标本类型对电化学发光法检测心脏标志物结果影响初探

段业芬

(四川省宜宾市第四人民医院检验科，四川宜宾 644000)



标本类型对电化学发光法检测心脏标志物结果影响初探

段业芬

(四川省宜宾市第四人民医院检验科，四川宜宾 644000)

摘要:目的探讨不同抗凝剂对电化学发光法检测心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌红蛋白(Myo)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)质量(CK-MBmass)、氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)的影响。方法采用罗氏cobas e411电化学发光免疫分析仪分别检测29例住院患者血清、乙二胺四乙酸二钾盐(EDTA-K2)抗凝血浆及肝素锂抗凝血浆cTnT、Myo、CK-MBmass及NT-proBNP水平，利用统计学方法比较各组心脏标志物差异。结果肝素抗凝组与血清组4项结果差异均无统计学意义(t分别为-1.975、0.043、0.706、1.097，P>0.05)。EDTA-K2抗凝组与血清组cTnT结果差异无统计学意义(t值分别为-1.208，P>0.05)，Myo、CK-MBmass及NT-proBNP结果差异有统计学意义(t值分别为2.831、3.920、6.293，P<0.05)。结论肝素锂抗凝血浆与无抗凝剂血清检测心脏标志物结果差别无临床意义，能够缩短心脏标志物测定的样品周转时间(TAT)，是急诊心脏标志物检测的首选。

关键词:抗凝剂；电化学发光法；肌钙蛋白T；肌红蛋白；肌酸激酶同工酶MB型；氨基末端B型钠尿肽原

心血管疾病是中国城市人群的常见疾病和死亡原因之一，而心脏标志物的检测是心血管疾病早期诊断和鉴别诊断的重要辅助手段之一。有研究结果表明，从起病到正确干预的时间与并发症、生存率直接相关。例如急性心肌梗死(AMI)发病后1 h内得到治疗，死亡率约为1%；若6 h后才得到救治，死亡率将达到10%～12%[1]。这就要求临床实验室迅速向临床发出报告，从而提高诊断效率。缩短检测周转时间便成了实验室工作者研究的重点。临床工作中，一般推荐使用血清标本检测心脏标志物水平，但血清标本的标本前处理时间较长，不利于报告的迅速发出。使用血浆能有效缩短标本预处理时间，但能否替代血清进行心脏标志物检测尚需进行研究，国内外虽有抗凝剂对心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌红蛋白(Myo)检测影响的报道[2-8]，但各家结论不一致。对此，笔者检测了29份血清、乙二胺四乙酸二钾盐(EDTA-K2)抗凝血浆及肝素锂抗凝血浆标本，比较各组心脏标志物含量，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料选择宜宾市第四人民医院住院患者共29例，其中男20例，女9例，年龄28～80岁。所选患者心脏标志物浓度涵盖低中高水平。

1.2仪器与主要试剂罗氏cobas e411电化学发光免疫分析仪及配套cTnT、Myo、肌酸激酶同工酶(CK-MB)质量(CK-MBmass)及氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)原装试剂、校准品、质控物。严格按照标准操作规程进行操作。真空采血管为成都普什医药塑料包装有限公司提供紫头管(内含EDTA-K2，批号1403016A)，绿头管(内含肝素锂，批号1401023A)，红头管(无添加剂，批号1312018C)。

1.3方法收集受试者静脉血6 mL，分别注入含EDTA-K2抗凝剂(EDTA组)、肝素锂抗凝剂(肝素组)及无添加剂(血清组)的真空采血管中，每管约2 mL。抗凝标本混匀后2 260×g离心5 min分离血浆，无添加剂的标本大约30 min血液凝固、血凝块回缩后，同样离心条件分离血清。立即上机测定cTnT、Myo、CK-MBmass及NT-proBNP水平。测定标本前先做质控，结果在控，确保仪器性能可靠。所有数据均重复平行测定2次取平均值。

2结果

2.1数据分布经K-S检验，EDTA抗凝组、肝素抗凝组及血清组的cTnT、Myo、CK-MBmass、NT-proBNP数据均为偏态分布(P<0.05)，结果见表1。各组数据取以10为底的对数后转化为正态分布资料(P>0.05)，结果见表2。

2.2EDTA组与血清组心脏标志物结果的比较与血清组比较，EDTA-K2抗凝组cTnT差异无统计学意义(t=-1.208，P=0.237)；Myo、CK-MB mass和NT-proBNP 差异有统计学意义(t值分别为2.831、3.920、6.293，P<0.05)。计算Myo、CK-MB mass和NT-proBNP与血清偏差，CK-MB mass平均偏差为5.69%，最大偏差11.00%，Myo平均偏差为5.48%，最大偏差为9.70%，NT-proBNP平均偏差为5.08%，最大偏差为10.80%，均明显超过罗氏试剂盒提供的日内精密度。

2.3肝素组与血清组心脏标志物结果的比较与血清组比较，肝素组cTnT、Myo、CK-MB mass和NT-proBNP差异均无统计学意义(t值分别为-1.957、0.043、0.706、1.097，P>0.05)。

表1　　cTnT、Myo、CK-MBmass及 NT-proBNP 测定结果[M(P25,P75)]

表2　　cTnT、Myo、CK-MBmass及 NT-proBNP 取对数后结果±s)

