“药材-提取物-成分”追踪附子强心作用物质基础

李燕，李芸霞，袁岸，赵梦杰，龚小红，彭成

·综述进展·

“药材-提取物-成分”追踪附子强心作用物质基础

李燕，李芸霞，袁岸，赵梦杰，龚小红，彭成

按照药材-提取物-成分逐层跟踪的思路，分析总结国内外有关附子不同成分的强心作用及其与量-毒-效关系的研究文献，发现附子的强心作用成分主要为水溶性成分，包括去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱、氯化甲基多巴胺等水溶性生物碱及附子苷、尿嘧啶等非生物碱。其强心作用主要通过上述成分增加左心室收缩压（LVSP）和左心室收缩压力上升最大速率（LVdP/dt max）及降低左心室收缩压力下降最大速率（-LVdP/dt max）实现。

附子；成分；强心作用；研究进展

毒性中药保证用药安全的同时，也应对如何充分利用其有效成分、保存其较好的疗效进行深入探索，这也是人类千百年来追求药物使用的目标。截至目前，还没有关于附子不同成分强心作用的全面研究。于此，本文报道如下。

1 附子的强心作用

近代药理研究显示，附子主要通过“药材-提取物-成分”三种形式发挥对心衰大鼠、蛙、狗、猫、兔、豚鼠的明显强心作用。

1.1 药材强心作用研究

生附子、炮附子生药等药材均具有强心作用，炮制后作用可能增强。

王立岩等[3]采用0.1 g．kg-1的生附子、炮附子对股静脉注射戊巴比妥钠造成大鼠急性心力衰竭模型进行十二指肠给药，可明显升高LVSP、LVdP/dt max，有明显强心作用，且生附子、炮附子的作用无明显差别。张云绮[4]采用2 g．mL-1生附子、炮附子的稀释液，按0.0125mL/只对低钙任氏液致心衰的离体心衰蛙心模型给药，两者均可明显增强心肌收缩力，均有一定的时效关系和量效关系，前者在0-10min内或400-600倍稀释时，后者在5-20min内或300-700倍稀释时，具有显著强心作用；且后者的强心作用程度和强心作用范围均大于前者。陈珍等[5]取0.071 g．mL-1生附子、制附子水煎液，按4mL/只对上述离体心衰蛙心模型给药，两者均能使离体蛙心的收缩能力明显增强，两者作用没有明显差异。 秦永刚等[6]采用生附子及蒸制2h、4h、6h、8h、10h、12h的附子按0.25 g．mL-1的浓度对离体蛙心给药，可明显增加振幅增加率，明显增强强心作用，且经过8、10、12h炮制的附子样品可显著增加强心作用，有一定的时效关系；同时，随着蒸制时间的延长，可显著降低心脏毒性。

1.2 提取物强心作用研究

附子中的水提醇沉附子水溶部分、水溶部分、乙醇浸膏等提取物均具有强心作用。

周远鹏等[7]采用7.5 mg．kg-1、15.0 mg．kg-1、30.0 mg．kg-1的水提醇沉附子水溶部分给正常麻醉狗iv，可明显增加左心室收缩压（LVSP）和左心室收缩压力上升最大速率（LVdP/dt max），并分别维持10min、15min以上；且在维持作用时间内显示一定的量效关系。周远鹏等[8]采用30.0 mg．kg-1附子乙醇浸膏、附子水溶部分、附子除钙水溶部分分别给静脉滴注戊巴比妥钠造成猫心力衰竭模型静脉给药，水溶部分可逐渐升高LVSP、LVdP/ dt max，且两者峰值分别恢复到正常水平的75±5%及72±6%，比心衰时增加96±20%及220±83%；除钙水溶部分使LVSP、LVdP/dt max先降后升，前者从心衰时的67±7mmHg先降至56±8mmHg再升至104±10mmHg，即先降低19±6%后升高63±15%，后者从心衰时的531±93mmHg先降至488±90mmHg再升至1075±194mmHg，即先降低7.4±4%后升高121±25%；乙醇浸膏升高心脏功能的作用比水溶部分弱，比除钙水溶部分强，结果也提示钙离子在附子的强心作用中起了部分作用。

