老年人群呼吸道感染病原体IgM检测结果

·呼吸、消化系统疾病·

老年人群呼吸道感染病原体IgM检测结果

陈克平1高天丽1李雅1时彦杨传坤李丽1

(东南大学附属中大医院临床检验中心，江苏南京210009)

摘要〔〕目的了解本院老年人群呼吸道感染病原体的流行病学特点，为指导临床诊断和治疗、制定预防措施提供依据。方法借助呼吸道感染病原体IgM试剂，采用间接免疫荧光技术同时检测呼吸道感染患者9种病原体：肺炎支原体(MP)、乙型流感病毒(INFB)、副流感病毒(PIVs)、嗜肺军团菌(LP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)以及Q热立克次体(COX)观察其季节性变化。结果1 063例老年人群中共检出阳性259例，阳性率为24.34%。老年人群呼吸道感染的主要病原体为MP、INFB、PIVs、LP与RSV。MP的感染率最高，为15.90%；而INFB感染存在季节性差异(P<0.05)。3.5%的阳性患者发生了混合感染，主要混合感染类型为MP与INFB。结论MP为老年人群呼吸道感染的主要病原体。老年人群呼吸道感染应重点关注MP的诊断与防治，并在INFB高发季节注意混合感染。

关键词〔〕呼吸道感染；病原体；肺炎支原体；乙型流感病毒

中图分类号〔〕R44〔文献标识码〕A〔

基金项目：国家自然科学

1东南大学医学院

第一作者：陈克平(1977-)，男，博士，主管技师，主要从事临床分子诊断、老年痴呆分子机制研究。

DetectionofIgMofpathogenscausingrespiratorytractinfectioninelderlypeople

CHENKe-Ping,GAOTian-Li,LIYa,et al.

DepartmentofClinicalLaboratory,ZhongdaHospital,SoutheastUniversity,Nanjing210009,Jiangsu,China

Abstract【】ObjectiveTo explore the epidemiology of respiratory tract pathogens in elderly people.MethodsSerum samples of elderly people with respiratory tract infection were tested with the Pneumoslide IgM kit.The Pneumoslide IgM technology could simultaneously diagnose 9 main viral and atypical pathogens:Mycoplasma pneumoniae(MP),Influenza B(INFB),Parainfluenza 1,2 and 3(PIVs),Legionella pneumophilaserogroup 1(LP1),Respiratory syncytial virus(RSV),Influenza A(INFA),Chlamydophila pneumonia(CP),Adenovirus(ADV),Coxiellaburnetii(COX).Results1 063 serum specimens tested 259 positive.MP was the dominant pathogen with the positive rate of 15.90%,the pathogens ranking the second place to the fifth place were INFB,PIVs,LP1,and RSV,the positive rates were 2.92%,2.35%,1.6%,and 1.41%,respectively.INFB infecction was associated with season(P<0.05).3.5% of positive patients suffered from mixed infection,especially MPand Influenza B.ConclusionsMP is the dominant pathogen of respiratory tract infection in elderly people.More attentions are paid to diagnosis and treatment of MP,and the mixed infection during peaking season of INFB.

【Keywords】Respiratorytractinfection;Pathogens;Mycoplasmapneumonia;InfluenzaB

呼吸道病毒是全球临床发病率与死亡率的主要原因之一〔1，2〕；仅上个世纪，流感病毒就造成超过1亿人的死亡，而受累的主要是儿童与老年人群〔2〕。老年人由于呼吸系统形态学变化，肺功能改变，免疫功能低下，对致病病原体缺少有效抵抗力，多数老年人成为呼吸道感染病毒的易感人群。随实验室检测技术的发展，人们发现病毒以及非典型病原体在社区获得性肺炎的作用被低估。有研究表明，有大约33.3%的社区获得性肺炎是由病毒以及非典型性病原体引起的〔3〕。本文拟了解南京地区老年人群呼吸道感染病毒及非典型病原体感染情况。

1材料与方法

1.1研究对象选择本院2012～2013年确诊为呼吸道感染的成年患者1 514例，其中包含年龄>60岁的老年患者1 063例，18至60岁的成年患者451例作为对照。由专业人员无菌静脉穿刺采集血液。血清样本采集后8h内检测，2℃～8℃冷藏；如7d内不检测，则应冷冻(-20℃)保存。不要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度降低，特别是IgM。不使用高血脂或污染的血清。若样本中含有微粒要离心使之澄清。

1.2主要仪器与试剂5415R与5414型Ependorf高速离心机(德国Eppendorf公司)；Axioskop40 型荧光显微镜(德国ZEISS公司)。9项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒(西班牙VIRCELL,S.L.公司)；试剂盒中的载玻片包被有9种病原体抗原，分别为嗜肺军团菌(LP1)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)与乙型流感病毒(INFB)以及副流感病毒(PIVs)。除嗜肺军团菌，载玻片中的所有抗原均从细胞培养物中获得。每一病毒类病原体载玻片孔均含有1%～15%甲醛灭活的感染细胞，丙酮固定。

1.3实验方法用抗人IgG吸附剂处理PBS稀释后的血清，高速离心除去沉淀，以防类风湿因子IgG等干扰检测。处理后的血清加到载玻片后进行温育。洗涤晾干后加入抗人IgM的FITC结合物放入湿盒温育。洗涤封片，用荧光显微镜400倍放大率下观察结果。

