细叶杜香化学成分的研究

张洪财， 王 宇， 霍 研， 刘树民（.黑龙江中医药大学中医药研究院，黑龙江哈尔滨50040；.哈尔滨市第五医院，黑龙江哈尔滨50040；3.黑龙江中医药大学药物安全性评价中心，黑龙江哈尔滨50040）



细叶杜香化学成分的研究

张洪财1， 王 宇1， 霍 研2， 刘树民3 *
（1.黑龙江中医药大学中医药研究院，黑龙江哈尔滨150040；2.哈尔滨市第五医院，黑龙江哈尔滨150040；3.黑龙江中医药大学药物安全性评价中心，黑龙江哈尔滨150040）

摘要：目的 研究细叶杜香Ledum palustre L.的化学成分。方法 细叶杜香的正丁醇提取物采用硅胶、ODS柱、HPLC柱及重结晶进行分离纯化，通过理化性质和波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果 从中分离得到8个化合物，分别鉴定为秦皮苷（1）、6-甲氧基香豆素-7-β-D-葡萄糖苷（2）、槲皮素（3）、β-谷甾醇（4）、山奈酚-3-β-D-葡萄糖苷（5）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（6）、f1avano1g1ycoside（7）、芦丁（8）。结论 化合物1、2和7为首次从该植物中得到。

关键词：细叶杜香；化学成分；分离鉴定

KEY W 0RDS：Ledum palustre L.；chemica1 constituents；iso1ation and identification

细叶杜香Ledum palustre L.为杜鹃花科杜香属药用植物，又名喇叭茶、白山苔、绊脚丝等，主要分布在中国东北、日本、西伯利亚、欧洲等地，以我国大兴安岭地区数量最多。细叶杜香具有止咳、平喘、降压、扩张血管、抑制真菌和止痒等药理作用，用于治疗急慢性支气管炎、流感、皮肤病等疾病［1-7］。目前，对其挥发油研究的报道较多，而其他成分相对较少。本实验对细叶杜香正丁醇提取物进行了化学成分分离，共鉴定出8个化合物，分别为秦皮苷（1）、6-甲氧基香豆素-7-β-D-葡萄糖苷（2）、槲皮素（3）、β-谷甾醇（4）、山奈酚-3-β-D-葡萄糖苷（5）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（6）、f1avano1g1ycoside（7）、芦丁（8）。

1 仪器与材料

AV400超导核磁共振光谱仪（德国Bruker公司）；Thermo Hypersi1ODS Agi1ent 1100制备高效液相色谱仪，包括C18制备型色谱柱（10 mm×25 cm，10 μm）、Diamonsi1C18分析型色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）（美国Agi1ent公司）；正相硅胶（青岛海洋化工有限公司，100～120、200～300目）。所用试剂均为分析纯（天力化工有限公司）。

细叶杜香于2012年10月采自大兴安岭地区加格达奇郊外，经黑龙江中医药大学药学院中药鉴定学教研室老师鉴定为细叶杜香Ledum palustre L.的干燥地上部分，标本（编号20121002）保存于黑龙江中医药大学中药现代给药系统研究室。

2 提取分离

取细叶杜香地上部分，粉碎成小段（6 kg），乙醇回流提取，采用经典溶剂萃取法，收集正丁醇部位104 g。将其进行化学成分分离，得到化合物1（24 mg）、2（23 mg）、3（31 mg）、4（15 mg）、5（26 mg）、6（37 mg）、7（18 mg）、8（19 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：淡黄色粉末，易溶于甲醇，Mo1ish反应呈紫色环。HI-MS m/z：371.094 2［M＋H］＋，分子量370，分子式C16H18O10，不饱和度为8。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.22（d，J＝9.4 Hz，H-3），7.85（d，J＝9.4 Hz，H-4），6.95 （s，H-5），3.89（s，-CH3O），4.96（d，J＝7.8 Hz）为葡萄糖端基质子，3.26～3.79为糖的其他质子信号。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：163.7 （C-2），112.8（C-3），146.5（C-4），106.2（C-5），146.3（C-6），147.7（C-7），144.5（C-8），133.3（C-9），112.0（C-10），103.1（C-1＇），74.5 （C-2＇），77.3（C-3＇），71.3（C-4＇），78.5（C-5＇），62.4（C-6＇），56.9（-CH3O）。与文献［8］比较，鉴定该化合物为秦皮苷（fraxin）。