1.3 成分强心作用研究

附子的水溶性生物碱类和水溶性非生物碱类成分均具有强心作用。

1.3.1 水溶性生物碱类强心作用 附子中的水溶性生物碱如去甲乌药碱，去甲猪毛菜碱，消旋去甲乌药碱，氯化甲基多巴胺，附子灵、尼奥宁等均具有强心作用。

去甲乌药碱对在兔心、豚鼠心和犬心，在衰竭犬和猫心脏，离体蛙心、离体豚鼠衰竭心脏等，能明显增加心肌收缩力、LVdP/dt max和增加心输出量，明显增加冠脉、脑和外周动脉的血流及减少这些血管的阻力，也会引起心率、氧消耗量增加；其作用与异丙肾上腺的作用相似，对心室乳头肌具α受体阻滞作用，可被心得安阻断；例如，用浓度为1×10-8-5×10-6/ml的去甲乌药碱对离体蟾蜍心脏给药，可使心肌收缩幅度增加22-98%，心输出量增加15-80%；Iv 0.5mg．kg-1可使兔的心收缩力增加51.6%，iv 2μg．kg-1．min-1可使麻醉犬和豚鼠的LVSP分别增加12%、58%，LVdp/dtmax分别增加73%、26%，且作用随浓度的增加而加强[9,10,11]。同时，去甲乌药碱还可直接作用于离体培养的心肌细胞，使之搏动加强[12]。

研究表明，去甲猪毛菜碱( SAL)为弱的β-肾上腺素能兴奋剂，它能兴奋豚鼠离体心房，增加收缩频率[13]。 3×10-6氯化甲基多巴胺可使离体豚鼠右心房的收缩幅度和频率分别增加250%和20%，其与阿托品合用后，作用增强，可使心房的收缩幅度和频率分别增加415%和215%，用兔离体心房的实验作用类似；氯化甲基多巴胺具有nicotine样作用，其升高血压、强心作用和阿托品的加强作用均可被α-肾上腺素能受体阻滞剂酚妥拉敏和神经节阻断剂六烃季胺阻断，表明其是一个α-肾上腺素能受体，也是一个神经节和结前纤维兴奋剂[14]。

一定剂量的消旋去甲乌药碱对蟾蜍离体心脏和家兔在体心脏给药，可明显增加心肌收缩力和心排血量，减轻肺瘀血，可引起下肢血管扩张，明显减轻心脏前后负荷，减少心肌耗氧量，改善左室功能，达到强心的目的[15]。消旋去甲乌药碱活性很好，即使稀释至十亿分之一的浓度，仍然有活性，其作用似异丙肾上腺素样作用，兴奋β-受体，而非强心苷样作用[16]。

采用MTT法，从附子中提取的几种化合物按一定浓度对戊巴比妥钠诱导的原代培养的乳鼠心肌损伤模型给药，结果显示，在体外实验中，几种化合物能显著抑制戊巴比妥钠的诱导作用；在浓度为10μM，1μM，0.1μM时，附子灵、尼奥宁显示活性，有效保护心肌细胞，可明显恢复心肌细胞的跳动节奏，明显增加心肌细胞活力和存活率[17]。

从中国附子(A.Carmichaeli Dexb)中分离出的撑棍碱也有强心作用；采用增高大白鼠的血压活性实验检测附子根部位分离的单体coryneine氯化物（I），结果，I可增加豚鼠离体右心房的收缩率和幅度，有强心作用，经鉴定为多巴胺三甲基化合物[18]。

1.3.2 水溶性非生物碱类强心作用 除水溶性生物碱以外，附子的非水溶性生物碱也被报道有强心作用。

王桂玲等[19]按3μg．mL-1、30μg．mL-1两个浓度对大鼠离体工作心脏给药，低、高浓度分别促进对照组的LVSP从9.87±1.48增至12.48±1.77（增加26.4%），从9.87±1.48增至14.76±1.91（增加49.54%）；LVdP/dt max从707.42±35.73增至748.14±34.57（增加5.76%），从707.42±35.73增至972.98±37.41（增加37.53%）；对-LVdP/dt max作用较弱，分别降低7.33%、13.6%。上述浓度对豚鼠离体工作心脏灌流，可使LVSP、LVdP/dt max分别增加26.44%、33.13%，5.76%、12.0%，-LVdP/dt max分别降低7.32%、13.59%；可使APD50明显升高，且有剂量依赖性，心率不变，显示附子苷能激活心肌细胞的L型钙通道，促进大量心肌外钙离子进入细胞内，促进心肌收缩能的增加，也可能激活心室肌细胞膜上的钠通道，通过钠-钙离子交换而产生正性肌力作用[14,20]。