1.4统计学分析用SPSS19.0软件行χ2检验。

2结果

2.19种呼吸道感染病原体检测阳性率及老年人群与成年人群的比较成年人群共检出444株病毒，阳性429例，患者总阳性率为28.34%。其中老年人群共检出268株病毒，阳性例数为259例，阳性率为24.37%；而18岁至60岁的451例成年人群阳性率为37.69%，明显高于老年人群(P<0.01)。在检测的9种非细菌性病原体中，引起老年人群呼吸道感染的主要病原体为MP、INFB、PIVs、LP1与RSV，阳性率分别为15.90%、2.92%、2.35%、1.60%、1.41%；在1 063例老年人群中没有检测到CP与COX。见表1。

老年人群与仅有MP检测阳性率差别显著(P<0.01)；MP在老年人群中的阳性率为15.90%，而阳性率高达27.94%。其他病原体的阳性率无统计学差别(P>0.05)。见表1。

2.2老年人群呼吸道感染与季节的关系依据呼吸道感染发生的季节，把老年人群与18～60岁成年人群按春季(3月至5月)、夏季(6月到8月)、秋季(9月至11月)以及冬季(12月至次年2月)分成四组。统计结果显示，老年人群INFB夏季感染率比其他季节低，感染率最高的季节发生在冬季，INFB感染具有季节性差异(P<0.05)(见表2)；老年人群无CP、COX感染；而18岁至60岁成年人群的INFB感染不具有季节性差异(P>0.05)(见表3)。其他8种病原体感染阳性率未见明显季节差异(P>0.05)，而MP在四季中均具有较高的感染阳性率。

2.3老年人群呼吸道感染与性别的关系本研究中，老年女性399例，呼吸道感染病原体阳性121例(30.33%)，老年男性664例，呼吸道感染病原体阳性138例(20.78%)。女性与男性总体阳性率具有统计学差别(P=0.003)。

2.4混合感染情况在检测结果阳性的259例老年人中，检测到9例混合感染患者，占总体阳性患者的3.5%。88.89%(8例)混合感染患者感染类型为MP合并INFB感染。MP感染的老年人群易合并INFB感染造成混合感染。

表1　老年人群与呼吸道感染病原体检测结果〔n(%)〕

表2　老年人群呼吸道感染病原体阳性率与

表3　18～60岁人群呼吸道感染病原体阳性率与

3讨论

老年人群免疫功能处于衰退期，呼吸道感染如不及时控制可引起严重的并发症，甚至死亡。有些抗病毒治疗仅在感染的早期治疗有效，呼吸道感染病原体的早期诊断利于临床及早采取正确的抗病毒治疗。病原体的早期诊断还可以减少抗生素的滥用，避免耐药菌株的产生〔4,5〕。另外，快速的病毒早期诊断可显著减少住院周期以及不必要的实验室检测，减少医疗费用，避免医患纠纷〔4，6〕。病毒与非典型病原体的检测方法包括病毒培养、血清学检测和核酸检测法。病毒培养为病原体检测“金标准”，但技术要求较高，费用高并且需要较长的培养鉴定周期，同时培养阳性率低〔3〕；核酸检测需要提取病毒核酸并进行扩增，对人员素质与实验室仪器设备提出一定要求，可鉴别的病原体种类受到技术的严重制约〔7,8〕。机体感染病毒后以体液免疫为主，而IgM为机体在受到抗原刺激后最早产生的抗体，所以血清中特异性IgM含量增高提示有近期感染。9项呼吸道病原体IgM检测，可同时检测9种呼吸道病毒及非典型病原体。对于呼吸道感染病原体早期感染进行快速诊断具有重要意义。

本研究中9种呼吸道感染病原体IgM抗体的阳性率与国际及国内使用同种方法的结果基本相同〔9,10〕。老年人群呼吸道感染病原体检测阳性率低，与通常所认为的老年人群更易于感染的观点不相符〔11〕；而与上海地区采用同样检测方法得到的结果相似〔10〕。老年人群认识到自身较弱的免疫功能，形成较强的健康意识，注意个人防护而使总体感染率较低。不同性别呼吸道病原体总体阳性率差别显著，这主要由于女性MP感染率显著高于男性；这与无锡地区的研究结果一致〔12〕。

引起老年人群呼吸道感染的病原体主要为MP、INFB、PIVs、LP1与RSV，MP的检出率最高，因此老年人群呼吸道感染应重点关注MP的诊断与防治。MP主要通过呼吸道传播，健康人吸入患者咳嗽、打喷嚏时喷出的口、鼻分泌物而感染〔13〕。因此，老年人群因退休等原因离开人口密集的工作场所，以及较少参加聚会活动从而减少了MP感染的机会。老年人群中没有检测到CP与COX感染。9种呼吸道病毒感染大部分病原体后，早期抗体IgM一般在感染1w左右出现，仅有CP与COX病原体IgM在感染后2～3w后出现〔14，15〕，因此造成两种病原体未检出可能与取样时间有关；为提高此两种病原体的检出率可在初次检测阴性后隔段时间重新取样重新检测。

包括INFB在内的4种主要呼吸道感染病原体阳性率均不具有季节性。因此，INFB感染在冬季、秋季及春季高发应是老年人群呼吸道感染的一个特征。老年人群在INFB高发季节应注意对此种病原体感染的防护。MP感染没有明显的季节特征，在4季中都具有较高的感染率。2010年在丹麦、英格兰与威尔士，2011在挪威都相继发生了MP的感染流行；并且感染率都有了很大的提高〔16～19〕。本研究还发现感染MP的老人易发生INFB混合感染。近期美国科研人员也检测到MP与INF病毒共同感染具有高度统计学意义〔20〕。老年人群机体组织器官功能逐年衰退，常伴有高血压、糖尿病等老年性疾病，MP的感染常引起严重的神经系统、血液系统与心血管系统并发症甚至导致死亡。因此老年人群四季都应注意肺炎支原体感染防护，特别是INFB高发季节发生的混合感染。

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〔2015-05-07修回〕

(编辑曲莉)