霉菌毒素分解酶对育肥猪生产性能及肝功能的影响

2016-01-10潘康成张新华张钧利张立平

饲料工业 2016年11期

■潘康成张新华张钧利张立平周尧

（1.四川农业大学，四川成都 611130；2.山东宝益泽生物工程有限公司，山东济南 251400）

当今全国范围内的气候多变使得饲料在生产及存储过程中极易出现霉变现象，所产生霉菌毒素不仅给养殖业造成了相当严重的损失，也间接地威胁到人类健康。各种霉菌毒素中黄曲霉毒素毒性最强，尤以黄曲霉毒素B1（AFB1）更甚。黄曲霉毒素是最强的免疫抑制剂之一，当饲料受到较高浓度的黄曲霉毒素污染时，最先受到干扰的就是机体免疫系统。主要表现为抗体滴度低，药物不能正常发挥作用，对疾病易感性高。且一旦发病，基本很难有治疗效果。黄曲霉毒素同时还具有较强的凝血因子抑制功能，使动物在受伤或者打针后出现流血不止或者淤血症状。黄曲霉毒素是一种强烈的肝毒素，当大量摄入时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维病变，致使纤维组织增生。霉菌毒素分解酶通过破坏黄曲霉毒素B1结构中的二氢呋喃环，使黄曲霉毒素B1失去毒性作用。本试验旨在通过在育肥猪日粮中添加霉菌毒素分解酶，研究其对AFB1中毒育肥猪的生产性能及肝功能的影响，为霉菌毒素分解酶在育肥猪养殖中的应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

霉菌毒素分解酶（山东宝益泽生物工程有限公司提供，商品名益利安）。AFB1标准品（购自江苏美正生物科技有限公司，商品名益利安）。

1.2 试验动物分组

选取胎次相同、体重相近（30～35 kg）、发育正常的育肥猪81头，随机分为3个组，分别为对照组、AFB1组、霉菌毒素分解酶组（后称益利安组），每组3个重复，每个重复9头猪，3个组之间试验动物的初始体重差异不显著（P＞0.05），预试验为期5 d，正式试验时间为28 d。预试验期间所有试验动物均饲喂基础日粮。

1.3 试验动物饲养管理

试验选在独立猪舍进行，自由采食和饮水，每日打扫猪舍，消毒免疫按常规方法进行。

1.4 试验日粮

对照组饲喂基础日粮，AFB1组在基础日粮中添加20 μg/kg的AFB1标准品，益利安组在基础日粮中添加20 μg/kg的AFB1标准品和100 mg/kg的霉菌毒素分解酶制剂。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.5 样品采集及保存

正式试验结束后，试验猪自由饮水禁食24 h，称重并计算日采食量、日增重及料重比。每组随机取9头猪按照常规方法屠宰，取出肝脏组织，-20℃冷冻保存。

1.6 测定指标及方法

1.6.1 生产性能指标

生产性能指标包括日均采食量、日均增重及料重比。

日均采食量：每天准确称量日粮的投喂量和剩余量，计算每头猪每天日粮采食量(ADFI)。

日均增重：以预试期结束体重为初始体重，正式试验结束时为最终重量，计算每头猪平均日增重（ADG）。

料重比：即日均采食量与平均日增重之比（F/G）。1.6.2 肝脏生化指标及肝脏中AFB1的残留

肝脏生化指标包括谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽硫转移酶、腺苷脱氨酶和胆碱酯酶，使用试剂盒采用分光光度法测定，测定仪器为752型分光光度计，试剂盒购于南京建成生物工程研究所。肝脏中的AFB1使用ELISA试剂盒检测。

2 结果与分析

2.1 霉菌毒素分解酶对育肥猪生长性能的影响

表2 霉菌毒素分解酶对AFB1中毒育肥猪生长性能的影响

从表2可以看出，在日均增重对照组与霉菌毒素分解酶组没有显著差异（P＞0.05），对照组与霉菌毒素分解酶组的日均增重均高于AFB1组，其中霉菌毒素分解酶组的日均增重比AFB1组高出3.3%，差异显著（P＜0.05）。在日均采食量对比中，对照组比AFB1组高出0.8%，差异不显著（P＞0.05），霉菌毒素分解酶组分别比对照组和AFB1组高出1.13%和1.93%，差异显著（P＜0.05）。在料重比对比中，对照组和霉菌毒素分解酶组均低于AFB1组，且差异显著（P＜0.05）。

