短时受精在体外受精技术中的临床观察

杨世俊

[摘要] 目的 探讨观察短时受精在体外受精技术中的临床效果。方法 整群选取2011年10月1 日—2014年5月31日在该院接受体外受精的245例不孕患者，入组患者夫妇进行体格检查后，均行超促排卵、取卵，将患者随机分成实验组和对照组，其中对照组120例采用传统常规受精方法，实验组125例采用短时受精方法，观察两组患者治疗的临床效果。结果 实验组的卵裂率、正常受精率和优质胚胎率与对照组的无明显差异，差异无统计学意义（P>0.05）；实验组患者的妊娠率明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 短时受精在体外受精大大的提高了卵子的利用率，临床上在不影响周期正常受精率的前提下提供了更多的优质胚胎，在临床上可以广泛运用。

[关键词] 短时受精；体外受精；优质胚胎率

[中图分类号] R725 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2015）11（c）-0032-03

[Abstract] Objective To investigate the clinical effect of short-term fertilization in in vitro fertilization technique. Methods A total of 245 infertility cases underwent in vitro fertilization in our hospital from 2011 October 1st to 2014 May 31st were selected. Superovulation and taking ovum were performed in the selected couples after the physical examination. The patients were randomly divided into the experimental group（125 cases） and the control group（120 cases）. Patients in the control group were treated by the traditional routine fertilization method， while those in the experimental group were treated by the short-term fertilization. And the clinical effects of the two groups were observed. Results The differences in the cleavage rate， normal fertilization rate， and high-quality embryo rate between the experimental group and the control group were not statistically significant（P>0.05）. The rate of pregnancy in the experimental group was significantly higher than that in the control group with statistically significant difference（P<0.05）. Conclusion Short-term fertilization applied to in vitro fertilization greatly improves the utilization rate of the ovum， so that more high-quality embryos can be provided without affecting the normal fertilization rate clinically， so it can be widely used.

[Key words] Short-term fertilization； In vitro fertilization； High-quality embryo rate

近几年来随着不健康食物、辐射种类的增多，更多的男女易患上不孕不育[1]。越来越多的医生学者致力于研究体外受精技术，为了提高胚胎的优质数量和临床妊娠率，防止受精周期完全失败，受精周期的长短在其中起到了关键的作用[2]。越来越多的医院采用了短时受精方法，由于在国内短时受精还在探讨阶段，该院为进一步探讨观察并分析短时受精在体外受精技术中的临床效果，特整群选取2011年10月1日—2014年5月31日年间收治的245例不孕患者的临床资料，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

整群选取在该院接受体外受精治疗的245例患有不孕不育的患者，入组患者夫妇进行体格检查后均确诊为为不孕患者，并将其随机分成两组。

其中对照组120例采用传统受精，女方年龄21～42岁，平均年龄（29.2±7.3）岁，男方精液正常的患者75例，精液不正常的患者45例，不孕年限2～9年，平均不孕年限（4.2±1.3）年；实验组125例，女方年龄21～42岁，平均年龄（28.9±7.2）岁，男方精液正常的患者80例，精液不正常的患者45例，不孕年限2～9年，平均不孕年限（4.8±1.2）年。女方不孕因素包括输卵管，子宫内膜异位综合征，排卵障碍等。

1.2 治疗方法

245例女患者均需要在最少有一个卵泡直径在18 mm以上或者2～3个卵泡直径>16 mm时让患者停用Gn，对患者实施剂量为5 000～10 000 U的HCG肌肉注射，经过36 h后，女方经阴道B超下取卵。得到的卵子需要医护人员进行清洗，最后将其放入浓度为10%的HTF培养液中，保持温度在37 ℃左右，通入5%的二氧化碳，2～4后进行受精；305例男方患者则采用手淫提取精液的方法获得精液，将获得的精液置于一次性无菌杯子中，对采集到的精液严格按照相关标准进行分析和巴氏染色法进行形态学检查，最后将制备好的精子悬液置于温室中培养，加入含有卵-冠丘-颗粒细胞复合物的培养液滴，将其浓度调整为（5～10）×105/mL，保持温度在37 ℃左右，通入5%的二氧化碳，30 min后用于加精。实验组采用短时受精，将置于温度37 ℃，通入5%CO2后培养2～4 h以后的卵母细胞受精，受精精子的浓度是2万条/每卵，5～6 h精卵共孵即去除卵丘细胞；对照组组则采用常规受精，将置于温度37 ℃，通入5%CO2后培养2～4 h以后的卵母细胞受精，受精精子的浓度是2万条/每卵，16～18精卵共孵以后方可去除卵丘细胞，为方便了解确认卵母细胞受精状况，医护人员应观察原核和极体的数目方能获知。

