中华猕猴桃果实化学成分的研究

马凤爱， 吴德玲， 许凤清， 张 伟， 任亚硕（.安徽中医药高等专科学校，安徽芜湖24000；2.安徽中医药大学药学院，安徽合肥23002；3.安徽省现代中药重点实验室，安徽合肥23002）



中华猕猴桃果实化学成分的研究

马凤爱1， 吴德玲2，3*， 许凤清2，3， 张 伟2，3， 任亚硕2，3
（1.安徽中医药高等专科学校，安徽芜湖241000；2.安徽中医药大学药学院，安徽合肥230012；3.安徽省现代中药重点实验室，安徽合肥230012）

摘要：目的 对中华猕猴桃Actinidia Chinensis P1anch.果实的化学成分进行研究。方法 果实的乙酸乙酯提取物采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、反相ODS柱等方法进行分离纯化，根据所得化合物的波谱数据确定其结构。结果 从中分离得到8个化合物，分别鉴定为3β-乙酰氧基-12-烯-28-乌苏酸（1）、2α，3β-二羟基-12-烯-28-乌苏酸（2）、2α，3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸（3）、2α，3α-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸（4）、齐墩果酸（5）、乌苏酸（6）、胡萝卜苷（7）、β-谷甾醇（8）。结论 化合物1～4为首次从中华猕猴桃果实中分离得到。

关键词：中华猕猴桃；果实；化学成分

KEY W 0RDS：Actinidia Chinensis P1anch.；fruits；chemica1 constituents

中华猕猴桃为猕猴桃科猕猴桃属植物中华猕猴桃Actinidia Chinensis P1anch.的果实［1］。中医认为［2-3］，猕猴桃味酸，甘寒，无毒，具有止暴渴、解烦热、压丹石、调中下气、下淋石热壅的功效，临床用于治疗骨节风，瘫缓不随，长年白发等病症。现代研究证明，猕猴桃果汁具有多种药理活性，如抗肿瘤［4］、抗氧化［5-6］、免疫调节［7］、降血脂［8］和保肝［9］等。目前，相关研究主要集中在果汁及果脯的加工方面，但对其化学成分的文献报道较少。在前期研究的基础上［10］，本实验进一步利用硅胶、IP-18反相、MCI、Sephadex LH-20凝胶柱等色谱技术对中华猕猴桃果实的乙酸乙酯部位展开研究，结果从中分离得到8个化合物。然后通过1H-NMI，13C-NMI等波谱技术确定其结构，分别鉴定为3β-乙酰氧基-12-烯-28-乌苏酸（1）、2α，3β-二羟基-12-烯-28-乌苏酸（2）、2α，3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸（3）、2α，3α-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸（4）、齐墩果酸（5）、乌苏酸（6）、胡萝卜苷（7）、β-谷甾醇（8）。

1 仪器与试剂

WIS-1B数字熔点测定仪（温度计未校正，上海索光光电技术有限公司）；Bruker AV 400、600 MHz核磁共振仪，TMS为内标（德国Bruker公司）；APIQSTAI Pu1sari液相四级杆飞行时间质谱仪（加拿大MDS Sciex公司）；Waters Auto Purification HPLC 2545-2489制备色谱仪（美国Waters公司）；EYELA SB-1100旋转蒸发仪（东京理化器械株式会社）；AB135-S分析天平（十万分之一，瑞士Mett1er-To1edo公司）。Sephadex LH-20凝胶（瑞典Amersham Biosciences公司）；薄层层析板、柱色谱用硅胶（200～300目，青岛海洋化工有限公司）。所用试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）；显色剂为10%硫酸乙醇溶液。

中华猕猴桃采自陕西省周至县，经安徽中医药大学周建理教授鉴定为猕猴桃科植物中华猕猴桃Actinidia Chinensis P1anch.的果实。

2 提取与分离

取新鲜成熟的中华猕猴桃果实80 kg，切块榨汁，果汁加1.5倍蒸馏水稀释，乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩，回收溶剂，得到乙酸乙酯部位浸膏70 g。浸膏用硅胶拌样，硅胶柱层析，石油醚-丙酮梯度洗脱。其中，石油醚-丙酮（7∶3）部分反复经硅胶柱色谱分离纯化，得到化合物1（5.2 mg）；石油醚-丙酮（6∶4）部分反复经硅胶柱色谱和高压制备色谱（80%～90%甲醇）分离纯化，得到化合物2（2.6 mg）、3（2.7 mg）；石油醚-丙酮（9∶1～8∶2）部分反复经Sephadex LH-20柱色谱和硅胶柱色谱分离纯化，得到化合物4（1.5 mg）、5（2.5 mg）、6（3.0 mg）、7（3.4 mg）和8（15 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色结晶（三氯甲烷-甲醇），mp 252～254℃。ESI-MS m/z：499［M＋H］＋，分子式C32H50O4。1H-NMI（400 MHz，DMSO-d6）δ：1.91，1.52，1.26，1.20，1.02，0.86，0.75（7 ×CH3，s，21H），5.15（1H，s，H-12），4.41 （1H，m，H-3α），2.10（1H，J＝10.2 Hz，H-18）。13C-NMI（100 MHz，DMSO-d6）δ：37.7（C-1），22.8（C-2），79.9（C-3），37.2（C-4），54.5 （C-5），17.8（C-6），32.5（C-7），39.5（C-8），46.8（C-9），36.4（C-10），18.6（C-11），124.4 （C-12），138.2（C-13），41.6（C-14），27.5（C-15），23.8（C-16），48.5（C-17），52.4（C-18），38.4（C-19），38.4（C-20），30.2（C-21），36.3 （C-22），27.8（C-23），16.4（C-24），15.1（C-25），16.8（C-26），23.2（C-27），178.2（C-28），17.0（C-29），21.0（C-30），170.0（-CH3CO），21.0（-CH3CO）。以上数据与文献［11-12］基本一致，确定化合物1为3β-乙酰氧基-12-烯-28-乌苏酸。

