清肝降浊颗粒对酒精合并高脂饮食性脂肪肝大鼠的治疗作用

丁云录　成光宇　欧喜燕　李晓兵　李驰坤　陈声武

(长春中医药大学附属医院，吉林　长春　130021)



清肝降浊颗粒对酒精合并高脂饮食性脂肪肝大鼠的治疗作用

丁云录成光宇欧喜燕李晓兵李驰坤陈声武

(长春中医药大学附属医院，吉林长春130021)

摘要〔〕目的研究清肝降浊颗粒对酒精与高脂饲料联合诱导的大鼠脂肪肝是否具有治疗作用。方法采用灌服56%乙醇同时饲喂高脂饲料的方法，诱导建立复合因素导致的脂肪肝大鼠模型。给药4 w后，检测与酒精性脂肪肝密切相关的各项指标。血液生化学指标检测：天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性，丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性；血清及肝组织中总胆固醇(TC)含量,甘油三酯(TG)含量；肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性，丙二醛(MDA)含量；肝脏、脾脏、胸腺及肾上腺脏器系数。结果清肝降浊颗粒对脂肪肝动物血清AST、ALT、TC和TG水平的异常升高均具有明显的降低作用(P<0.01或P<0.05)；可以升高脂肪肝动物肝组织中SOD活性，降低TC、TG和MDA含量及肝脏系数(P<0.01或P<0.05)。结论清肝降浊颗粒具有保肝降酶、抑制脂质过氧化反应、降低血脂肝脂含量，从而达到治疗复合因素所致脂肪肝的作用。

关键词〔〕清肝降浊胶囊；脂肪肝

第一作者：丁云录(1979-)，男，助理研究员，主要从事中药、天然药物的药理活性研究。

目前脂肪肝及其相关疾病的发病率呈上升趋势。清肝降浊方是以五味子、刺五加等10几味药材为基源，对痰证、虚损、胸痹等均有较好疗效。降浊颗粒是新型中药制剂。本研究旨在证实其对复合因素所致脂肪肝模型大鼠的保肝降酶、抑制脂质过氧化反应、降低血脂肝脂含量的作用。

1材料与方法

1.1实验材料清洁级雄性Wistar大白鼠，体重(200±20)g。动物合格证号：SCXK-(吉)2011-0004，购于长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。(1)药品：清肝降浊颗粒，批号：20140310，由长春中医药大学实验研究中心提供。无水乙醇，分析纯，500 ml/瓶，批号：20131225，北京化工厂产品；天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒，10 ml×10支，批号：140226；丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒，10 ml×10支，批号：140303；总胆固醇(TC)检测试剂盒，10 ml×10支，批号：140225；甘油三酯(TG)检测试剂盒，10 ml×10支，批号：140430；均为中生北控生物科技股份有限公司产品。蛋白质(Pr)测试盒，100T/盒，批号：20140427、超氧化物歧化酶(SOD)测试盒，规格：100T/盒，批号：20140330；丙二醛(MDA)测试盒，100T/盒，批号：20140403；均为南京建成生物工程研究所产品。(2)仪器：酶标仪，型号：BIO680，Japan BIO RAD公司产品。Junior全自动分析仪，型号：selectra junior，荷兰威图公司产品。可调高速匀浆器，型号：FSH-2，江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司。电热恒温水浴锅，型号：HH·SY21-Ni，北京长源试验设备厂产品。台式高速冷冻离心机，型号： Biofuge Stratos，德国贺利氏公司产品。

1.2方法

1.2.1动物造模与分组〔1～3〕试验大鼠60只，随机分为正常对照组；脂肪肝模型组；清肝降浊颗粒设800、400、200 mg/kg 3个给药剂量组，每组12只。动物模型制备，正常对照组给予标准饲料饲养；其余各组均高脂饲料(82.3%标准饲料+15%猪油+2%胆固醇+0.2%丙硫氧嘧啶+0.5%胆酸钠)饲养；饲喂高脂饲料的同时，每日9∶00灌胃给予56%乙醇1次，10 ml·kg-1·d-1，连续4 w。正常对照组大鼠灌胃给予等热量的56%葡萄糖。受试药物用蒸馏水配制成混悬液，每日13∶00灌胃给予1次；正常对照组与模型组大鼠灌胃给予等量的蒸馏水，灌胃体积为10 ml·kg-1·d-1。试验过程中大鼠自由摄食饮水，称量体重1次/w，以调整给药剂量。于给药第4周末处死动物。

1.2.2标本采集及观测指标①肝功血液生化学检测指标：给药周期结束，腹主动脉取血，分离血清，检测血清中AST、ALT；②血脂含量检测指标：血清中TC、TG；③肝脏组织中检测指标：定量剪取肝组织制备肝组织匀浆，检测肝组织中TC、TG、MDA含量和SOD活性；④脏器系数：给药周期结束，摘取肝脏、脾脏、胸腺、肾上腺，称重，计算脏器系数。

