ELISA检测梅毒抗体导致老年人产生假阳性的分析

朱艳萍 李彦民

（赤峰宝山中医院检验科，内蒙古 赤峰 024070）



ELISA检测梅毒抗体导致老年人产生假阳性的分析

朱艳萍 李彦民

（赤峰宝山中医院检验科，内蒙古 赤峰 024070）

【摘要】目的 讨论使用酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）检测梅毒抗体致老年人产生假阳性结果的原因。方法 采用酶联免疫吸附试验分别检测450例老年人及1912例中青年患者血清中的梅毒特异性抗体，阳性者再使用已被CDC定为确诊方法的梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）诊断试剂进行复检确诊。结果 酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）法检测出的老年组的假阳性率明显高于中青年组，两组间具有显著性差异（P＜0.05）。结论 年龄与疾病因素是造成TP-ELISA法检测老年人梅毒特异性抗体导致假阳性的重要因素。

【关键词】TP-ELISA；老年人；梅毒；假阳性

梅毒是一种以母婴垂直传播以及性传播为主的一种传染性疾病，主要由苍白密螺旋体感染引起。在全球范围内广泛分布，近年来全国发病率不断上升，发病人数高居全球第五位。梅毒的诊断主要依赖病史，临床表现和实验室筛查。而实验室检查的项目包括直接查梅毒螺旋体抗体（暗视野显微镜.直接荧光抗体），血清学检查（查抗体）以及梅毒螺旋体核酸测定。其中血清学检查，特别是TP-ELISA检测因其对IgG以及IgM的检测能力强，灵敏度高，操作方法简便而被二级医院广泛采用。但是，由于梅毒抗体主要是苍白密螺旋体，故此对试剂的纯度要求较高恰恰由于这个因素，导致试剂检测的特异度只能达到99%左右，这就导致了实验室检测阳性而患者并没有临床症状的情况。由于梅毒属于性病范畴，是十分敏感的医学问题和社会问题，错误的报告容易引起家庭纠纷甚至医疗纠纷，为此，笔者从2011年1月至2014年12月对此做了深入调查，结果如下。

1 对象与方法

1.1对象：在本院就诊的所有门诊及住院体检病例，共2362例。其中年龄≥65岁的老年人共450例，对照组即年龄在18～60岁的病例共1912例。

1.2方法及试剂：初检采用酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）。试剂盒由北京万泰生物科技有限公司生产。确诊试验采用梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TP-PA）方法，试剂盒为珠海丽珠试剂股份有限公司生产。

1.3真阳性的判断：酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TP-PA）同时呈阳性反应即为真阳性。

1.4假阳性的判断：酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）阳性而梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TP-PA）阴性，并且2周以后复查结果没有改变的即为假阳性。

1.5仪器的选择：酶标仪选用深圳雷杜生命科学股份有限公司生产的RT-6000，洗板机为深圳雷杜生命科学股份有限公司生产的RT-3000。

1.6统计学方法：用SPSS18.0进行统计分析，采用卡方检验，P＜0.05有统计学差异。

2 结 果

受检的450例老年组患者中酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）阳性者11例，其中假阳性者为9例，假阳性率为81.8%（9/11），平均S/C.O （S代表样品孔的OD值，C.O代表临界值，如样品的S/C.O的计算值≥1则判定为阳性。反之，如果S/C.O的计算值＜1则判定为阴性）值为3084。真阳性两例（均为男性），平均S/C.O值为1080，老年组中假阳性者均无临床症状，也无接触史，只有真阳性的2例患者承认年轻时有过不洁接触史。而中青年组的1912例患者中酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）阳性的是78例，假阳性者为8例，假阳性率是10.3% （8/78），平均S/C.O值为3043，真阳性者均符合梅毒诊断行业标准（WS 273—2007）。这两个参检组的酶联免疫法假阳性率差异非常大，P＜0.01，两个参检组间酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）检测假阳性率的差异具有统计学意义。

3 讨 论

梅毒的确诊临床表现是一方面，更多的也要依赖实验室的报告结果。梅毒螺旋体暗视野检查是最直接的诊断方法，可是这种方法的检出率太低所以临床一般不常用。一般情况下，人体感染梅毒螺旋体后约14 d就能检测出特异性抗体。酶联免疫吸附试验的灵敏度高于梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TP-PA），所以采用2周后复检的方法即可避免早期感染患者因为抗体浓度低而被凝集法TP-PA漏检的情况，并且本次试验假阳性的S/C.O值均较高基本可以排除灵敏度差异而引起的误差［1-2］。然而我们在工作中发现，由于TP-ELISA实验影响因素较多，所以本法存在一定的假阳性，很多老年人TP-ELISA阳性，但临床无症状，主诉无发病史及接触史，且65岁以上的老年人因接触而患病的概率非常小。笔者发现这2例真阳性老年患者的平均S/C.O值为1080，说明老年人可能存在梅毒螺旋体抗体。但是9例假阳性患者中，TP-PA未能检测出梅毒螺旋体抗体，我们认为不能单纯地用TP-PA假阳性来解释，也可能查到的本来就不是梅毒特异性抗体。由于他们没有不洁性生活史、性病史、流产史、抗梅治疗史，而这种差异的出现笔者认为有两种可能：一是有别的物质干扰了ELISA的检测，另一种因素是两种方法的抗原有所不同。而目前的ELISA试剂盒主要是采用双抗原夹心法酶联免疫吸附试验原理，在微孔条上预包被梅毒螺旋体抗体的基因重组抗原，配以酶标记抗原及TMB显色剂等其他试剂，检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体。而TP-PA试剂是由梅毒螺旋体（Nichols株）的精制菌体成分制成，它与血清中的梅毒螺旋体抗体发生凝集反应。实际上老年人易使TP-ELISA检测产生较高的假阳性，是因为随着年龄的增大使其生理功能慢慢退化，从而导致免疫功能异常或患有一系列疾病，如系统性红斑狼疮、丙型肝炎、冠心病等，疾病的因素使机体诱导产生并释放某些交叉抗原，从而干扰了实验结果。老年人也是恶性肿瘤，糖尿病，肝硬化，风湿性疾病等自身免疫疾病的高发人群，这些疾病也能让老年人体内产生一些治疗性抗体及免疫性蛋白等，这些特殊成分在酶联免疫吸附试验检测反应中具有一定的吸附作用，使试验发生显色反应，从而产生假阳性结果。

中图分类号：R759.1；R446

文献标识码：B

文章编号：1671-8194（2016）04-0090-02