头花蓼提取物不同给药方式治疗炎症大鼠的效果

曹 芳 段 萍 王洪平 张友波

(黔南民族医学高等专科学校，贵州 都匀 558000)

头花蓼提取物不同给药方式治疗炎症大鼠的效果

曹 芳 段 萍1王洪平2张友波2

(黔南民族医学高等专科学校，贵州 都匀 558000)

目的 探讨灌胃给药及静脉注射头花蓼提取物治疗炎症大鼠的效果。方法 将180只SD雄性大鼠随机分为灌胃给药及静脉注射组，各90只，两组再各分为模型组、布洛芬组及头花蓼提取物组3个亚组，各30只。模型组灌胃或静脉注射5%吐温-80溶液，布洛芬组灌胃或静脉注射布洛芬配制液7.5 mg/kg，头花蓼提取物组灌胃或静脉注射头花蓼提取物10 mg/kg，连续给药7 d后，分别采用冰醋酸、二甲苯和醋酸制备炎症模型，观察不同组大鼠炎症抑制效果。结果 不同的给药方案中，布洛芬组和头花蓼提取物组大鼠的扭体次数、耳廓肿胀度和腹腔毛细管通透性均明显低于模型组(P<0.05)；与灌胃给药相比，静脉注射布洛芬组大鼠上述各指标无显著变化(P>0.05)，而头花蓼提取物组则显著降低，且低于布洛芬组(P<0.05)。结论 头花蓼提取物具有显著的抗炎、镇痛作用，静脉注射方式效果更显著。

头花蓼提取物；炎症

头花蓼(Polygonum,capitatatum)为蓼科属多年生草本植物，中药传统理论认为，它具有清热解毒、活血止痛、利尿等功效，现代药理活性研究发现，它具有抗菌、抗感染、抗氧化等多种活性〔1〕，主要作用成分包括挥发油、酚酸类、黄酮类、有机酸、酯、醛、醇类及其他类化合物〔2〕，主要用于泌尿系统感染的治疗。研究显示头花蓼中成药与抗生素联合治疗尿路感染的总有效率达93.3%〔3,4〕。此外，头花蓼提取物中的黄酮类化合物还具有抗感染功能〔5,6〕，但目前关于其最佳给药方式仍然存在巨大分歧。本实验拟观察头花蓼提取物的抗感染、镇痛效果。

1 材料与仪器

1.1 实验动物 普通级健康SD雄性大鼠180只，体重300～400 g，平均体重(350.26±5.31)g，购自兰州大学实验动物中心，动物许可证号：SCXK(甘)2009-0004，在室温21℃～ 23℃、湿度40%～60%、自然光照条件下饲养，自由摄食饮水。

1.2 药品与仪器 头花蓼药材粉末购自贵州施秉；冰醋酸、二甲苯(分析纯)、醋酸(分析纯)、三氟乙酸均购自生工生物工程股份有限公司；布洛芬购自上海永叶生物科技有限公司；伊文思蓝购自大连美仑生物技术有限公司；打孔器(直径8 mm)购自北京普凯瑞生物科技有限公司；电子天平(AG135型)购自上海鼎国生物技术有限公司；紫外可见分光光度计购自北京百泰克生物技术有限公司。

1.3 头花蓼提取 取头花蓼药材粉末25.56 g过60目筛，70%乙醇浸泡15 h，索氏提取器中回流提取1.5 h，重复3次，冷却室温，减压抽滤，最后将过滤液浓缩，得乙醇提取物1.45 g。

1.4 实验分组 大鼠禁食15 h后随机分为灌胃给药及静脉注射组，各90只，两组再分为3个亚组，分别为模型组、布洛芬组及头花蓼提取物组，各30只。模型组灌胃或静脉注射5%吐温-80溶液，布洛芬组给予布洛芬配制液(100 mg布洛芬片+100 ml 5%羧甲基纤维素钠)灌胃或静脉注射7.5 mg/kg，头花蓼提取物组灌胃或静脉注射头花蓼提取物10 mg/kg，各组给药均为1次/d，连续给药7 d。给药后将3亚组分成①～③号实验组待用，每组10只大鼠。

1.5 冰醋酸致大鼠疼痛实验 末次给药30 min后，向①号实验组大鼠腹腔注射1%冰醋酸溶液0.2 ml致痛，给药剂量为0.1 ml/10 g。致痛后15 min观察大鼠扭体反应，即大鼠腹部内凹、后肢与躯干伸张，同时臀部高起，记录扭体次数。