1.3 胚胎发育及妊娠评定标准

观察并记录卵裂球数、大小、形态、均匀与否及是否出现碎片及发育的速率，根据以上指标来对胚胎质量进行评估。优质胚胎判定标准[3]：①以正常速度发生卵裂，2 d后卵裂球数量大于3个或3 d后最少有6个细胞；②卵裂求的形态均匀或大小不均，且出现的无核碎片<20%的胚胎。为35岁以下患者移植2～3枚优质胚胎，14 d后进行妊娠检测确定妊娠，在移植后35 d超声来监测心血管波动并观察妊娠囊，确定为临床妊娠。

1.4 统计方法

统计分析时采用SPSS 17.0软件分析，计数资料采用（n，%）表示，进行χ2检验。

2 结果

2.1 两组卵裂和正常受精率比较

实验组的卵裂率和正常受精率与对照组，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2 两组优质胚胎率及妊娠率比较

实验组的优质胚胎率高于对照组，但差异无统计学意义（P>0.05）；实验组妊娠率明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

不孕不育是在现代生活中比较常见的疾病，多发于长时间处于高辐射和高污染环境的男女，该病虽不危及患者生命安全，但严重影响患者家庭幸福且降低了患者的生活质量，患者无法正常怀孕[4-5]。因此更多的医生学者致力于研究如何提高体外受精技术，深入了解研究两种受精方式导致的优质胚胎率及妊娠率的区别，提高体外受精的优质胚胎率和妊娠率，由此来提高体外受精的质量[6-7]。传统受精由于传统受精组卵子和高密度精子长时间的作用，精子在代谢过程中会导致代谢物堆积，在培养过程中，一些已经死亡的精子和加入培养液中的颗粒细胞也会和精子同时吸取培养液中的营养，而使得卵子也受到这些因素的影响，可能导致卵子营养供给不足[8]。此外颗粒细胞、精子在代谢过程中所产生的一些代谢物，使细胞膜的流动性受到影响，由于脂肪酸过氧化会间接导致胚胎的分裂、发育、孵出与植入不能够正常进行[9]。因此短期受精在受精过程中不会影响体外受精的卵裂率和和正常受精率，还能增加体外受精的优质胚胎数目。

实验组卵裂率（91.54%）和正常受精率（62.82%）与对照组（92.91%）、（63.19%）无明显差异，实验组的优质胚胎率（67.63%）稍高于对照组（65.76%），但差异无统计学意义（P>0.05）。短时受精组精卵孵育的时间短，减少了一些可能的不利胚胎发育的因素优质胚胎数目的增加，从而可能提高周期累积妊娠率[10]。实验组妊娠率（62.40%）明显高于对照组（25.83%），李娜等[11]人为探讨短时受精与过夜受精对胚胎质量的影响，将短时受精组40个周期的精卵孵育5 h；常规受精组40个周期精卵孵育16～18 h，结果显示，两组的正常受精率、卵裂率差异无统计学意义，但短时受精组的优质胚胎率、妊娠率高于常规受精组，且组间比较差异显著，该组研究结论与之吻合。

综上所述，短时受精在体外受精大大的提高了卵子的利用率，临床上在不影响周期正常受精率的前提下提供了更多的优质胚胎，在临床上可以广泛运用[15]。

[参考文献]

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[3] 彭兆锋，孙莹璞，戴善军，等.缩短受精前卵母细胞培养和精卵共孵育时间对胚胎质量的影响[J].现代妇产科进展，2010，19（5）：372-373.

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[5] 彭兆锋，孙莹璞，戴善军，等.缩短受精前卵母细胞培养和精卵共孵育时间对胚胎质量的影响[J].现代妇产科进展，2010，19（5）：372-373.

[6] 林春丽，洪新如，陈国勇，等.短时受精在辅助生殖技术中的应用研究[J].福建医药杂志，2012，34（3）：27-29.

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[9] 刁英，杨智敏，谭兵兵，等.短时受精并即刻脱颗粒细胞对IVF—ET治疗周期的影响[J].中国计划生育学杂志，2011， 19（2）：106-108，122.

[10] 孙莹璞，金海霞.短时受精利弊与多精受精的避免[J].生殖医学通讯，2011，7（1）：18-19.

[11] 李娜，苗聪秀，向秋，等.短时受精在体外受精的临床应用[J].华夏医学，2011，24（3）：246-248.

（收稿日期：2015-08-15）