韩公羽等[21]取5μmol．L-1的尿嘧啶及合成品尿嘧啶对蟾蜍离体心脏给药，结果，尿嘧啶同作对照的合成品尿嘧啶强心作用一致，均在用药后l-2min开始增加心肌收缩幅度，3min后明显增强，且此作用可随时间的增加而增强，维持时间较长，常可持续30min以上。杨帆等[22]报道，尿嘧啶还可明显增加失血性休克大鼠的心收缩力和心输出量，明显增加大鼠的存活率，但不影响心率，其增加心输出的作用强而持久常超过40min ；而对正常动物的上述指标无明显影响。

综上所述，附子提取物、附子水提物、附子醇提物对心衰大鼠、离体蛙心等均具有强心作用[23,24]，相关研究报道附子临床有效剂量范围可能为5.56～44.44 g．d-1，在此剂量范围内附子的功效随剂量增大而增强，且呈线性相关从而验证量效关系的可能性；当效应达到一定高度时并不会随剂量增大而增强，实验动物出现中毒症状，甚至死亡，提示附子大剂量持续增加时疗效并未随之增强，反而产生明显毒性，临床附子具有明显的量-效-毒关系，用药剂量不可无限制增大[25]。

附子对离体心脏、在体心脏及实验性衰竭心脏均有明显的强心作用，其作用于心脏，可促进心肌收缩，提高心率，扩大心搏出量，同时也会增加心肌耗氧量；其药效成分主要为水溶性成分，包括去甲乌药碱等水溶性生物碱类及附子苷、尿嘧啶等非生物碱类，其药效主要通过成分对神经膜蛋白、激素受体作用实现，可减少M受体数量，增加β受体数量，如去甲乌药碱显著的正性肌力作用就是因为其是β受体部分激动剂；对于内分泌和交感神经系统的功能均处于低下的机体，其可使脑中去甲肾上腺素(NA)和多巴胺(DA)的含量回升，而降低5-HT的含量，从而调整机体到平衡状态[26]。同时，在附子的临床应用中应找出既能发挥疗效又能保证安全的剂量平衡点，如果剂量过大则会产生毒性。附子中可能还含有其他强心成分，或许因为含量太少或研究资料欠缺未能进行报道，今后还需在改进提取方法等方面进一步研究。

[1] 巫碧辉,李玉纯,李小芳,等.乌头、附子等微量元素测定及其强心作用的探讨(第一报)[J].微量元素,1988,(4)：19.

[2] 曹航.附子强心胶囊治疗充血性心力衰30例总结[J].湖南中医杂志,2002,18(4)：4.

[3] 王立岩,张大方,曲晓波,等.附子炮制前后有效部位强心作用的实验研究[J].中国中药杂志,2009,34(5)：596.

[4] 张云绮.炮制对附子强心作用的影响[J].黑龙江医药,2011,24(6)：884.

[5] 陈 珍,赵有亮.生附子和制附子对离体蛙心的强心作用[J].科技视界,2013,(36)：390.

[6] 秦永刚,张美荣,张建平,等.不同蒸煮时间对附子强心作用及心脏毒性的影响[J].医学信息,2002,15(10)：618.

[7] 周远鹏,刘文化.附子水溶部分对心血管系统的影响[J].中草药,1983,14(6)：29.

[8] 周远鹏,刘文化.附子对心血管系统作用和毒性的比较[J].中西医结合杂志,1984,4(1)：48.

[9] 周远鹏,范理礼,张丽英,等.附子药理作用研究I.去甲乌药碱对心血管系统的作用[J].中华医学杂志,1978,13(11)：664.

