夫西地酸对寻常痤疮患者皮损表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抗菌作用研究

高诗燕 路永红 陈涛 王珊珊 何丽莎 单雨婷 周培媚 瓦庆彪 吴波 李林 陈前明 保勇 尹亚菲 陆玲

610017 成都市第二人民医院 遵义医学院附属成都医院皮肤科（高诗燕、路永红、陈涛、王珊珊、何丽莎、单雨婷、周培媚、瓦庆彪、吴波、李林、陈前明），检验科（保勇、尹亚菲、陆玲）

夫西地酸对寻常痤疮患者皮损表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抗菌作用研究

高诗燕 路永红 陈涛 王珊珊 何丽莎 单雨婷 周培媚 瓦庆彪 吴波 李林 陈前明 保勇 尹亚菲 陆玲

610017 成都市第二人民医院 遵义医学院附属成都医院皮肤科（高诗燕、路永红、陈涛、王珊珊、何丽莎、单雨婷、周培媚、瓦庆彪、吴波、李林、陈前明），检验科（保勇、尹亚菲、陆玲）

目的探讨2%夫西地酸乳膏对寻常痤疮皮损中表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抗菌活性。方法用琼脂扩散法作药敏试验，比较夫西地酸和莫匹罗星对表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抗菌活性。结果夫西地酸和莫匹罗星对表皮葡萄球菌的抑菌环直径分别为（31.76±6.05）和（31.98±17.20）mm，差异无统计学意义（t=0.132，P＞0.05），对痤疮丙酸杆菌的抑菌环直径分别为（18.15±3.24）和（3.00±0.00）mm，差异有统计学意义（t=24.27，P＜0.05）。结论夫西地酸体外对寻常痤疮患者皮损中的优势菌株表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌有较强的抗菌作用。

寻常痤疮；梭链孢酸；痤疮丙酸杆菌；表皮葡萄球菌；微生物敏感性试验

夫西地酸乳膏是一种治疗皮肤感染药物。研究显示，夫西地酸对引起皮肤感染的革兰阳性球菌尤其葡萄球菌高度敏感，对耐甲氧西林葡萄球菌有较强的抗菌活性，对革兰阳性厌氧菌、百日咳杆菌、奈瑟菌、大部分脆弱拟杆菌和某些梭状芽孢杆菌敏感，对链球菌、肠球菌及革兰阴性菌中度敏感［1⁃3］。我们探讨夫西地酸乳膏对寻常痤疮皮损中的优势菌种（表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌）的体外抗菌活性，为治疗痤疮合理选择抗生素提供一定的依据。

一、材料与方法

1.实验菌株：表皮葡萄球菌标准菌株（ATCC1228标准菌株）和痤疮丙酸杆菌标准菌株（ATCC6919标准菌株）由卫生部药品和生物制品检定所提供。表皮葡萄球菌菌株（103株）和痤疮丙酸杆菌菌株（60株）分离自67例寻常痤疮患者（男28例，女39例）皮损内容物。夫西地酸乳膏（香港澳美制药厂有限公司）：批号1306544，规格：10 g∶0.2 g；莫匹罗星软膏（中美天津史克制药有限公司）：批号12020744，规格：5 g∶0.1 g。

2.方法：将表皮葡萄球菌调节菌悬液浊度至0.5麦氏比浊度（McFarland），痤疮丙酸杆菌调节菌悬液浊度至1.0麦氏比浊度，制备悬液时平板在有氧环境中不应超过30 min。

表皮葡萄球菌培养基：将MH琼脂高压灭菌后冷却至45℃，与已配好的表皮葡萄球菌菌悬液混合（培养基液20 ml内加菌悬液2 ml），充分混匀后倒入直径为90 mm的无菌培养皿中制成含菌培养基，无菌间自然晾干。

痤疮丙酸杆菌培养基：将强化布氏琼脂（1 000 ml蒸馏水中加入布氏琼脂粉末43 g、氯化血红素贮存液1 ml及维生素K1工作液1 ml）高压灭菌后，冷却至45℃加入灭菌脱纤维羊血50 ml后与已配好的丙酸杆菌菌悬液（培养基液20 ml内加菌悬液2 ml），充分混匀后倒入直径为90 mm的无菌培养皿中制成含菌培养基，无菌间自然晾干。

抑菌实验：用直径3 mm的打孔器在培养基中打两个孔，分别加入夫西地酸乳膏和莫匹罗星软膏，使药膏与孔边缘平齐并充分接触。表皮葡萄球菌置于37℃孵箱中需氧环境培养24 h，痤疮丙酸杆菌置于厌氧环境中培养48 h后，观察各药膏孔周围抑菌环大小并记录其直径，抑菌环直径取最大径和最小径的均数，并拍照。

3.统计学处理：用SPSS17.0软件进行统计分析，采用配对样本t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

二、结果

1.表皮葡萄球菌抑菌环比较：在MH培养基平板上，夫西地酸乳膏和莫匹罗星软膏均对表皮葡萄球菌产生清晰的抑菌环，抑菌环直径分别为（31.76±6.05）mm、（31.98±17.20）mm，差异无统计学意义（t=0.132，P＞0.05）。