1.6 二甲苯致大鼠耳廓肿胀实验 末次给药1 h后，分别在②号实验组大鼠左耳前后两面均匀涂抹二甲苯0.1 ml，右耳不涂，4 h后将大鼠脱颈处死，剪下双耳，用打孔器分别在两耳的同一部位打下圆耳片，称重，以大鼠左右耳片质量差表示肿胀度。

1.7 醋酸致大鼠毛细管通透性增高实验 末次给药后1 h，分别向③号实验组大鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水0.1 ml/g，随即腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml/10 g，20 min后将大鼠脱臼处死，剪开腹腔皮肤，用2 ml生理盐水洗涤腹腔3次，吸取腹腔洗液，3 000 r/min离心15 min，取上清液用分光光度计在620 nm处比色，测定光密度值(OD值)。

1.8 统计学分析 采用SPSS10.0软件，计量资料采用t检验、单因素方差分析、χ2检验。

2 结 果

2.1 不同给药方式对冰醋酸致痛大鼠的作用 不同的给药方案中，布洛芬组和头花蓼提取物组的扭体次数均明显少于模型组〔灌胃给药：(47.52±6.86)次；静脉注射(47.37±7.01)次，P<0.05〕。灌胃给药方案中，布洛芬组〔(31.55±3.25)次〕和头花蓼提取物组〔(28.56±2.99)次〕的扭体次数比较无差异(P>0.05)；静脉注射方案中，头花蓼提取物组的扭体次数〔(20.11±2.13)次〕少于布洛芬组〔(31.69±3.19)次，P<0.05〕。与灌胃给药相比，静脉给药布洛芬组扭体次数无显著变化(P>0.05)，而头花蓼提取物组扭体次数显著降低(P<0.05)。

2.2 不同给药方式对二甲苯致大鼠耳廓肿胀的作用 灌胃给药方案中，模型组、布洛芬组、头花蓼提取物组的耳廓肿胀度分别为(13.25±2.10)mg/g、(7.61±0.45)mg/g、(6.45±1.21)mg/g，而静脉注射方案中三组的耳廓肿胀度分别为(13.72±1.56)mg/g、(7.12±0.26)mg/g、(4.37±0.38)mg/g。不同的给药方案中，布洛芬组和头花蓼提取物组的大鼠耳廓肿胀度均明显低于模型组(P<0.05)。灌胃给药方案中，布洛芬组和头花蓼提取物组的耳廓肿胀度无显著差异(P>0.05)；静脉注射方案中，头花蓼提取物组的耳廓肿胀度低于布洛芬组(P<0.05)。与灌胃给药相比，静脉注射布洛芬组的耳廓肿胀度无显著变化(P>0.05)，而头花蓼提取物组的耳廓肿胀度则显著降低(P<0.05)。

2.3 不同给药方式对醋酸致大鼠腹腔毛细管通透性增高的作用 灌胃给药方案中，模型组、布洛芬组、头花蓼提取物组的OD值分别为(0.52±0.12)、(0.33±0.11)、(0.30±0.09)，而静脉注射方案中三组的OD值分别为(0.55±0.11)、(0.37±0.12)、(0.21±0.14)。不同的给药方案中，布洛芬组和头花蓼提取物组的OD值均明显低于模型组(P<0.05)。灌胃给药方案中，布洛芬组和头花蓼提取物组的OD值无显著差异(P>0.05)；静脉注射方案中，头花蓼提取物组的OD值低于布洛芬组(P<0.01)。与灌胃给药相比，静脉给药布洛芬组的OD值无显著变化(P>0.05)，而头花蓼提取物组的OD值则显著降低(P<0.05)。

3 讨 论

头花蓼是贵州苗族民间常用药物，其单方制剂也得到了广泛的临床应用〔7〕。国内外对头花蓼的报道以其化学成分的分离和临床药理研究居多，而对其具体的抗感染机制及抗感染有效部位的研究较少。炎症是威胁人类健康的一种常见和多发的疾病，其病理变化包括变质、渗出和增生〔8〕，主要表现为毛细血管通透性增加致病变组织肿胀、疼痛。急性炎症通常具有红、肿、热、痛等变化，同时往往伴有发热、白细胞增多等全身反应。这些变化的实质是机体免疫系统对外来异物的客观反应。致炎因子作用于机体后，一方面损害正常组织，使部分组织发生趋化、变形；另一方面刺激增强机体抗病功能，消灭致炎因子，修复受损害的组织，从而使机体内、外环境之间达到新的平衡。化学研究表明，头花蓼所含的主要有效成分是黄酮类和酚酸类化合物，这两种成分都具有抗菌和抗感染活性〔9,10〕。