[10] 刘文化,周远鹏,曾贵云.去甲乌药碱对实验性心力衰竭的治疗作用[J].药学学报,1988,23(2)：81.

[11] 周远鹏,江京莉. 附子的研究V.附子的强心有效成分之一-去甲乌药碱的实验及临床研究概况[J]. 中药药理与临床,1992,8(3)：43.

[12] 韩慧婉,王家珍,孙福立,等.去甲乌药碱对培养心肌细胞B-肾上腺素受体的作用[J].药学通报,1980,15(10)：41.

[13] 周远鹏.附子及其主要成分的药理作用和毒性[J].药学学报,1983,18(5)：394.

[14] 周远鹏.作用于心血管系统的水溶性活性成分研究回顾和评价[J].中药药理与临床,2011,27(6)：106.

[15] 王浴生.中药药理与应用[M].北京：人民卫生出版社,1983,63.

[16] 吕兰薰.强心中药的研究动态[J].陕西中医,1988,9(3)：128.

[17] Xiong L, Peng C, Xie XF, et al. Alkaloids Isolated from the Lateral Root of Aconitum carmichaelii[J]. Molecules,2012,17：9939.

[18] Konno C,Shiruasaka M, Hikino H. Caedio active principle of Aconitum carmichae roots[J].Planta Medica,1979,35：150.

[19] 王桂玲,徐雅娟,房建强.附子非生物碱成分的研究[J].泰山医学院学报,2007,28(3)：179.

[20] 徐东铭,徐雅娟,杨世杰,等.附子苷及同系物,其制备方法和以该化合物为活性成分的药物组合物 发明专利申请公开说明书,2004年 申请号02133091.3；公开号CN 1488636A.

[21] 韩公羽,梁华清,廖耀中,等.四川江油附子新的强心成分[J].第二军医大学学报,1991,12(l)：10.

[22] 杨 帆,林树新,张福琴,等.四川江油附子提取物抗失血性休克的作用[J].第四军医大学学报,1996,(2)：116.

[23] 王 懿.基于心脏靶器官的附子效-毒关联评价[D].济南：山东中医药大学,2014.

[24] 刘甜甜.基于“有故无损”思想的附子量-效-毒关系研究[D].成都：成都中医药大学,2014.

[25] 范丽丽,郑作文,杨柯,等.毒性中药附子量效关系的实验研究[J].四川中医,2011,29(5)：53.

[26] 丁涛.附子的现代药理研究与临床新用[J].中医学报,2012,27(175)：1630.

(责任编辑：何瑶)

Exploration of the material basis for cardiotonic effect of Fuzi under the guidance “Herb- Extract-Ingredient”

/LI Yan, LI Yun-xia, YUAN An, ZHAO Meng-jie, GONG Xiao-hong, PENG Cheng//( School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

In accordance with the guidance of “Herb-Extract-Ingredients” , literatures related to the cardiotonic effect of different components in Fuzi and dose-toxicity-effect relationship of Fuzi at home and abroad were analyzed and summarized in the study. The cardiotonic effect was mainly caused by water-soluble components in Fuzi, including water-soluble alkaloids such as higenamine, salsolinol, methyl chloride, and non-alkaloids such as fuzinoside and uracil, and so on. The left ventricular systolic pressure (LVSP) and maximal rate of the increase of left ventricular pressure (LVdP/dt max) were increased, and the maximal rate of the decrease of left ventricular pressure (-LVdP/dt max) was reduced by the above ingredients to achieve the cardiotonic effect.

Fuzi ; ingredients; cardiotonic effect; research progress

R285.5

A

1674-926X(2016)05-016-03

国家自然科学基金（81573583, 81373943）, 四川省科技厅青年基金（2013JQ0018）

成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室，中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

李燕，女，研究生在读，主要从事中药物质基础以及药动学方向研究

Email：993603736@qq.com

彭成，男，博士生导师，研究员，主要从事疾病动物模型与中药复方研究

Email： pengchengchengdu@126.com

李芸霞， 女，博士生导师，研究员，主要从事药效物质基础研究 Email：lyxcdutcm@126.com

2015-10-13