化合物2：淡黄色粉末，易溶于甲醇，Mo1ish反应呈紫色环。HI-MS m/z：355.097 1［M＋H］＋，分子量354，分子式C16H18O9，不饱和度为8。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.29（d，J＝9.5 Hz，H-3），7.88（d，J＝9.5 Hz，H-4），3.88 （s，-CH3O），7.17（s，H-5），7.20（s，H-8），5.05（d，J＝7.7 Hz）为葡萄糖端基质子。13C-NMI （100 MHz，CD3OD）δ：163.5（C-2），114.5（C-3），145.7（C-4），110.7（C-5），151.7（C-6），148.2（C-7），105.2（C-8），150.7（C-9），114.5 （C-10），102.0（C-1＇），74.7（C-2＇），77.8（C-3＇），71.2（C-4＇），78.4（C-5＇），62.4（C-6＇），57.0（-CH3O）。与文献［9］比较，鉴定该化合物为6-甲氧基香豆素-7-β-D-葡萄糖苷（6-methoxycoumarin-7-β-D-g1ucopyranoside）。

化合物3：淡黄色结晶，易溶于甲醇、乙醇等有机溶剂，盐酸-镁粉反应呈阳性，Mo1ish反应呈阴性。HI-MS m/z：303.045 3［M＋H］＋，不饱和度为12。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.23（d，J＝2.2 Hz，H-8）和6.39（d，J＝2.2 Hz，H-6）为苯环上的氢信号，5.27（d，J＝7.6 Hz）为葡萄糖上的端基氢信号，6.85（d，J＝8.5 Hz，H-5＇）、7.56（dd，J＝2.3，8.5 Hz，H-6＇）和7.72 （d，J＝2.3 Hz，H-2＇）处信号组成ABX耦合系统，说明苯环具有1、3、4位基团取代的结构片段。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：159.2（C-2），135.8（C-3），179.2（C-4），163.3（C-5），99.8 （C-6），166.2（C-7），94.7（C-8），158.5（C-9），105.7（C-10），123.3（C-1＇），117.3（C-2＇），145.9（C-3＇），149.5（C-4＇），116.2（C-5＇），123.3（C-6＇）。与文献［10］比较，鉴定该化合物为槲皮素（quercetin）。

化合物4：无色针状结晶，易溶于氯仿。HIESI-MS m/z：413.265 1［M-H］-。1H-NMI（400 MHz，CDC13）δ：0.65（s，H-18）、0.81（s，H-19）、0.82（t，J＝6.3 Hz，H-21）、0.84（d，J＝6.4 Hz，H-26）、0.92（d，J＝6.4 Hz，H-27）、1.03（d，J＝6.7 Hz，H-28）分别为高场区6个甲基信号，1.05～2.36（m）为其他质子信号，5.16 （d，J＝4.4 Hz，H-7）、5.34（m，H-23）为双键上质子信号。结合13C-NMI（100 MHz，CDC13）中的碳信号，并且与β-谷甾醇对照品TLC上的I f值相同。与文献［11］比较，鉴定该化合物为β-谷甾醇（β-Sitostero1）。

化合物5：淡黄色无定型粉末，易溶于甲醇。HI-MS m/z：449.101 4［M＋H］＋，分子式C21H20O11，不饱和度为12。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.19（d，J＝2.1 Hz，H-6），6.39（d，J＝2.1 Hz，H-8），8.05（d，J＝8.9 Hz，H-2＇，6＇），6.88 （d，J＝8.9 Hz，H-3＇，5＇），5.25（d，J＝7.7 Hz）为葡萄糖端基质子。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：159.1（C-2），135.5（C-3），179.5（C-4），163.1（C-5），99.9（C-6），166.1（C-7），94.8 （C-8），158.5（C-9），105.7（C-10），122.8（C-1＇），132.3（C-2＇，6），116.1（C-3＇，5＇），161.6（C-4＇），104.0（C-1"），75.8（C-2"），78.1（C-3"），71.4（C-4"），78.4（C-5"），62.6 （C-6"）。与文献［12］比较，鉴定该化合物为山奈酚-3-β-D-葡萄糖苷（kaempfero1-3-β-D-g1ucoside）。

化合物6：淡黄色结晶，mp 238～240℃，易溶于甲醇，盐酸-镁粉反应呈阳性，Mo1ish反应呈阳性。HI-MS m/z：465.102 6［M＋H］＋，分子式C21H20O12，不饱和度为12。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.21（d，J＝2.2 Hz）和6.37（d，J＝2.2 Hz）为黄酮母核A环上的H-8和H-6信号，5.24（d，J＝7.5 Hz）为葡萄糖上的端基氢信号，6.87（d，J＝8.5 Hz，H-5＇）、7.57（dd，J＝2.3，8.5 Hz，H-6＇）和7.71（d，J＝2.3 Hz，H-2＇）处信号组成ABX耦合系统，说明苯环具有1、3、4位基团取代的结构片段。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：159.1（C-2），135.4（C-3），179.4（C-4），163.2（C-5），99.7（C-6），166.1 （C-7），94.5（C-8），158.4（C-9），105.6（C-10），123.2（C-1＇），117.4（C-2＇），145.8（C-3＇），149.6（C-4＇），116.1（C-5＇），123.2（C-6＇），104.1（C-1"），78.5（C-2"），78.3（C-3"），75.5（C-4"），71.3（C-5"），62.4（C-6"）。与文献［13］比较，鉴定该化合物为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（quercetin-3-O-β-D-g1ucoside）。