2.痤疮丙酸杆菌抑菌环比较：在强化布氏琼脂平板上，夫西地酸乳膏对痤疮丙酸杆菌可见清晰的抑菌环，抑菌环直径均数为（18.15±3.24）mm，而莫匹罗星软膏的抑菌环直径均数为3 mm，与药孔的直径相同，实际无抑菌环。表明莫匹罗星软膏对痤疮丙酸杆菌无明显抗菌活性或抗菌活性很低。两种药物的抑菌环直径比较差异有统计学意义（t=24.27，P＜0.05）。

三、讨论

夫西地酸通过抑制细菌的蛋白质合成而产生抗菌作用，抗革兰阳性菌活性强，对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、梭状芽孢菌属和棒状杆菌非常敏感，也可抗多种厌氧菌［4］。夫西地酸有很强的脂溶性，具备穿透生化屏障的能力。本研究体外抑菌试验结果显示，夫西地酸乳膏对痤疮患者皮损中分离出的表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌均有较好的抑制作用，而莫匹罗星软膏仅对表皮葡萄球菌有抑制作用，对痤疮丙酸杆菌无明显抑制作用。其原因可能是莫匹罗星软膏对需氧革兰阳性球菌有很强的抗菌活性，而对厌氧菌无明显抑制作用，目前尚无相关报道，尚待进一步研究。

［1］Jones RN,Mendes RE,Sader HS,et al.In vitroantimicrobial findings for fusidic acid tested against contemporary（2008⁃2009）gram ⁃positive organisms collected in the United States［J］.Clin Infect Dis,2011,52 Suppl 7:S477⁃S486.DOI:10.1093/cid/cir163.

［2］Sahm DF,Deane J,Pillar CM,et al.In vitroactivity of CEM⁃102（fusidic acid）against prevalent clones and resistant phenotypes of Staphylococcus aureus［J］.Antimicrob Agents Chemother,2013,57（9）:4535⁃4536.DOI:10.1128/AAC.00206⁃13.

［3］McGhee P,Clark C,Credito K,et al.In vitroactivity of fusidic acid（CEM⁃102,sodium fusidate）against Staphylococcus aureus isolates from cystic fibrosis patients and its effect on the activities of tobramycin and amikacin against Pseudomonas aeruginosa and Burkholderia cepacia［J］.Antimicrob Agents Chemother,2011,55（5）:2417⁃2419.DOI:10.1128/AAC.01672⁃10.

［4］刘蔚,蒋献,陈慧莉,等.高强度窄谱蓝光对寻常痤疮表皮分离菌的抗菌作用研究［J］.中华皮肤科杂志,2005,38（11）:683⁃684.DOI:10.3760/j.issn:0412⁃4030.2005.11.009.Liu W,Jiang X,Chen HL,Li L,et al.In vitroeffect of high intensity blue light on bacteria isolated from patients with acne vulgaris［J］.Chin J Dermatol,2005,38（11）:683 ⁃684.DOI:10.3760/j.issn:0412⁃4030.2005.11.009.

In vitroantibacterial activity of fusidic acid cream againstStaphylococcus epipermidisandPropionibacterium acnesisolates from acne vulgaris lesions

Gao Shiyan,Lu Yonghong,Chen Tao,Wang Shanshan,He Lisha,Shan Yuting,Zhou Peimei,Wa Qingbiao,Wu Bo,Li Lin,Chen Qianming,Bao Yong,Yin Yafei,Lu Ling
Department of Dermatology,Chengdu Hospital Affiliated to Zunyi Medical College and Chengdu Second People′s Hospital,Chengdu 610017,China（Gao SY,Lu YH,Chen T,Wang SS,He LS,Shan YT,Zhou PM,Wa QB,Wu B,Li L,Chen QM）;Clinical Laboratory,Chengdu Hospital Affiliated to Zunyi Medical College and Chengdu Second People′s Hospital,Chengdu 610017,China（Bao Y,Yin YF,Lu L）

ObjectiveToinvestigatetheinvitroantibacterialactivityoffusidicacidcreamagainstStaphylococcus epipermidisandPropionibacterium acnesisolates from acne vulgaris lesions.MethodsThe agar diffusion method was used to evaluate the antibacterial activity of fusidic acid cream and mupirocin ointment againstS.epipermidisandP.acnesisolates from acne vulgaris lesionsin vitro.Inhibition zone diameters were measured and compared between the two topical drugs.ResultsA significant difference was observed between the fusidic acid cream and mupirocm ointment in the inhibition zone diameters forP.acnes（18.15±3.24vs.3.00±0.00 mm,t=24.27，P＜ 0.05）,but not in those forS.epidermidis（31.76±6.05vs.31.98±17.20 mm,t=0.132,P＞0.05）.ConclusionFusidic acid cream displays strongin vitroantibacterial activity againstS.epidermidisandP.acnesisolates from acne vulgaris lesions.

Acne vulgaris;Fusidic acid;Propionibacterium acnes;Staphylococcus epidermidis;Microbial sensitivity tests

Lu Yonghong,Email:1255395583@qq.com

2016⁃06⁃07）

（本文编辑：尚淑贤）

路永红，Email：1255395583@qq.com

10.3760/cma.j.issn.0412⁃4030.2016.09.014

成都市卫生局科研课题（2014010）；CAIM⁃澳美中国研究基金（痤疮研究）

Fund programs:Scientific Research Project of Chengdu Municipal Health Bureau（2014010）;CAIM⁃Bright Future of China Research Fund（Acne Research）