布洛芬的解热、镇痛、抗感染作用已被临床研究证实〔11,12〕。本研究结果表明，布洛芬和头花蓼提取物均有抗感染作用，甚至在静脉注射给药方案下，其效果优于布洛芬，可能与其减少炎性组织中前列腺素E2的生成、抑制组织炎症中脂质过氧化产物形成和降低NO的活力有关，具体抗感染机制有待进一步研究。比较灌胃给药与静脉注射头花蓼对3组不同炎症大鼠模型的疗效发现，静脉注射给药方案效果更佳，可明显改善炎症大鼠的组织肿胀、疼痛，抑制毛细血管通透性增加，具有较好的抗感染作用。头花蓼提取物有效成分在肠道内滞留时间较长，难以吸收，生物利用度低。而静脉注射起效快，可经血液循环迅速扩散至全身，将药物达致疗效浓度，并可持续维持疗效所需的恒定浓度，因此镇痛、抗感染效果显著。

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2 潘雯婷,张丽艳,谢 宇,等.主成分及聚类分析法对不同产地头花蓼的综合质量评价〔J〕.中国实验方剂学杂志,2012;18(10):153-7.

3 赵旭东,谢红林,高文君,等.头孢地尼联合热淋清胶囊治疗泌尿道感染100例临床观察〔J〕.浙江中医杂志,2014;49(10):732.

4 李小玲,缪 娟.头孢克肟联合热淋清胶囊治疗女性尿路感染疗效观察〔J〕.临床合理用药杂志,2012;5(16):93-4.

5 Zhang K,Zhang J,Wei S,etal.Development and validation of HPLC coupled with triple quadrupole MS for the simultaneous determination of six phenolic acids,six flavonoids,and a lignan in polygonum capitatum〔J〕.J Sep Sci,2013;36(15):2407-13.

6 刘瑜新,宋晓勇,康文艺,等.头花蓼对多重耐药金黄色葡萄球菌抗菌作用研究〔J〕.中成药,2014;36(9):1818-21.

7 He CY,Fu J,Ma JY,etal.Biotransformation and in vitro metabolic profile of bioactive extracts from a traditional miao-nationality herbal medicine,polygonum capitatum〔J〕.Molecules,2014;19(7):10291-308.

8 Meng H,Liu Y,Lai L.Diverse ways of perturbing the human arachidonic acid metabolic network to control inflammation〔J〕.Acc Chem Res,2015;48(8):2242-50.

9 唐 丽,刘 跃,黄 勇,等.离体外翻肠囊法研究头花蓼提取物中5个成分的肠吸收特性〔J〕.中国药理学通报,2014;30(7):1031-2.

10 Zhang KX,Wang YS,Jing WG,etal.Improved quality control method for prescriptions of Polygonum capitatum through simultaneous determination of nine major constituents by HPLC coupled with triple quadruple mass spectrometry〔J〕.Molecules,2013;18(10):11824-35.

11 Heinbockel L,Marwitz S,Barcena Varela S,etal.Therapeutical administration of peptide Pep19-2.5 and ibuprofen reduces inflammation and prevents lethal sepsis〔J〕.PLoS One,2015;10(7):e0133291.

12 Mokhtari F,Yazdi K,Mahabadi AM,etal.Effect of premedication with indomethacin and ibuprofen on postoperative endodontic pain:a clinical trial〔J〕.Iran Endod J,2016;11(1):57-62.

〔2016-05-11修回〕

(编辑 李相军)

贵州省卫生厅科学技术基金资助(gzwkj2013-1-074)

曹 芳(1971-)，女，副教授，主要从事中草药药效学和药动学方面的研究。

R284

A

1005-9202(2016)24-6065-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.24.008

1 黔南州药品食品检验所

2 北京大学药学院天然药物学系 天然药物及仿生药物国家重点实验室