临床分离铜绿假单胞菌耐药性分析与监控管理

魏宏莲，王 崇，苏军华，时东彦

（河北医科大学第二医院检验科，河北石家庄050000）

临床分离铜绿假单胞菌耐药性分析与监控管理

魏宏莲，王 崇，苏军华，时东彦*

（河北医科大学第二医院检验科，河北石家庄050000）

目的 回顾性分析临床分离的418株铜绿假单胞菌，观察其科室分布及耐药性特征，并对多重耐药铜绿假单胞菌采取有效控制措施。方法采用法国Vitek 2 compact全自动微生物鉴定及药敏分析系统进行鉴定与药敏试验，参照CLSI 2012版标准判读结果，数据分析采用WHONE 5.6软件。结果418株铜绿假单胞菌主要来源于呼吸内科、重症监护病房、神经外科；标本以呼吸道痰液为主占78.72%；阿米卡星耐药率最低为4.79%，其次为头孢吡肟和头孢他啶，分别为25.36%和29.19%，其余抗菌药物耐药率均超过30%，其中氨曲南耐药率最高为50.72%。结论 铜绿假单胞菌分离主要来自下呼吸道标本，其耐药性较高。临床应重视药敏试验并合理使用抗菌药物，同时加强铜绿假单胞菌的监控与感染管理。

铜绿假单胞菌；抗菌药；抗药性

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）属于假单胞菌属，是一种需氧革兰阴性杆菌，广泛存在于医院的环境中，是临床上常见的院内获得性感染的重要致病菌，可引起严重的感染如肺炎、泌尿系统感染和创面感染等［1］。由于其较强的耐药性及生物膜形成，使得感染难以治愈。本研究回顾性分析我院住院患者铜绿假单胞菌临床分布及耐药特征，旨在加强预防管理与感染监控，结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 418株铜绿假单胞菌分离自2013年1月—2014年1月我院住院患者送检的痰液、肺泡灌洗液、尿液、分泌物和血液等标本，剔除同一患者同一部位重复分离的菌株。

1.2 菌株分离鉴定和药敏 标本的接种、分离培养严格按照无菌操作进行，鉴定和药敏试验采用法国生物梅里埃Vitek 2 compact全自动微生物分析系统。

1.3 药敏结果判读 参照2012版CLSI标准，质控菌株为铜绿假单胞菌ATCC27853，标准菌株来自卫生部临检中心。

1.4 数据处理 标本临床资料和鉴定、药敏结果导入WHONET5.6软件数据库进行统计分析，分离于同一患者的只对初次分离株进行分析。

2 结 果

我院2013年1月—2014年1月共分离出418株铜绿假单胞菌，其中黏液型铜绿假单胞菌15株，黏液型铜绿假单胞菌对哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美洛培南、庆大霉素、环丙沙星、阿米卡星、哌拉西林耐药率均小于10%。标本主要来源于下呼吸道的痰液，329株（78.72%），其次为灌洗液、分泌物和尿液，分别为26株（6.22%）、23株（5.50%）和22株（5.26%），其他的18株（4.31%）。以呼吸内科、重症监护室和神经外科分离率较高，分别为161株（38.52%）、89株（21.29%）、83株（19.86%）。其次依次为心脏内科26株（6.22%）、消化内科21株（5.02%）、普外科20株（4.78%）、儿科18株（4.31%）。418株铜绿假单胞菌对11种抗菌药物的耐药率，最高的是氨曲南212株（50.72%），其次为庆大霉素198株（47.37%）和哌拉西林177株（42.34%），除头孢吡肟（25.36%）和头孢他啶（29.19%）外，其他药物耐药率超过30%。见表1。

表1 418株铜绿假单胞菌对11种抗菌药物的耐药率Table 1 Drug resistance of 418 isolates of Pseudomonas aeruginosa to 11 anti-bacterial agents

3 讨 论

铜绿假单胞菌广泛存在于医院的环境中，且具有天然多重耐药性。随着侵入性医疗操作的增多，抗生素和免疫抑制剂的广泛使用，人口老龄化等因素，使该菌成为医院感染的重要病原菌，主要导致呼吸道、泌尿道和血液感染［2］。由其引起的医院获得性肺炎特别是呼吸机相关性肺炎约占10%～35%，已成为医院获得性肺炎的主要致病菌。其主要致病物质是内毒素，此外还有菌毛、荚膜、胞外酶和外毒素等多种致病因子。多重耐药和泛耐药成为铜绿假单胞菌感染的一个严重问题，及时有效地监测铜绿假单胞菌分布，掌握其耐药性，显得极为重要。

我院铜绿假单胞菌的标本来源以下呼吸道痰液为主，占到78.72%，与张译心等［3］报道的71.9%类似，但明显高于莫善颖等［4］报道的44.2%。其次为肺泡灌洗液、分泌物和尿液。分离科室主要是呼吸内科、重症监护室和神经外科，占到总分离率的70%，具有我院独有的特色，可能与我院是综合性医院和送检标本种类有关。我院铜绿假单胞菌耐药性明显偏高，对阿米卡星（4.79%）耐药率最低，其次为头孢吡肟（25.36%），比Mohnarin 2011年全国细菌耐药监测结果阿米卡星（23.4%）低，而头孢吡肟（21.2%）略高［5］，同2005年我院铜绿假单胞菌比较阿米卡星和头孢吡肟耐药率有所下降［6］，但与2011年亚胺培南和美罗培南的耐药率24.6%和20.3%比较有明显升高［7］，原因可能与患者临床用药受限有关。这和黄燕新等［8］报道的亚胺培南的耐药率10.5%有明显差异。环丙沙星耐药率在35%以上，明显高于庞众多等［9］报道的低于20%。哌拉西林的敏感性下降到42.34%，因此不建议哌拉西林作为治疗铜绿假单胞菌感染特别是重症感染的经验性用药。

