淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产40例临床分析

杜晓丽

淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产40例临床分析

杜晓丽①

目的：探讨采用淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产（RSA）的临床疗效。方法：将临床筛查确诊为封闭抗体缺乏所致的复发性流产患者80例随机分为治疗组和对照组各40例，治疗组采用其配偶外周血淋巴细胞进行主动免疫治疗（LIT），对照组采用传统保胎治疗（黄体酮加hCG），比较两组的妊娠结局。结果：治疗组妊娠成功32例，成功率为80％，其中足月分娩16例（50％），妊娠中晚期16例，8例流产；对照组妊娠成功16例，成功率为40％，其中足月分娩6例（37.5％），妊娠中晚期10例，24例流产，两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。两组患者免疫治疗的结果为，封闭抗体转为阳性患者34例，其中妊娠成功率为85.3％（29例）；封闭抗体为阴性者6例，妊娠成功率为33.3％（2例），两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产安全、有效，具有可靠的临床应用价值。

封闭抗体； 复发性流产； 淋巴细胞； 免疫治疗

复发性流产（Recurrent Spontaneous Abortion，RSA）患者往往经历了多次妊娠后的自然流产（连续或不连续流产次数≥2次）[1]。是一种常见的妊娠期并发症，发生率占育龄妇女的1％～5％。RSA可有单一病因或多病因引发，其病因复杂性较高，已知引起复发性流产的常见原因有：染色体异常、生殖系统机能紊乱及结构畸形、内分泌失调、妇科感染等，此外应强调，近年来发现封闭抗体缺乏也会导致RSA。相关文献表明，复发性流产原因不明患者达到52％以上，其中与免疫因素有关的RSA患者又达到79％以上[2]。目前，治疗RSA的方法中，以淋巴细胞主动免疫为主。国外对主动免疫治疗RSA的作用机制进行了研究，尚未完全阐明。我国也已经将主动免疫治疗RSA应用于临床中，相关报道显示，患者再次妊娠成功率不尽相同[3-4]。选择2010年12月-2012年12月自然流产或胚胎停育2次或2次以上的RSA患者（自愿参与治疗），经临床筛查证实40例患者均由于缺乏封闭抗体缺乏而致RSA，并对40例患者进行淋巴细胞免疫治疗，疗效明显，详细报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取深圳仁爱医院2010年12月-2012年12月不明原因早期自然流产（包括生化妊娠，IVFET种植失败）及胚胎停育2次或2次以上的RSA患者（自愿参与治疗）80例，经临床筛查证实患者均由于缺乏封闭抗体缺乏而致的RSA，40例患者采用淋巴细胞主动免疫进行治疗（LIT）。另40例作为对照组，对照组采用传统保胎治疗（黄体酮加hCG）。治疗组年龄23～41岁，平均28.3岁；2次自然流产者21例（其中有2例2次IVF-ET种植后流产者），3次自然流产者6例，4次自然流产者3例，5次自然流产者2例，5次以上自然流产者2例，2～3次胚胎停育者5例，孕3胚胎停育2产1者1例。对照组年龄19～43岁，平均29.1岁，有2次自然流产者29例，3次流产者11例。两组一般资料比较差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 流产的病因筛查及方法 本研究中，要求所有研究对象签署知情同意书。所有RSA患者符合以下条件：（1）封闭抗体检查阴性；（2）生化妊娠及早期（12 W前）自然流产史≥2次，或胚胎停育≥2次，或自然流产+胚胎停育≥2次；（3）夫妇双方染色体检查正常，无家族遗传病史；（4）双方行TORCH（包括巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒和弓形体）、梅毒、HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性；（5）生殖道衣原体、支原体、淋球菌等检查均为阴性；（6）内分泌检查、甲状腺功能及空腹血糖正常；（7）抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体、抗心磷脂抗体均为阴性；（8）排除生殖道畸形和形态学异常；（9）分析男方精液，各项指标显示正常；（10）治疗前，所有患者未使用过影响免疫功能的药物。

1.2.2 治疗方法 对照组采用传统保胎治疗（黄体酮加hCG）。治疗组采用淋巴细胞主动免疫（LIT）。治疗方法：无菌下抽取患者丈夫或血缘亲属或无关自愿健康个体静脉血20 mL，肝素抗凝，在无菌条件下分离淋巴细胞，将淋巴细胞悬液装于注射器中，给予患者两前臂内侧行多点皮下或皮内注射，每侧注射3～4点。2～3周治疗1次，4～6次为一疗程。治疗一疗程后复查封闭抗体，若已转为阳性，要求3～5个月内尽快妊娠。确诊妊娠后，再加强LIT一疗程（2～3周1次，共4次）至妊娠14～16周。若转阳后半年内仍未能妊娠，应每隔8～10周巩固一次LIT，以使封闭抗体不转阴。部分复查封闭抗体阴性者，再加强LIT治疗2次，若仍未转阴也可考虑备孕。

1.3 统计学处理 采用SPSS 17.0软件对本次研究所有数据进行统计学分析，计数资料用 χ2检验，P＜0.05认为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组妊娠成功率比较 治疗组妊娠成功32例，8例流产，成功率为80％；对照组妊娠成功16例，24例流产，成功率为40％，两组妊娠成功率比较差异有统计学意义（ χ2=12.03，P=0.0005），治疗组明显优于对照组。详见表1。

表1 两组妊娠成功率比较

2.2 封闭抗体阳性组与阴性组妊娠结局比较 主动免疫治疗后，34例患者封闭抗体转为阳性，其中妊娠成功29例，成功率为85.3％；6例封闭抗体仍为阴性者，妊娠成功2例，成功率为33.3％，两组比较差异有统计学意义（ χ2=5.20，P=0.022）。详见表2。