2结果

2.1对转氨酶活性及血脂的影响经复合因素造成脂肪肝后，模型组动物血清ALT、AST、TC、TG水平均较正常对照组明显升高(P<0.05或P<0.01)，表明脂肪肝模型已经形成。清肝降浊颗粒3个给药组动物血清ALT、AST活性、TC、TG水平均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)。见表1。

2.2对大鼠肝组织中SOD活力、MDA含量及肝脂的影响清肝降浊颗粒800 mg/kg和400 mg/kg给药组动物血清SOD活力较模型组显著升高(P<0.01，P<0.05)；而且，清肝降浊颗粒3个给药组动物血清MDA、TC、TG水平也明显低于模型组(P<0.01或P<0.05)。见表2。

2.3对脏器系数的影响脂肪肝形成后，模型组肝脏系数比正常对照组明显增大(P<0.05)；脾脏系数、胸腺系数与正常对照组比较有降低趋势，但无统计学意义(P>0.05)。清肝降浊颗粒800 mg/kg给药剂量能明显降低酒精性脂肪肝模型大鼠的肝脏指数，与模型组比较差异显著(P<0.05)。见表3。

表1　清肝降浊颗粒给药4 w对脂肪肝大鼠血清TC、

与模型组比较：1)P<0.05；2)P<0.01，下表同

表2　清肝降浊颗粒给药4 w对脂肪肝大鼠肝组织TC、TG、

表3　清肝降浊颗粒给药4 w对脂肪肝大鼠肝脏、脾脏、

与模型组比较：1)P<0.05

3讨论

转氨酶作为反映肝脏损伤的灵敏指标，其活性值升高，在一定程度上反映了肝细胞损伤、坏死、痰凝的病理改变程度。本试验结果说明清肝降浊颗粒对肝细胞具有良好的保护作用。除ALT和AST外，自由基和脂质过氧化在肝损伤中起着十分重要的作用〔4〕。肝脏炎症损伤时，肝内微循环障碍，超氧阴离子自由基产生增多，导致肝细胞膜脂质过氧化，脂质过氧化最终产物是MDA，其含量反映了组织过氧化的损伤程度〔5，6〕。自由基产生过多或清除过慢，体内的动态平衡将被破坏〔7〕。SOD作为抗氧化酶系统主要物质之一，对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用。SOD能特异地清除生物氧化产生的氧自由基，对细胞起到保护作用〔8〕。本实验结果表明，清肝降浊颗粒可提高肝损伤模型动物血清SOD酶活力，降低体内MDA含量，抑制肝损伤时肝细胞的脂质过氧化反应，从而发挥保护肝细胞免受损伤的作用。

脂肪肝蓄积脂肪以TG为主，与肝内脂酸合成增加或降解减少，脂酸酯化成TG作用增强，肝脏合成的载脂蛋白进入血液的量减少，速度减慢有关，脂酸酯化为TG作用增强是导致脂肪肝的重要原因〔9〕。本实验结果表明清肝降浊颗粒可以降低脂肪肝模型大鼠血脂含量及肝脏脂类含量的升高，具有抑制肝脏脂肪堆积的作用。

本实验说明清肝降浊颗粒具有多种机制，可以发挥其多靶点、多成分协同作用的特点。其主要机制可能是通过保护肝细胞，增强肝脏对脂质的清除能力而达到作用，对防治复合因素所致的脂肪肝显示出了好的应用前景。

参考文献4

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6Nagoev BS.Abidov MT,Ivanova MR.LPO and free-radi-cal oxidation parameters in patients with acute viral hepatitis〔J〕.Bull Exp Biol Med,2002;134(6)：557-8.

7Liu CF,Lin CH,Lin CC,etal.Antioxidative natural product protect against econazole-induced liver injuries〔J〕.Toxicology，2004;196(1-2)：87-93.

8Broide E,Klinowski E,Koukoulis G,etal.Superoxide dismutase activity in children with chronic liver diseases〔J〕.Hepatology,2000;32(2)：188-92.

9黄顺玲，谢晃君，文体端，等.抗脂肪肝冲剂对大鼠乙醇性脂肪肝防治的实验研究〔J〕.中西医结合脂肪肝杂志，2001;11(6)：343-4.

〔2015-04-07修回〕

(编辑曲莉/滕欣航)

通讯作者：成光宇(1971-)，男，副主任药师，主要从事中药方剂、天然药物的药理学实验研究。

基金项目：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目〔吉教科合字(2013)第102号〕

中图分类号〔〕R285.5〔

文献标识码〕A〔

文章编号〕1005-9202(2015)21-6052-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.21.020