医院制剂“平喘固本胶囊”质量标准的研究

敬玉锡 冯仔驹 贾天贵 周瑞君 周 姗 陈圣堂

（广元市中医医院，四川 广元 628000）

医院制剂“平喘固本胶囊”质量标准的研究

敬玉锡 冯仔驹 贾天贵 周瑞君 周 姗 陈圣堂

（广元市中医医院，四川 广元 628000）

目的研究建立医疗机构专科新制剂“平喘固本胶囊”的质量标准。方法采用理化鉴别、显微鉴别、TLC、HPLC四个方面对其进行质量控制。结果经试验建立的质量标准，方法简便可行，重现性好。结论可很好地控制平喘固本胶囊的内在质量。

平喘固本胶囊；质量标准；薄层色谱；高效液相色谱

平喘固本胶囊是广元市中医医院制剂室新研制的中药成分制剂，由五味子、沉香、白果、蛤蚧、熟地等22味中药加工制成，对于慢性阻塞性肺气肿的病患有很好的治疗效果。为有效地控制其内在质量，在制备工艺确定的基础上，需要对其质量标准的起草和制定进行系统研究，最终对处方中原粉入药的中药建立了理化鉴别、显微鉴别项；对处方中提取部分的中药采用TLC、HPLC法建立质量标准项，这里介绍对样品中黄芪、甘草、熟地黄进行的薄层色谱鉴别和对其主要药味丹参所含的成分丹酚酸B的含量测定。

1 材料与方法

试验用样品由广元市中医医院制剂室提供，方法学研究样品为121122、121225、130517、130620、130722、130821。

2 黄芪的薄层鉴别

采用黄芪甲苷为对照品（中检所110781-200613），进行薄层色谱鉴别研究。

2.1 样品处理：取本品6 g，加水50 mL超声提取30 min，离心，取上清液滤过，滤液加水饱和正丁醇萃取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用60 mL氨试液洗涤3次，取正丁醇液蒸干，残渣加20 mL甲醇溶解，滤过，滤液加在中性氧化铝柱上，用100 mL 40%甲醇洗脱，洗脱液蒸干，残渣加0.5 mL甲醇溶解，作为供试品溶液。

2.2 阴性对照处理：取按处方比例及制备工艺制备的不含黄芪的阴性对照样品，同法制成阴性对照溶液。

2.3 对照品溶液：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 mg/mL的溶液。

2.4 展开剂：三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下层溶液。

2.5 显色剂：10%硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰，日光与紫外光灯（365 nm）下检视。

2.6 点样：考察不同薄层板情况。实验结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光与紫外光灯（365 nm）下显相同颜色斑点，显色清晰。而阴性对照溶液无此斑点。此条件下，分离度好，耐用性好。

3 甘草的薄层鉴别

采用甘草对照药材为对照品（中检所120904-200512），进行薄层鉴别研究。

3.1 样品处理：取本品5 g，加水20 mL，使溶解，离心，取上清液过滤，滤液通过DA-201型大孔吸附树脂柱（内径l cm，柱高12 cm，湿法装柱），用水50 mL洗至近无色，再用30 mL 60%乙醇洗脱，洗脱液蒸干，残渣加2 mL甲醇溶解，上清液作为供试品溶液。

3.2 阴性对照处理：取按处方比例及制备工艺制备的不含甘草的阴性对照样品，同法制成阴性对照溶液。

3.3 对照品溶液：取甘草对照药材0.5 g，加水30 mL，加热回流30 min，滤过，滤液浓缩至20 mL，同法制成对照药材溶液。

3.4 展开剂：正丁醇-乙醇-浓氨（10∶4∶3）。

3.5 显色剂：10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，在日光灯及紫外光灯（365 nm）下检视。

3.6 点样：考察不同薄层板情况。实验结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光与紫外光灯（365 nm）下显相同颜色斑点，显色清晰，而阴性对照溶液无此斑点。分离度好，耐用性好。

4 熟地黄的薄层鉴别

采用熟地黄对照药材为对照品（中检所121196-200804），进行薄层鉴别研究。

4.1 样品处理：取本品4 g，加40 mL水，煎煮30 min，放冷后滤过，滤液用60 mL乙酸乙酯提取2次，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1 mL溶解，作为供试品溶液。