*:P<0.05,与血清组比较。

3讨论

肝素抗凝血浆、EDTA抗凝血浆及血清均为罗氏心脏标志物检测试剂盒认可的样品类型，但并未说明三者间检测有无差别。急诊生化项目检测中，EDTA由于其络合钙镁，影响酶活性检测[9]，一般不用于生化项目检测。常使用肝素抗凝血浆或血清作为急诊生化检测标本[10-12]。肝素抗凝血浆(一般选用肝素锂)只需一管血即可进行多项目检测，且能缩短样品周转时间(TAT)，有利于心血管事件快速诊断。

本研究结果显示，肝素抗凝血浆与血清检测心脏标志物结果差异无统计学意义(P>0.05)，可以使用肝素抗凝血浆代替血清进行检测。与国内外多数报道相一致[2-4]，与黄婷等[5]在研究中指出肝素抗凝血浆检测BNP的结果比EDTA抗凝血浆偏高的结论不一致，黄婷等采用的是ADVIA Centaur-XP全自动化学发光仪及其配套试剂，本实验以Roche cobas e411电化学发光免疫分析仪及配套试剂为基础，试剂成分差异可能照成结果的不同。也未出现陈望荣等[6]报道肝素抗凝管检测CK-MB时出现负值的情况[7]，主要在于他们采用的是检测CK-MB活性而非CK-MB的质量，肝素带有负电荷，CK-MB的活性部位中的氨基酸残基容易与带有负电荷的肝素结合失去活性而出现了负值。

本研究也表明EDTA-K2抗凝血浆与血清对电化学发光法检测Myo、CK-MB mass和NT-proBNP结果有较大的差异，而检测cTnT差异小。这与Daves等[2]报道EDTA抗凝血浆可作为血清替代标本检测cTnT的观点一致，与Dupuy等[4]结论不一致，这可能由于采用检测心脏标志物的方法不同造成结论相悖。本实验说明，EDTA-K2抗凝血浆不适合代替血清检测心脏标志物，如实际工作中需要采用EDTA-K2抗凝血浆检测，必须制订其自身的参考区间。

本试验初步探明了肝素抗凝血浆、EDTA抗凝血浆以及血清检测心脏标志物结果的差别，但由于心脏标志物检测所需费用高，本实验选择的样本量偏少，同时抗凝剂量对心脏标志物检测的影响也有待于进一步研究。

综上所述，肝素抗凝标本与EDTA抗凝标本及血清标本相比，能缩短TAT，减少患者抽血数量，另外还可以减少溶血，减少样品放置造成的误差，心脏标志物检测结果与血清差异无临床意义，是急诊心脏标志物检测首选标本类型。

参考文献

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[4]Dupuy AM,Terrier N,Dubois M,et al.Heparin plasma sampling as an alternative to EDTA for BNP determination on the Access-Beckman Coulter--effect of storage at -20 degrees C[J].Clin Lab,2006,52(7/8):393-397.

[5]黄婷，张宝华．抗凝剂类型、标本存放的时间及温度对B型钠尿肽检测的影响[J]．国际检验医学杂志，2013，34(6)：658-659．

[7]胡记妹，杨绿舜，郑定容．三种真空管中CK-MB浓度的检测结果比较[J]．现代医院，2009，9(1)：60-61．

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[9]叶应妩，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程[M]．3版．南京：东南大学出版社，2006：122-123．

[10]杜国有，顾向明．血清与肝素锂抗凝血浆急诊生化项目的结果比较[J]．国际检验医学杂志，2006，27(11)：1050．

[11]胡军红，杨同朝，陆玲，等．不同类型采血管对4种酶活性测定影响的研究[J]．检验医学与临床，2013，10(7)：831-832．

[12]杜丽新，李凤莲，李书清，等．不同抗凝剂对血糖检测结果的影响[J]．山西医药杂志，2013，42(2)：218-219．

·论著·

Primary investigation on effect of different sample types on detection results

of electrochemiluminescence for detecting heart markers

DuanYefen

(DepartmentofClinicalLaboratory,YibinMunicipalFourthPeople′sHospital,Yibin,Sichuan644000,China)

Abstract:ObjectiveTo explore the effect of different anticoagulants on the results of the electrochemiluminescence method for detecting cardiac troponin T(cTnT),myoglobin(Myo),creatine kinase isoenzyme mass (CK-MBmass) and N-terminal pro-type natriuretic peptide (NT-proBNP).Methods The levels of cTnT,Myo,CK-MB mass and NT-proBNP in serum,EDTA-K2anticoagulation plasma and heparin lithium anticoagulation plasma from 29 patients were measured by the Roche cobas e411 electrochemiluminescence immunity analyzer.ResultsThe results of cTnT,CK-MBmass,Myo and NT-proBNP had no statistical differences between the heparin lithium anticoagulation plasma group and the serum group (t=-1.975,0.043,0.706,1.097,P>0.05).The results of cTnT had no statistical difference between the EDTA-K2anticoagulation plasma group and serum group,however the results of CK-MBmass,Myo and NT-proBNP showed statistically significant differences (t=2.831,3.920,6.293,P<0.05).ConclusionThe detection results of heart markers levels have no clinical difference between the heparin lithium anticoagulation plasma and non-anticoagulant serum,which can shorten the turn-around time(TAT) of heart markers detection and is the first choice for emergent heart markers detection.

Key words:anticoagulant;electrochemiluminescence;troponin T;creatine kinase isoenzyme mass;N-terminal pro-type natriuretic peptide

作者简介：何恒兵，男，主管检验技师，主要从事临床生物化学与检验的研究。

收稿日期：(2015-08-08)

文献标识码：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.035A

文章编号：1673-4130(2015)24-3591-03