化合物7：淡黄色无定型粉末。HI-ESI-MS m/z：595.162 1［M＋H］＋，分子式C27H30O15，不饱和度为13。1H-NMI（400 MHz，CD3OD）δ：6.21 （d，J＝2.1 Hz，H-6），6.40（d，J＝2.1 Hz，H-8），8.06（d，J＝8.9 Hz，H-2＇，6＇），6.88（d，J＝8.9 Hz，H-3＇，5＇），5.12（d，J＝7.5 Hz，H-1＇）为葡萄糖端基质子信号，4.50（brs，H-1"）为鼠李糖端基质子信号，3.15～3.68为糖上其他质子信号。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：149.4（C-2），135.5（C-3），179.4（C-4），161.5（C-5），100.0（C-6），166.2（C-7），94.9（C-8），157.8 （C-9），105.1（C-10），122.8（C-1＇），132.4（C-2＇，6＇），122.8（C-3＇，5＇），158.6（C-4＇），105.6 和102.4分别为葡萄糖和鼠李糖端基碳信号，17.9～78.2为糖上其他碳信号。与文献［14］比较，鉴定该化合物为f1avano1g1ycoside。

化合物8：淡黄色粉末，Mo1ish反应呈阳性。HI-ESI-MS m/z：611.155 9［M＋H］＋，分子式C27H30O16，不饱和度为13。1H-NMI（400 MHz，CD3OD）δ：6.19（d，J＝2.1 Hz，H-6），6.38（d，J＝2.1 Hz，H-8），7.53（d，J＝2.2 Hz，H-2＇），6.83（d，J＝8.4 Hz，H-5＇），7.55（dd，J＝8.4，2.2 Hz，H-6＇），5.34（d，J＝7.5 Hz，H-1＇）为葡萄糖端基质子信号，4.38（brs，H-1"）为鼠李糖端基质子信号，3.04～3.72为糖上其他质子信号。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：148.4（C-2），133.2（C-3），177.3（C-4），161.2（C-5），100.7 （C-6），164.1（C-7），93.5（C-8），158.1（C-9），105.7（C-10），121.5（C-1＇），115.2（C-2＇），144.7（C-3＇），144.6（C-4＇），116.2（C-5＇），121.5（C-6＇），103.9和101.1分别为葡萄糖和鼠李糖端基碳信号，17.7～76.4为糖上其他碳信号。与文献［15］比较，鉴定该化合物为芦丁（rutin）。

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Chem ical constituents from Ledum palustre L.

ZHANG Hong-cai1， WANG Yu1， HUO Yan2， LIU Shu-min3 *

（I.Research Instituteof Traditional ChineseMedicine，HeilongJiang University of ChineseMedicine，Harbin I5OO4O，China；2.The Fifth Hospital of Harbin，Harbin I5OO4O，China；3.Drug Safety Evaluation Center，HeilongJiang University of ChineseMedicine，Harbin I5OO4O，China）

ABSTRACT：AIM To study the chemica1constituents from Ledum palustre L.METH0DS The n-butano1extract of Ledum palustre L.was iso1ated and purified by si1ica，ODS，HPLC co1umn and recrysta11ization.Then the structures of obtained compoundswere identified by physicochemica1 properties and spectrum data.RESULTS Eight compoundswere iso1ated and identified as fraxin（1），6-methy1coumarin-7-β-D-g1ucoside（2），quercetin （3），β-sitostero1（4），kaempfero1-3-β-D-g1ucoside（5），quercetin-3-O-β-D-g1ucoside（6），f1avano1 g1ycoside （7），rutin（8）.C0NCLUSI0N Compounds 1，2 and 7 are iso1ated from this p1ant for the first time.

作者简介：张洪财（1983—），男，硕士，助理研究员，研究方向为中药化学。Te1：13144506710，E-mai1：zhanghongcai-237@163.com*通信作者：刘树民（1963—），男，教授，博士生导师，研究方向为中药药效物质基础。E-mai1：1sm@h1jum.net

基金项目：黑龙江中医药大学校科研基金资助项目（201210）

收稿日期：2015-04-20

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.023

中图分类号：I 284.1

文献标志码：A

文章编号：1001-1528（2016）03-0587-04