4.2 阴性对照处理：取按处方比例及制备工艺制备的不含熟地黄的阴性对照样品，同法制成阴性对照溶液。

4.3 对照品溶液：取熟地黄对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。

4.4 展开剂：甲苯-乙酸乙酯（1∶1）。

4.5 显色剂：105 ℃加热至斑点显色清晰，在日光灯下检视。

4.6 点样：考察不同薄层板情况。实验结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光灯下显相同颜色斑点，显色清晰，而阴性对照溶液无此斑点。分离度好，耐用性好。

5 样品中丹酚酸B的含量测定

5.1 仪器及色谱条件。仪器：Agilent1260-DAD检测器；色谱条件：①色谱柱：Xbridge C18（5 μm，250 mm×4.6 mm）；②流动相：乙腈-0.1%甲酸溶液（22∶78）；③检测波长：256 nm；④柱温：30 ℃；⑤流速：1.0 mL/min；⑥进样量10 μL。

5.2 对照品溶液的制备：取丹酚酸B对照品（中检所111562-201111，含量98.2%，无需处理）适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含70 μg的溶液，即得。

5.3 供试品溶液的制备：取本品内容物，约2.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率500 W，频率40 kz）30 min，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

5.4 阴性对照溶液取按处方比例及制备工艺制备的不含丹参的阴性对照样品，照5.3项下操作，同法制成阴性对照溶液。

5.5 精密度试验：取同一对照品溶液5 μL，重复进样6次，测定丹酚酸B峰面积。见表1。试验结果表明：仪器的精密度良好。

表1 精密度试验结果（n=6）

5.6 稳定性考察：将新配制的对照品溶液5 μL及新制备的供试品溶液

10 μL，精密进样，测定峰面积，以后每间隔一定时间测定1次，记录其色谱峰面积变化。结果见表2、3。

表2 对照品溶液稳定性试验结果

结果表明：对照品溶液的RSD＜2.0%，说明对照品溶液在24 h内稳定性良好。

表3 样品溶液稳定性试验结果

结果表明：样品溶液的RSD＜2.0%，说明样品溶液在24 h内稳定性良好。

5.7 重复性考察：取同一批号本品粉末2.5 g，精密称定，分别取6份，按拟定方法制备并测定含量，见表4。

表4 重复性考察结果

样品重复测定6次的结果RSD＜2.0%，证明本方法重复性良好。

5.8 加样回收试验：精密称取本品（丹酚酸B含量为1.36 mg/g）2.5 g，共6份，分别精密加入丹酚酸B对照品溶液（浓度为0.1355 mg/mL）1mL，挥干溶剂，按照拟定方法分别制成供试品和对照品溶液，注入对照品溶液5 μL，供试品溶液10 μL，测定含量，计算回收率。见表5。

表5 丹酚酸B加样回收试验结果

实验结果表明：丹酚酸B平均加样回收率分别为96.3%，RSD为1.47%。说明本方法回收率良好。

5.9 六批样品含量测定：采用正文拟定的含量测定方法，测定6批平喘固本胶囊样品中丹酚酸B的含量，结果见表6。六批平喘固本胶囊中丹酚酸B的含量为1.28～1.41 mg/g，考虑大生产中丹参酚酸类成分提取效率不高，以平均值下浮20%计算，暂定本品含丹参以丹酚酸B计不得少于1.0 mg/g。

表6 样品的含量测定

6 讨 论

6.1 平喘固本胶囊是由五味子、沉香等22味药组成的中药复方制剂，药味多，成分复杂，单一的质控标准不足以控制成药的内在质量，我们采用理化鉴别、显微鉴别、TLC、HPLC四种方法对其进行质量控制[1]，达成全面控制质量的目的。

6.2 薄层色谱鉴别最好采用硅胶G可裁板，重复性好，使用方便。

6.3 含量测定在选择被测成分时要根据制作工艺适当选择，其中丹参的提取是水提，故在样品中，脂溶性成分丹参酮ⅡA不合适，选择水溶性成分的酚酸B作为被测成分，结果较为满意。

[1]国家药典委员会.中国药典.2010年版一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:1139-1141.

R282

B

1671-8194（2015）01-0053-02