetic Toxicity of Rhubarb

NAN Xianglan Bureau of Traditional Chinese Medicine，The People's Hospital of Hunchun City，Hunchun Jilin 133300，China

R28

1674-9316（2016）17-0147-03