化合物2：白色粉末（三氯甲烷-甲醇），mp 251～253℃。ESI-MS m/z：473［M＋H］＋，分子式C30H48O4。1H-NMI（600 MHz，pyridine-d5）δ：1.20，1.07，1.04，0.98，0.97，0.94，0.93（7× CH3，s，21H），5.45（1H，s，H-12），3.40（1H，d，J＝9.2 Hz，H-3α），2.61（1H，d，J＝11.2 Hz，H-18）。13C-NMI（150 MHz，pyridine-d5）δ：47.8（C-1），68.4（C-2），83.7（C-3），39.7（C-4），55.7（C-5），18.7（C-6），33.3（C-7），39.9 （C-8），47.9（C-9），38.3（C-10），23.6（C-11），125.4（C-12），139.2（C-13），42.4（C-14），30.9（C-15），24.7（C-16），47.9（C-17），53.4 （C-18），39.3（C-19），39.2（C-20），28.5（C-21），37.3（C-22），29.2（C-23），16.8（C-24），17.3（C-25），17.4（C-26），23.7（C-27），179.8 （C-28），17.6（C-29），21.3（C-30）。以上数据与文献［13］基本一致，确定化合物2为2α，3β-二羟基-12-烯-28-乌苏酸。

化合物3：白色粉末（三氯甲烷-甲醇）。ESIMS m/z：473［M＋H］＋，分子式为C30H48O4。1HNMI（600 MHz，pyridine-d5）δ：1.34，1.26，1.10，1.03，0.95，0.94，0.92（7×CH3，s，21 H），5.44（1H，s，H-12），2.61（1H，d，J＝11.3 Hz，H-18）。13C-NMI（150 MHz，pyridine-d5）δ：42.8（C-1），65.9（C-2），79.2（C-3），38.6 （C-4），48.5（C-5），18.3（C-6），33.3（C-7），40.0（C-8），47.7（C-9），38.4（C-10），23.5（C-11），125.4（C-12），139.1（C-13），42.4（C-14），30.9（C-15），24.7（C-16），47.9（C-17），53.4（C-18），39.3（C-19），39.2（C-20），28.5 （C-21），37.3（C-22），29.3（C-23），22.1（C-24），16.6（C-25），17.3（C-26），23.7（C-27），179.8（C-28），17.3（C-29），21.2（C-30）。由以上数据可知，化合物3与化合物2的结构母核一致，但其C5的化学位移值与后者相比，向高场方向位移了7.2，而C24向低场方向位移了5.3，因此3-OH为α构型。而且，与文献［13-14］基本一致，确定化合物3为2α，3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸。

化合物4：白色粉末（三氯甲烷-甲醇）。ESIMS m/z：473［M＋H］＋，分子式C30H48O4。1H-NMI （600 MHz，pyridine-d5）δ：1.27，1.25，1.07，1.00，0.99，0.98，0.93（7×CH3，s，21 H），5.44（1H，d，J＝3.6 Hz，H-12），3.38（1H，dd，J＝3.5，14.0 Hz，H-18）。13C-NMI（150 MHz，pyridine-d5）δ：46.3（C-1），68.5（C-2），83.7（C-3），39.7（C-4），55.8（C-5），18.7（C-6），29.8（C-7），39.7（C-8），48.1（C-9），38.4 （C-10），23.6（C-11），122.3（C-12），144.8（C-13），42.1（C-14），28.2（C-15），23.8（C-16），46.6（C-17），41.9（C-18），47.6（C-19），30.8 （C-20），34.1（C-21），33.1（C-22），29.2（C-23），17.6（C-24），17.4（C-25），16.7（C-26），26.0（C-27），180.5（C-28），23.5（C-29），33.1 （C-30）。以上数据与文献［15-16］基本一致，确定化合物4为2α，3α-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸。

化合物5：白色粉末（三氯甲烷-甲醇），mp 308～310℃，分子式C30H48O3。用3种不同系统展开，经TLC检识发现，其I f值与齐墩果酸对照品一致，而且混合后熔点不下降，确定化合物5为齐墩果酸。

