血清中抗-CCP抗体及RFs检测观察甲氨喋呤治疗RA的疗效

张莉霞 俞颖 虞玉群

血清中抗-CCP抗体及RFs检测观察甲氨喋呤治疗RA的疗效

张莉霞 俞颖 虞玉群

目的 探讨使用甲氨喋呤（MTX）治疗的类风湿性关节炎患者外周血清中抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体与类风湿因子（RFs）水平变化。方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA），检测73例类风湿关节炎（RA）患者治疗前及单剂量口服MTX治疗3个月后，外周血清中抗-CCP抗体及不同类型（IgA、IgM和IgG）RFs的表达情况。结果 患者经过MTX治疗3个月后，外周血清中抗-CCP抗体及IgA、IgM型RFs表达量明显下降（P＜0.05），而IgG型RFs表达量无显著性差异（P＞0.05）。结论 类风湿关节炎患者血清中抗-CCP抗体及RFs的IgA、IgM型水平可用于MTX疗效评估，相关抗体的检测有助于类风湿关节炎预后评估。

类风湿性关节炎 甲氨喋呤 抗环瓜氨酸肽抗体 类风湿因子

类风湿性关节炎（RA）是一种常见的自身免疫性疾病，其病理特征为骨关节独特的慢性损伤［1］，在全世界大约有1%的患者患有此病，其中约75%是女性患者［2］。甲氨喋呤（MTX）作为抗代谢类药物，由于其有效且相对安全的特性，自80年代中期以来已广泛用于对类风湿性关节炎的临床治疗［3，4］。抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体和类风湿因子（RFs）作为类风湿性关节炎的特异性因子，其在患者外周血清中的表达量可作为该疾病诊断标准［5］。本资料通过检测经MTX治疗的患者用药前后血清中抗-CCP抗体和RFs表达水平，探讨抗-CCP抗体和RFs作为观察MTX治疗效果指标的可能性。

1 临床资料

1.1 一般资料 从2010年8月至2011年8月于本院住院治疗的RA患者73例，临床表现均为手指关节、腕关节及膝关节肿胀疼痛。其中男21例，女52例；年龄27～71岁，平均（51.9±10.3）岁。病程0.5～25.5年，平均（7.7±6.1）年。所有病例均符合1987年美国风湿病学会修订的RA分类诊断标准［6］。

1.2 给药方案 口服甲氨蝶呤 （中国上海信宜药厂，2.5mg/片），10mg/次，1次/周，连用12周，治疗时未合并其他用药。分别在治疗前和治疗后（12±1）周检测类风湿性关节炎患者外周血清中抗-CCP抗体和RFs的含量。

1.3 方法 （1）抗-CCP抗体检测：所有患者均抽取清晨空腹静脉血5ml，采用ELISA法检测血清中抗人CCP抗体浓度，试剂采用上海裕平生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒，严格按说明书进行操作。（2）RFs的检测：所有患者均抽取清晨空腹静脉血5ml，采用ELISA法检测血清中IgA、IgM和IgG型类风湿因子含量，试剂采用上海研谨生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒，严格按说明书进行操作。

1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件。计量资料以（x±s）表示。所有统计检验采用配对t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 类风湿性关节炎患者MTX用药前后血清中抗-CCP抗体和RFs类风湿因子浓度变化 见表1。

表1 RA患者MTX治疗前后外周血清中抗-CCP抗体、RFs抗体水平比较 （x±s）

2.2 RA患者MTX治疗前后临床症状的变化 经甲氨喋呤治疗3个月后，2个关节胀痛症状患者数下降27%，3个关节胀痛症状患者数下降28%，4个关节胀痛症状患者数下降15%。

3 讨论

目前全世界约有50万例类风湿性关节炎患者服用甲氨喋呤［7］，然而现行对该药物疗效的评价指标依靠临床表现，缺乏一个可量化的生化指标。在国外的相关研究中，最早有研究小组提出将IgM型的RF作为衡量MTX药效的指标，并证实经MTX治疗的患者，外周血清中由单核细胞分泌的IgM型RF滴度有明显的下降［8］；亦有实验室试图研究抗-CCP抗体与MTX疗效之间的关系，却由于样本量有限（n=20），未得出二者具有相关性的结论［6］；而关于IgA和IgG型RF与MTX治疗的相关性研究更为复杂［9］。

本资料结果显示，经甲氨喋呤治疗3个月后，RA患者外周血清中抗-CCP抗体、IgA及IgM型RFs的滴度明显下降，差异有显著性；而IgG型RFs的滴度却无明显的变化，说明甲氨喋呤的治疗对改善患者临床症状有明显疗效，临床可通过实验室检测“抗-CCP抗体-IgA RF-IgM RF”对患者疗效作量化评估。

参考文献

1 Tobon G．J．,P． Youinou,A． Saraux．The environment, geoepidemiology, and autoimmune disease: Rheumatoid arthritis． J Autoimmun,2010,35(1):10～14．

2 Gabriel S．E．The epidemiology of rheumatoid arthritis． Rheum Dis Clin North Am,2001,27(2): 269～281．

3 Bannwarth B．,Labat L,Moride Y,et al．Methotrexate in rheumatoid arthritis:An update． Drugs, 1994,47(1): 25～50．

4 Weinblatt M．E．,A．L． Maier, J．S． Coblyn． Low dose leucovorin does not interfere with the efficacy of methotrexate in rheumatoid arthritis: an 8 week randomized placebo controlled trial． J Rheumatol,1993,20(6): 950～952．

5 De Rycke L．,Peene I,Hoffman IE,et al．Rheumatoid factor and anticitrullinated protein antibodies in rheumatoid arthritis: diagnostic value, associations with radiological progression rate, and extra-articular manifestations． Ann Rheum Dis, 2004,63(12):1587～1593．

6 Spadaro A．,V． Riccieri．Methotrexate effect on anti-cyclic citrullinated peptide antibody levels in rheumatoid arthritis．Ann Rheum Dis,2005, 64(8): 1241～1242．

7 Kremer J．M．Toward a better understanding of methotrexate．Arthritis Rheum,2004,50(5): 1370～1382．

8 Alarcon G．S．,Schrohenloher RE,Bartolucci AA, et al．Suppression of rheumatoid factor production by methotrexate in patients with rheumatoid arthritis． Evidence for differential influences of therapy and clinical status on IgM and IgA rheumatoid factor expression． Arthritis Rheum, 1990,33(8):1156～1161．

9 Moore S．,Ruska K,Peters L,et al．Associations of IgA and IgA-rheumatoid factor with disease features in patients with rheumatoid arthritis．Immunol Invest,1994,23(6-7):355～365．

310006 浙江省中医院检验科