浅论对广藿香挥发性成分进行气相色谱-质谱分析的结果

吴红旗 徐 蓉 秦昆明 金俊杰

（1泰州市中医院 江苏 泰州 225300；2南京海昌中药集团有限公司 江苏 南京 210061；3南京中医药大学 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心 江苏 南京 210023）

广藿香为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin(Blanco))Benth.的干燥地上部分，其味辛，性微温，可入脾经、胃经及肺经，具有芳香化浊、和中止呕、发表解暑的功效[1]。我国广东、广西、海南等省均有栽培广藿香。按照产地的不同，广藿香可分为石牌广藿香、高要广藿香、湛江广藿香和海南广藿香，其中以石牌广藿香的品质最优[2]。近年来，关于广藿香药材化学成分的研究主要集中在对其挥发性成分的研究。挥发性成分是广藿香主要的功效成分[3]。现代药理研究表明：广藿香所含的挥发油具有抗细菌、抗真菌、抗疟原虫、调节胃肠的运动功能、促进消化液分泌、保护肠黏膜功能等作用[4-6]。进行体外抗病毒实验的结果表明，广藿香油具有抗柯萨奇病毒、抗腺病毒、抗甲型流感病毒和抗呼吸道合胞病毒的作用，但不具有抗单纯疱疹病毒的作用[7]。广藿香油对白色念珠菌有很好的体外抑菌活性，对白色念珠菌阴道炎模型小鼠有很好的治疗作用，有成为治疗念珠菌性阴道炎新型药物的潜力[8]。广藿香精油对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有显著的抑制作用，其抑菌机制与其可破坏细胞结构的完整性、损伤细胞膜、影响细胞壁和细胞膜的通透性、改变膜蛋白的构象有关[9]。目前，广藿香挥发油所含化学成分的组成和结构尚不明确。不同提取方式和不同产地广藿香的挥发油其含量的差异较大。为了对广藿香挥发油中的化学成分进行全面的分析，本研究采用水蒸汽蒸馏法提取广藿香中的挥发性成分，用气相色谱-质谱（GC-MS）联用仪对其进行分析鉴定，并采用峰面积归一化法测定其中各挥发性成分的相对含量，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与药品

本次试验所用的仪器为 Agilent 5975C MSD气相色谱-质谱联用仪，本次试验所用的广藿香购自南京海源中药饮片有限公司（批号：130427），经南京海源中药饮片有限公司的丁斐中药师鉴定为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin(Blanco))Benth.的干燥地上部分。

1.2 挥发油的提取方法

称取广藿香100.00g，置于2000mL的圆底烧瓶中，加水1000mL，浸泡1h，经水蒸气蒸馏提取6h，直至提取出的挥发油不再增加，经无水硫酸钠脱水处理得到挥发油，挥发油的提取得率为2.30%。

1.3 色谱条件

色谱柱：安捷伦19091s-433HP-5MS，5%的苯甲基聚硅氧烷弹性石英毛细管柱（30m×250μm. 0.25μm）；进样口的温度为260℃；程序升温：起始温度为50℃，维持2min，之后以5℃·min-1的速度升至240℃，维持5min。载气为He，流速为1mL·min-1，分流比为20:1，进样量为 1 μL。

1.4 质谱条件

接口温度：260℃，电离方式：EI，电子能量：70eV，离子源温度：230℃，四级杆温度：150℃，调谐方式：标准调谐，进行质量扫描的方式：全部，扫描范围：20～500amu，电子倍增器的电压：1553V，溶剂延迟时间：4min，进样量：1μL，每个样品平行进样2针。

2 结果

在上述色谱与质谱条件下对广藿香的挥发性成分进行GC-MS分析，以面积归一化法测定其挥发油各组分的相对百分含量，得到广藿香挥发油的总离子流图（详情见图1），经过质谱计算机 G1701EA-E.02.02Chem Station 软件和NIST11.0标准质谱检索库检索，并结合标准质谱谱图鉴定广藿香挥发油的化学成分，共得到104种成分，其中26种成分的匹配率在85%以上，其中相对含量在1%以上的成分依次为广藿香醇（占21.00%）、棕榈酸（占4.78%）、开司米酮（占3.60%）、西车烯（占3.12%）、α-愈创木烯（占1.75%）、β-广藿香烯（占1.66%）、蓝桉醇（占1.32%）和月桂酸（占1.08%）。广藿香挥发油成分的鉴定结果见表1。

图1 广藿香挥发油的总离子流图

表1 广藿香挥发油化学成分的分析

3 讨论

从广藿香的挥发油中分离出来的成分共有104个，其中有26种成分的匹配度在85%以上，其中相对含量在1%以上的成分依次为广藿香醇（占21.00%）、棕榈酸（占4.78%）、开司米酮（占3.60%）、西车烯（占3.12%）、α-愈创木烯（占1.75%）、β-广藿香烯（占1.66%）、蓝桉醇（占1.32%）和月桂酸（占1.08%）。与已发表文献中相关的数据[10-13]相比，本次试验从广藿香的挥发油中分离出的成分及含量存在差异性。经炮制后的广藿香饮片中挥发油的含量降低，在其功效成分中广藿香醇的含量有所降低，广藿香酮已检测不到。

由表1可以看出，广藿香中挥发油的成分多为15个碳的小分子化合物，主要为萜类化合物，其中以倍半萜的种数最多，并有少数单萜、半萜及三萜类化合物。广藿香醇是对广藿香挥发油的化学成分进行药理作用研究的主要成分。进行Western blot检测的结果显示，广藿香醇可增强细胞Caspase-3，Bax的表达，下调Livin，Bcl-2蛋白的表达，抑制DU145细胞的增殖，其作用机制与诱导细胞凋亡的效应有关[14]。此外，广藿香醇还具有抑制β-淀粉样蛋白的神经毒性、抑制及杀灭微生物等作用[15]。对小鼠进行广藿香醇急性毒性试验的结果显示，广藿香醇的安全性较高，属于低毒药物[16]。

对广藿香挥发油的成分进行分析，可为今后阐明广藿香饮片挥发油化学成的药理作用提供重要的参考文献。本试验所用的广藿香为经炮制的药材饮片。本试验中关于广藿香的GC-MS特征图谱及其成分分析不能涵盖所有广藿香的品种。

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