联用超声快速石腊病理切片制备法和免疫组化染色法诊断肿瘤性疾病的效果分析

包文劼

（江苏省溧阳市中医院 江苏 溧阳 213300）

医院的病理科（Pathology department）承担着对患者的病情进行病理诊断的工作，主要通过对其进行组织活检、穿刺细胞学检查等手段为其提供明确的病理诊断结果[1]。过去，临床上常用常规的石蜡切片制备法及染色法对患者的肿瘤进行诊断，但诊断的准确率较低。超声快速石腊病理切片制备法操作起来简便快捷、切片质量好，组织染色清晰，是目前临床上诊断肿瘤常用的制片方法。免疫组织化学（Immunohistochemical staining，IHC）染色法是利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应，检测患者细胞或组织中是否有目标抗原的存在。此方法不仅可以测知抗原的表现量也可以观察抗原所表现的位置[2]。此方法因具有专一性、灵敏度高、简便快速和成本低廉等优势，近年来被广泛地应用于临床。为了探讨联用超声快速石腊病理切片制备法和免疫组织化学染色法诊断肿瘤性疾病的临床效果，我们对近年来我院病理科收取的100例患者手术切除标本的临床资料进行回顾性研究。现将研究结果报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究的对象为2013年5月～2015年12月期间我院病理科收集的100例患者的手术切除标本及其检测资料。这些患者的病情均经综合检查和手术探查后被确诊为肿瘤性疾病。本次研究所选患者的纳入标准是：①无血液系统疾病或凝血功能障碍的患者。②无肝肾功能衰竭的患者。本次研究所选患者的排除标准是：①存在精神障碍的患者。②处于妊娠期和哺乳期的患者。在这100例患者中，有男性患者58例、女性患者42例。他们的年龄在28岁～65岁之间，平均年龄为（42.5±2.5）岁。

1.2 诊断方法

我们对每例病理标本均取材2块，取材的病理组织大小为1cm×1cm×0.2cm。我们对其中1块标本联用常规石蜡切片制备法和苏木精——伊红染色法进行检测，对另一块标本联用超声快速石腊病理切片制备法和免疫组织化学染色法进行检测。

1.2.1 联用常规石蜡切片制备法和苏木精——伊红染色法对组织标本进行检测的方法是：①进行常规石蜡切片制备。②将制备的切片浸入到二甲苯中，维持10 min。③将切片分别置入浓度为100%的酒精、95%的酒精、90%的酒精和80%的酒精中各浸泡1 min，然后使用纯净水冲洗切片1 min。④将切片浸入苏木素染液浸染15 min，然后使用纯净水冲洗1 min。⑤使用浓度为1%的盐酸酒精将切片分化30 s，然后用流水冲洗15 min。⑥用浓度为1%的伊红酒精侵染切片5 min。⑦用浓度为90%或95%的酒精分化切片30 s。⑧将切片分别置入浓度为100%的酒精、碳酸二甲苯、二甲苯中各浸泡1 min，然后用中性树胶封固。⑨采用德国美天旎生物技术公司生产的gentleMACS全自动组织处理器进行处理。

1.2.2 联用超声快速石腊病理切片制备法和免疫组织化学染色法对组织标本进行检测的方法是：进行超声快速石腊病理切片制备所使用的仪器是上海比朗仪器制造有限公司生产的BILON92-IID超声处理仪。超声处理仪的水槽温度以65℃～70℃为宜。进行超声快速石腊病理切片制备的方法是：①进行固定处理。将病理组织浸入到25 ml浓度为4%的中性缓冲甲醛液中，进行固定处理2 min，待组织呈现灰白色时继续将其固定2 min。②进行脱水兼透明处理。用吸水纸除去病理组织表面的残夜，然后将其投入到25 ml的丙酮中5 min，反复处理2次。③进行浸蜡处理。用吸水纸除去病理组织表面的残夜，然后将其浸入到蜡液之中，至病理组织完全下沉并不再向外冒泡为止。④进行包埋处理。采用预制的蜡块将病理组织包埋后进行急速冷却，并快速对其进行切片、烤片、染色、封固[3]。对组织标本进行免疫组织化学染色的方法是：①在高温高压的环境下对切片进行抗原修复，等待2 min，待其自然冷却后用纯净水进行冲洗。②使用磷酸缓冲盐溶液冲洗切片3次，每次冲洗1 min。去除该溶液后向切片滴加50μl的第一抗体，在37℃的条件下孵育60 min。③使用磷酸缓冲盐溶液冲洗切片3次，每次冲洗1 min。去除该溶液后向其中滴加50μl的第二抗体，在室温的条件下孵育30 min。④使用磷酸缓冲盐溶液冲洗切片3次，每次冲洗1 min。去除该溶液后向其中滴加新鲜的DAB（二氨基联苯胺）染色液。在显微镜下观察后对其进行脱水透明处理，并采用中性树胶进行封片。

1.3 统计学方法

我们采用SPSS17.0统计软件对本研究中的数据进行处理，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ²检验。当P＜0.05时视为差异有统计学意义。

2 结果

我院对这100例患者进行综合检查的结果是：患有乳腺肿瘤的22例、患有胃肿瘤的19例、患有甲状腺肿瘤的17例、患有卵巢肿瘤的15例、患有肺肿瘤的12例、患有脑肿瘤的8例、患有子宫肿瘤的7例。联用常规的石蜡切片制备法和苏木精——伊红染色法对肿瘤进行诊断的准确率为82%，联用超声快速石腊病理切片制备法和免疫组织化学染色法对肿瘤进行诊断的准确率为96%，二者相比差异有统计学意义（P＜0.05）。详情见表1。

表1 用两种诊断方法对肿瘤进行诊断准确率的比较[n(%)]

3 讨论

将超声处理仪应用于快速石腊病理切片制备中，是利用装有组织的有机溶剂或石蜡在高速震荡下产生的周期性缩张运动，使组织的水分更易被有机溶液置换出来，使加速融化的石蜡更易浸透病理组织内部，最终实现缩短制片时间的目的。进行免疫组织化学染色监测能够识别病理组织中的蛋白质、多肽、核酸、多糖、激素、病原体、神经介质、肿瘤的标记物等[4]各种生物成分，而且能够检查出具有抗原性或半抗原性的物质，从而对肿瘤的性质进行准确的定位[5]。因此，联用超声快速石腊病理切片制备法和免疫组织化学染色法对肿瘤进行诊断不仅能够缩短制片的时间，还可以提高诊断的准确率，为临床诊疗工作提供准确、科学的诊断依据。

综上所述，联用超声快速石腊病理切片制备法和免疫组织化学染色法诊断肿瘤性疾病的准确率较高。此诊断方法值得在临床上推广应用。

[1]吴丹桔.免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用[J].现代诊断与治疗，2013，14（15）:3428-3429.

[2]杨雪梅，李凤朝.结合乳腺癌雌、孕激素受体的检测，浅谈免疫组织化学染色在临床应用中的体会[J].齐齐哈尔医学院学报，2012，15（17）:2298-2299.

[3]赵敏，姚宏.隆突性皮肤纤维肉瘤临床病理和免疫组织化学研究[J].中国药物与临床，2014，11（12）:1650-1651.

[4]王炳淑，刘友斌，卜平凤，等.细胞沉渣石蜡包埋、免疫组织化学染色病理检查对浆膜腔积液的定性诊断价值[J].山东医药，2015，25（28）:98-99.

[5]方帆，李莉，高妮娜，等.冷冻快速切片的免疫组织化学检测辅助诊断乳腺癌前哨淋巴结转移癌[J].华夏医学，2013，10（06）:1040-1043.