冠心苏合咀嚼片中冰片含量测定方法研究

冠心苏合咀嚼片中冰片含量测定方法研究

马千华

(黑龙江珍宝岛药业股份有限公司，黑龙江 虎林158400)

摘要：目的：建立冠心苏合咀嚼片中冰片——龙脑、异龙脑的含量测定方法。方法：采用GC法，聚乙二醇(PEG-20M)为固定相，涂布浓度为10%；柱温140℃。理论板数按正十五烷峰计算应不低于1200。结果：龙脑、异龙脑在0.68～3.494mg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9999)，平均加样回收率99.72%(RSD=0.6%，n=6)。结论：本法灵敏、准确、重现性好、精密度高、专属性强。可用于冠心苏合咀嚼片的质量控制。

关键词：冠心苏合咀嚼片；龙脑;异龙脑；GC

作者简介：马千华，黑龙江珍宝岛药业股份有限公司。

文章编号：1672-6758(2015)01-0150-4

中图分类号：R917

文献标识码：A

Abstract：The goal is to establish the determination method of borneol and isoborneol in Guanxin suhe chewable Tablets .And the determination was carried out by GC with polyethylene glycol(PEG-20M)as the stationary phase，coating concentration was 10%；Column temperature was 140℃. Theoretical plate number calculated on pentadecane peak should be not less than 1200. Borneol and isoborneol showed a good linear relationship at the range of0.68～3.494μg(r=0.9999),The average recovery was99.72%,(RSD=0.6%，n=6). The conclusion is that method adopted is insensitive, accurate, reproducible, high precision, specificity and can be used for quality control of Guanxin suhe chewable Tablets.

冠心苏合咀嚼片为局颁标准，依据《中国药典》2010年版附录VI E中的要求，并参照中国药典2010年版一部《冠心苏合丸》中冰片的含量测定方法改进了本品冰片含量测定方法，将原来只测冰片中龙脑的含量改为以龙脑、异龙脑峰面积和来计算冰片含量，并对此方法进行了方法学考察，从而使检测指标更科学合理。

1含量测定方法

冰片照气相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI E)测定。

色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇(PEG-20M)为固定相，涂布浓度为10%；HP-5弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，柱温140℃，FID检测器。理论板数按正十五烷峰计算应不低于1200。

校正因子测定取正十五烷适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含7mg的溶液，作为内标溶液。另取冰片对照品10mg精密称定，置5ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加乙酸乙酯至刻度，摇匀，吸取1ul，注入气相色谱仪，测定，计算校正因子。

测定法取本品10片，精密称定，研细，取适量(约相当于冰片12mg)，精密称定，置具塞试管中，精密加入内标溶液1ml与乙酸乙酯4ml，密塞，振摇使冰片溶解，滤过，吸取续滤液1ul，注入气相色谱仪，测定，以龙脑、异龙脑峰面积之和计算，即得。

本品每片含冰片(C10H18O)应为80.0～120.0mg。

2方法学考察

2.1色谱条件与仪器试剂。

2.1.1色谱条件。

固定液：填充柱，以聚乙二醇(PEG-20M)为固定相，涂布浓度为10%；HP-5弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，柱温140℃，FID检测器。

2.1.2仪器。

气相色谱仪：Agilent 6820。

2.1.3试剂试药。

冰片对照品，购于中国药品生物制品检定所，批号：110743-200504；正十五烷对照品，购于中国药品生物制品检定所，批号：111677-200401；冠心苏合咀嚼片，哈尔滨一洲制药有限公司生产。

2.2试验溶液的制备。

2.2.1内标溶液。

参照冠心苏合丸中冰片测定方法，确定为取正十五烷适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含7mg的溶液，作为内标溶液。

2.2.2冰片对照品溶液。

参照冠心苏合丸中冰片测定方法，确定为取冰片对照品10mg，精密称定，置5ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加乙酸乙酯至刻度，摇匀，即得。

2.2.3供试品溶液。

参照冠心苏合丸中冰片测定方法，初步确定为取本品10片，精密称定，研细，取适量(约相当于冰片12mg)，精密称定，置具塞试管中，精密加入内标溶液1ml与乙酸乙酯4ml，密塞，振摇使冰片溶解，滤过，取续滤液即得。

2.3专属性考察。

按本品处方工艺制备不含冰片的阴性样品，按2.3项下制备阴性对照液。分别精密吸取内标溶液、冰片对照品溶液、供试品溶液与阴性对照液各1μl，注入气相色谱仪(见色谱图1-图4)。