化合物6：白色粉末（三氯甲烷-甲醇），mp 283～285℃，分子式C30H48O3。用3种不同系统展开，经TLC检识发现，其I f值与乌苏酸对照品一致，而且混合后熔点不下降，确定化合物6为乌苏酸。

化合物7：白色粉末（三氯甲烷-甲醇），mp 286～287℃。用3种不同系统展开，经TLC检识发现，其I f值与胡萝卜苷对照品一致，而且混合后熔点不下降，确定化合物7为胡萝卜苷。

化合物8：白色针状晶体（石油醚-丙酮），mp 140～142℃。经TLC检识发现，其I f值与β-谷甾醇对照品一致，而且混合后熔点不下降，确定化合物8为β-谷甾醇。

参考文献：

［1］ 中国科学院《中国植物志》编辑委员会.中国植物志：第49卷第2分册［M］.北京：科学出版社，1984：261-263.

［2］ 唐·陈藏器.本草拾遗［M］.合肥：安徽科学技术出版社，2002：278.

［3］ 明·李时珍.本草纲目［M］.北京：中医古籍出版社，1994：802-803.

［4］ 康大力，张洪利.猕猴桃属植物化学成分及其生物活性研究进展［J］.中成药，2008，30（1）：116-119.

［5］ 张 燕.猕猴桃浓缩物抗氧化能力及免疫调节作用的实验研究［D］.青岛：青岛大学，2003.

［6］ 杨冬梅，杨 娟，林延鹏.SOD猕猴桃果汁对健康妇女血清及红细胞丙二醛含量的影响［J］.中国煤炭工业医学杂志，2002，5（3）：215-216.

［7］ 李香华，王鸿翔，赵爱明，等.补充猕猴桃饮料对大强度运动后机体免疫机能影响的观察［J］.中国运动医学杂志，2003，22（2）：187-188.

［8］ 何素琴，曹兴亚.猕猴桃果汁降血脂作用的动物试验［J］.川北医学院学报，1999，14（3）：20-21.

［9］ 黄倬伟，熊筱娟，张国全，等.猕猴桃果汁对小鼠实验性肝损伤的影响［J］.中药通报，1987，12（3）：52-54.

［10］ 马凤爱，吴德玲，许凤清，等.猕猴桃化学成分预实验［J］.广州化工，2014，42（12）：97-98.

［11］ 王福东，丁 兰，汪汉卿.蓝萼香茶菜三萜成分的研究［J］.中国中药杂志，2005，30（24）：1929-1932.

［12］ 崔 莹.中华猕猴桃根的化学成分研究［D］.杨凌：西北农林科技大学，2007.

［13］ 周志强.裸花紫珠化学成分的研究［D］.南昌：南昌大学，2013.

［14］ 周雪峰.冷水七、中华猕猴桃根的物质基础研究［D］.武汉：华中科技大学，2008.

［15］ 徐一新.中药藤梨根和猫人参活性成分研究［D］.上海：第二军医大学，2010.

［16］ 崔 莹，张雪梅，陈纪军，等.中华猕猴桃根的化学成分研究［J］.中国中药杂志，2007，32（16）：1663-1665.

Chem ical constituents from the fruits of Actinidia Chinensis Planch.

MA Feng-ai1， WU De-1ing2，3 *， XU Feng-qing2，3， ZHANGWei2，3， IEN Ya-shuo2，3

（I.AnhuiCollegeof Traditional ChineseMedicine，Wuhu 24IOOO，China；2.Collegeof Pharmacy，AnhuiUniversity of ChineseMedicine，Hefei23OOI2，China；3.Anhui Provincial Key Laboratory of Modern Chinese Medicine，Hefei23OOI2，China）

ABSTRACT：AIM To study the chemica1 constituents from the fruits of Actinidia Chinensis P1anch.METH-0DS The ethy1acetate extract of fruits was iso1ated and purified by si1ica，Sephadex LH-20 and ODS co1umn. The structures of obtained compoundswere e1ucidated by their spectra1data.RESULTS Eight compoundswere iso1ated and identified as 3β-acety1oxy-urso1ic acid（1），2α，3β-dihydroxy-urs-12-en-28-oic acid（2），2α，3αdihydroxy-urs-12-en-28-oic acid（3），2α，3α-dihydroxy-o1ean-12-en-28-oic acid（4），o1ean acid（5），urso1ic acid（6），daucostero1（7），β-sitostero1（8）.C0NCLUSI0N Compounds 1-4 are iso1ated from the fruits of A. Chinensis for the first time.

*通信作者：吴德玲（1973—），男，硕士，教授，从事中药活性成分研究。Te1：（0551）68129066，E-mai1：d1wu7375@sina.com

作者简介：马凤爱（1990—），女，硕士，从事中药活性成分研究。Te1：13695531439，E-mai1：mafengai0920@126.com

收稿日期：2015-04-07

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.024

中图分类号：I284.1

文献标志码：A

文章编号：1001-1528（2016）03-0591-03