2.2 霉菌毒素分解酶对育肥猪肝脏生化指标及肝脏内AFB1检出量的影响

表3 霉菌毒素分解酶对肝脏生化指标及肝脏内AFB1检出量的影响

从表3中的数据可以看出，在谷胱甘肽还原酶指标对比中，对照组和霉菌毒素分解酶组分别比AFB1组高出9.5%和15.38%，均差异显著（P＜0.05），对照组与霉菌毒素分解酶组的谷胱甘肽还原酶无显著差异（P＞0.05）。在谷胱甘肽硫转移酶指标对比中，对照组和霉菌毒素分解酶组分别比AFB1组高出15.6%和21.8%，均差异显著（P＜0.05），对照组与霉菌毒素分解酶组的谷胱甘肽硫转移酶无显著差异。在腺苷脱氨酶指标对比中，对照组和霉菌毒素分解酶组分别比AFB1组高出11.4%和21.33%，均差异显著（P＜0.05），对照组与霉菌毒素分解酶组的腺苷脱氨酶无显著差异。在肝脏AFB1检出量对比中，对照组育肥猪肝脏中的AFB1含量为0.03 μg/kg，可忽略不计。霉菌毒素分解酶组的AFB1检出量比AFB1组减少76.84%，差异显著（P＜0.05）。

3 讨论

3.1 霉菌毒素分解酶对育肥猪生产性能的影响

黄曲霉毒素B1是一种强力致畸、致癌的霉菌毒素，对动物正常生长发育有严重影响[1]。畜禽对霉菌毒素的临床反应可以表现为急性、亚急性或慢性，并具有剂量和时间依赖关系。往往表现为生殖周期紊乱，采食量下降，生长缓慢且饲料利用率降低[2]。史莹华等的研究表明，黄曲霉毒素显著影响试验猪的生长性能，日增重降低12.9%（P＜0.01），料重比提高7.54%（P＜0.01），同时显著降低了试验猪的免疫功能和抗氧化能力[3]。尹逊慧等研究表明，在黄羽肉鸡日粮中添加20 μg/kg或50 μg/kg的黄曲霉毒素B1，肉鸡的平均出栏重、日均采食量显著下降，料重比升高[4]。在本试验中，添加AFB1试验组的育肥猪在日均增重和日均采食量上均低于饲喂正常日粮的对照组育肥猪，料重比显著高于对照组育肥猪。而添加了霉菌毒素分解酶的试验组育肥猪的日均增重和日均采食量远高于AFB1试验组育肥猪，且料重比显著下降。说明霉菌毒素分解酶能够有效解除黄曲霉毒素B1对育肥猪生长发育造成的毒害作用。

3.2 霉菌毒素分解酶对育肥猪肝脏功能的影响

黄曲霉毒素B1在动物体内作用的主要靶器官是肝脏[5-6]。肝脏作为动物机体解毒的主要器官，受到的损害作用也就最大。谷胱甘肽硫转移酶、谷胱甘肽还原酶以及肝脏腺苷脱氨酶是保护动物机体、起解毒作用的酶类[7]。史莹华等研究表明，长期饲喂受霉毒素污染的日粮，容易引发霉菌毒素慢性中毒，黄曲霉毒素B1能使试验猪肝功能严重损伤，胞内酶大量释放到血液中，从而使肝脏酶活指标显著降低，影响肝脏功能[8]。于会民等研究表明，用含有黄曲霉毒素B1饲料饲喂断奶仔猪，仔猪肝脏中的谷胱甘肽还原酶、过氧化氢酶、琥珀酸脱氢酶的活性显著下降（P＜0.05），肝脏生理功能受损[9]。在本试验中，添加了霉菌毒素分解酶的育肥猪谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽硫转移酶和腺苷脱氨酶比AFB1试验组育肥猪相同指标显著降低（P＜0.05）。在肝脏中黄曲霉毒素B1检出量指标中，饲喂正常日粮的对照组育肥猪肝脏中黄曲霉毒素B1 的检出量为 0.03 μg/kg，日粮中添加了100 μg/kg黄曲霉毒素B1的AFB1试验组育肥猪肝脏的黄曲霉毒素B1的检出量为2.85 μg/kg，远高于对照组，说明黄曲霉毒素B1被动物摄入体内后会在肝脏内蓄积。同时添加了霉菌毒素分解酶和黄曲霉毒素B1标准品的试验组育肥猪肝脏中的黄曲霉毒素B1检出量为0.66 μg/kg，比AFB1组减少了76.84%，说明霉菌毒素分解酶高效地分解了育肥猪肝脏中的黄曲霉毒素B1。