从色谱图中可见，内标峰与冰片峰相距适中，分离度好，冰片中龙脑与异龙脑色谱峰分离亦良好，且阴性样品在冰片峰保留时间处无色谱峰，表明阴性无干扰，此方法专属性好。

2.4 线性试验。

分别精密称取冰片对照品3.40mg、6.68mg、10.05mg、13.17mg、17.47mg，置5 ml量瓶中，加入内标溶液1ml，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得各浓度对照液。分别吸取1ul注入气相色谱仪,记录峰面积，以CR/CS-AR/AS求回归方程，计算相关系数，结果见表1。

CR为冰片对照品含量，CS为内标物的含量，AR为冰片峰面积，AS为内标峰面积，相关系数：r=0.9999，线性方程为y=0.854922x-0.04316。

表1　冰片的线性试验

结果表明冰片在0.68~3.494mg/ml范围内呈良好的线性关系。标准曲线图见下图：

2.5样品供试液制备方法考察。

参照冠心苏合丸中冰片测定方法，选择乙酸乙酯直接溶解提取样品，同时比较了超声提取的方法，具体如下：

(1)直接溶解：取本品10片，精密称定，研细，取适量(约相当于冰片12mg)，精密称定，置具塞试管中，精密加入内标溶液1ml与乙酸乙酯4ml，密塞，振摇使冰片溶解，滤过，取续滤液即得。

(2)超声提取5分钟：精密称取上述研细的粉末适量(约相当于冰片12mg)，置具塞试管中，精密加入内标溶液1ml与乙酸乙酯4ml，密塞，称定重量，超声5分钟，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。

(3)超声提取10分钟：精密称取上述研细的粉末适量(约相当于冰片12mg)，置具塞试管中，精密加入内标溶液1ml与乙酸乙酯4ml，密塞，称定重量，超声10分钟，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。

(4)测定：分别吸取上述溶液各1ul注入气相色谱仪,记录峰面积，计算冰片的含量，结果见下表。

表2　样品提取方法考察结果

结果：三种提取方式结果基本一致，所以选择简单省时的直接提取方法。

2.6重复性试验。

取同一批样品(110201)按2.2.3项供试品溶液制备方法制备6份样品溶液，测定峰面积，计算冰片的含量，结果见表3。

表3　重复性试验

结果：测定6份样品的RSD为 0.5% ，此方法重复性好。

2.7回收率试验。

取同一批(110201)已知含量的样品(冰片含量108.24mg/g)6份，每份取正常取样量的一半，精密称定，分别精密加入冰片对照品6mg，按2.2.3项供试品溶液制备方法制备6份样品溶液，摇匀，滤过，取续滤液，分别注入气相色谱仪测定含量，结果见表4。

表4　冰片回收率试验测定结果

结果：此方法回收率好，说明准确度良好。

2.8溶液稳定性试验。

取供试品(110201)溶液，分别在放置0小时、2小时、4小时、6小时、8小时后，注入气相色谱仪，记录峰面积。结果见表5。

表5　溶液稳定性试验

结果：供试品溶液室温放置8小时，冰片峰面积与内标物峰面积的比值无显著变化，表明供试品溶液在8小时内性质稳定。

2.9中间精密度试验。

取同一样品，由不同分析人员在不同时间按样品含量测定方法进行测定；测定结果见表6。

结论：此方法的中间精密度良好。

2.10 样品含量限度的确定。

表6　中间精密度试验

按照以上方法测定6批成品中冰片的含量，并以其为依据制定含量限度。结果见表7。

结果测定6批样品冰片的含量均在80.0～120.0mg/片范围内，并参考冠心苏合丸中冰片的含量限度，所以暂定本品每片含冰片(C10H18O)应为80.0～120.0mg。

3结论

通过以上冰片含量测定方法学试验，可以证明此法专属性强，准确度高，重复性好，中间精密度好，耐用性强，线性试验显示冰片在0.68～3.494mg/ml范围内呈良好的线性关系，所以此法可准确有效测定冠心苏合咀嚼片中冰片的含量，从而更科学合理地控制产品质量。

参考文献

[1]中国药典[S].中国医药科技出版社，2010.

Study of Guanxinsuhe Chewing Borneol Contents Determination Method

Ma Qianhua

(Heilongjiang Chenpao Island Pharmaceutical Company Ltd, Hulin, Heilongjiang 158400，China)

Key words：Guanxin suhe chewable Tablets; borneol; isoborneol; GC

Class No.:R917Document Mark：A

(责任编辑：宋瑞斌)