表2 封闭抗体阳性组与阴性组妊娠结局比较

3 讨论

正常孕妇的血清中，存在一种特异性IgG抗体（抗配偶淋巴细胞的），现代生殖免疫学证实，该抗体可抑制MLR（淋巴细胞反应）。封闭母体淋巴细胞的细胞毒作用，可作用于胚胎滋养层，使得辅助T细胞对胎儿抗原抑制物的识别无法正常完成；同时，母亲免疫系统不会攻击胚胎，也是由于封闭母体淋巴细胞的作用[5]。MIF，即封闭抗体，是封闭同种抗原刺激淋巴细胞产生的巨噬细胞移动抑制因子，成为BA或称为Antipaternallymphocyte anti body（简称为APLA）。国外相关研究表明，缺乏封闭性抗体与复发性流产存在密切的关系。本次研究中，使用了淋巴细胞主动免疫治疗，该方法对RSA治疗的效果较好，但作用机制不明。众多学者对复发性流产的治疗进行了持续的研究，黄芳等[6]通过黄酮体及hCG联合淋巴细胞主动免疫对42例复发性流产患者进行了观察，认为该方案治疗黄体功能不全导致的复发性流产患者的有效率达100％，治疗封闭抗体阴性的复发流产患者后的妊娠率达57.89％，并认为hCG及黄酮体联合淋巴细胞主动免疫是治疗复发性流产患者的可靠方案；谭玉清等[7]采用丙种球蛋白联合淋巴细胞免疫对84例复发性流产患者进行了治疗，认为淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白静脉滴注治疗复发性流产患者的妊娠成功率在90％以上，因此认为该方案具有可靠的应用价值。

对于封闭抗体阴性者，主要采用淋巴细胞免疫治疗（LIT），等到患者体内封闭抗体升高时进行受孕，妊娠的成功率可达到80％～90％[8]。Beer和Tayor于二十世纪七十年代创立，并于1978年开始应用于RSA的一种免疫疗法。对同种免疫型RSA患者采用丈夫或他人淋巴细胞进行同种致敏治疗，抑制母胎间的细胞性免疫性排斥反应，减少流产率。梁宝珠等[9]对100例确诊的复发性流产患者进行分析，认为免疫治疗后，封闭抗体阳性率升高，从封闭抗体阳性者妊娠成功率方面将，再次妊娠患者成功率明显高于阴性者（P＜0.05），从而认为免疫治疗后可以增加封闭抗体的产生，有利于胎儿存货，通过提高妊娠成功率。另外研究发现封闭抗体阴性者再次流产的发生率在42.26％，因此患者在未产生封闭抗体的前提下接受免疫治疗并继续妊娠的再次流产风险相当大。

临床医学界认为，人类白细胞抗原Th1/Th2失衡及组织相容性与复发性流产存在相关性，Th2细胞是在正常妊娠情况下的主要细胞因子，而复发性流产患者的血清中Th1因子是主要的优势细胞，因此可以通过配偶淋巴细胞主动免疫的方式对复发性流产患者进行治疗，通过提高母体Th2型细胞因子，控制Th1型细胞因子，增强母体的免疫耐受[10]。我国的彭桂元等采用淋巴细胞主动免疫法治疗991例RSA患者，治疗效果明显，患者妊娠成功率大大提高，可达到80％以上，提示在RSA治疗方面，淋巴细胞主动免疫治疗具有较好疗效[11]。本研究结果显示，治疗组和对照组的妊娠成功率分别为80％和40％，观察组明显优于对照组（P＜0.01）；本次主动免疫治疗后的结果与彭桂元等[12]相关报道的研究结果基本一致。

为此，应将淋巴细胞主动免疫治疗应用于RSA（缺乏封闭抗体）的临床治疗中，患者预后免疫反应很强，基本未出现不良反应，且妊娠成功率显著提高，该方法具有较高的临床应用价值。

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The Investigation of the Clinical Efficacy of Recurrent Spontaneous Abortion Using Lymphocytes Active Immunotherapy/

DU Xiao-li.//Medical Innovation of China，2015，12（11）：131-133

Objective：To investigate the clinical efficacy of recurrent spontaneous abortion （RSA） using lymphocytes active immunotherapy.Method：80 cases of patients with RSA which were diagnosed by blocking antibody screening were randomly divided into the treatment group（40 patients） and the control group （40 patients）.The patients in the treatment group were treated by LIT with peripheral blood lymphocytes，the patients in the control group with traditional miscarriage treatment（progesterone plus hCG），then the pregnancy outcomes were compared.Result：In the treatment group，32 cases of pregnancy were treated successfully， and the success rate was 80％，including 16 patients with full-term delivery （50％），16 cases with late pregnancy， 8 cases of abortion.In the control group，there were 16 cases with successful pregnancy，the success rate was 40％，including six cases with term birth（37.5％），10 cases with late pregnancy，24 cases of abortion.By comparison，there was significant difference in the two groups（P＜0.01）.After immunotherapy，34 patients became positive blocking antibodies，including 29 cases of pregnancy success，a success rate of 85.3％；six cases of blocking antibodies were still negative， two cases with pregnancy success，the success rate was 33.3％，respectively，the difference there was statistically significant（P＜0.05）.Conclusion：Lymphocyte active immunotherapy which is used to treat RSA is safe，effective，and reliable clinical value.

Blocking antibodies； Recurrent spontaneous abortion； Lymphocytes； Immunotherapy

10.3969/j.issn.1674-4985.2015.11.046

2014-11-29） （本文编辑：陈丹云）

①广东省深圳仁爱医院 广东 深圳 518048

杜晓丽

First-author’s address：Shenzhen Ren’ai Hospital，Shenzhen 518048，China