418株菌中我们共分离15株黏液型铜绿假单胞菌，由于黏液型铜绿假单胞菌产生大量藻酸盐可在菌体外形成生物被膜，逃逸机体的免疫清除，一旦感染很难从患者体内清除，是造成肺囊性纤维化的重要病原菌。氨曲南的耐药性稍高，但明显低于非黏液型。值得注意的是体外药敏试验仅测试了浮游细菌对抗菌药物的敏感性，并不能反映其生物被膜对抗菌药物的影响。这就造成了黏液型铜绿假单胞菌体外药敏试验敏感，但临床用药治疗大多无效现象。原因可能是由于存在生物被膜，造成通透性差，抗菌药物不易通过，即使抗菌药物浓度很高，仍不能杀灭被膜下的细菌。生物被膜还能够避免细菌与免疫细胞及抗体相互作用，抑制吞噬细胞吞噬，产生免疫逃逸，从而使细菌长期存在。除生物膜外主动外排泵系统在铜绿假单胞菌多重耐药机制中起着主导作用。我们下一步将探讨多重耐药铜绿假单胞菌耐药的分子机制并进行菌株的同源性分析。铜绿假单胞菌引起的感染是难治的，但是近年来秦金喜等［10］发现其产生的抗菌物质绿脓素对光滑念珠菌和细菌体外有抑菌活性。

凭经验治疗，不重视药敏试验，不合理使用抗菌药物，是造成铜绿假单胞菌耐药日趋严重的主要原因。因此，回顾性分析相关危险因素，制定监控与感染管理措施，有针对性地提出防控对策是至关重要的。我院加强了检验科、感染控制处和信息中心多科室合作，增加了铜绿假单胞菌感染的监测力度，若出现疑似铜绿假单胞菌院感病例，网上直接预警并通知临床科室，感染控制处人员亲自现场指导如何消毒和患者隔离。感染患者和医务人员均实施标准预防措施，若无条件单间隔离的，尽量相同感染的安置在同一病室。同时做好环境清洁消毒，要求医务人员严格执行手卫生规范。从而减少了医院内获得性铜绿假单胞菌感染的发生。

［1］ Parsek MR，Singh PK.Bacterial biofilms：an emerging link to disease pathogenesis［J］.Annu Rev Microbiol，2003，57：677－701.

［2］ Medell M，Hart M，Marrero O，et al.Clinical and microbiological characterization of pneumonia in mechanically ventilated patients［J］.Braz J Infect Dis，2012，16（5）：442－447.

［3］ 张译心，王艳，宋杰.153株铜绿假单胞菌感染分布及耐药性分析［J］.中华全科医学，2013，11（7）：1113－1114.

［4］ 莫善颖，李梦薇，韦柳华，等.铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2013，23（22）：5553－5555.

［5］ 肖永红，沈萍，魏泽庆，等.Mohnarin 2011年度全国细菌耐药监测［J］.中华医院感染学杂志，2012，22（22）：4946－4952.

［6］ 时东彦，王鑫，戚小敏，等.2005年呼吸科和RICU病原菌分布及耐药谱型［J］.河北医科大学学报，2008，29（3）：391－394.

［7］ 时东彦，宋文杰，李继红，等.2011年临床分离菌的分布及耐药性监测［J］.中国感染与化疗杂志，2013，13（4）：285－288.

［8］ 黄燕新，姜朝新，王陈龙，等.464株铜绿假单胞菌的耐药性分析及治疗［J］.国际检验医学杂志，2013，34（6）：752－754.

［9］ 庞众多，李依萍，鲁彦.102株铜绿假单胞菌的分布和耐药性分析［J］.国际检验医学杂志，2014，35（8）：1073－1074.

［10］ 秦金喜，李仲兴，袁欣，等.铜绿假单胞菌对光滑念珠菌的体外抑菌活性研究［J］.临床荟萃，2012，27（7）：574－576.

（本文编辑：刘斯静）

Clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa resistance analysis and monitoring management

WEI Hong-lian，WANG Chong，SU Jun-hua，SHI Dong-yan*
（Department of Laboratory Medicine，the Second Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuan g 050000，China）

ObjectiveTo retrospectively analyze 418 clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa，observe the department distribution and drug resistance characteristics，and take effective control for multi-drug resistant P.aeruginosa.MethodsVitek 2 compact automated microbial identification and susceptibility for identification and susceptibility testing were used.Data were analyzed according to CLSI 2012 breakpoints with WHONET 5.6 sofeware.Results418 isolates of P.aeruginosa were mainly from the respiratory medicine department，ICU and neurosurgery department.The samples from the sputum of respiratory tract were predominant，representing 78.72%.The drug resistance of P.aeruginosa to Amikacin was the lowest as 4.79%，followed by Cefepime and Ceftazidime，respectively，25.36%and 29.19%，and the rest of antimicrobial drug resistance rate over 30%，of which the highest Aztreonam was 50.72%.ConclusionP.aeruginosa is mainly from respiratory tract specimens higher resistance.Antimicrobial resistance surveillance plays an important role in controlling hospital infection.The monitoring and management measures should be strengthened.

Pseudomonas aeruginosa；anti-bacterial agents；drug resistance

R378

A

1007-3205（2015）01-0045-03

2014－07－17；

2014－08－13

魏宏莲（1975－），女，河北深州人，河北医科大学的第二医院副主任检验师，医学学士，从事临床微生物耐药性研究。

*通讯作者。E-mail：shidongyan73＠126.com

10.3969／j.issn.1007-3205.2015.01.017