清咽片的薄层鉴别研究

贺 婕，张爱荣，吴成军

（山西华元医药集团有限公司，山西太原 030032）

清咽片收载于《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂》第十七册中，是由桔梗、硼砂、寒水石、青黛、冰片、薄荷脑、诃子、甘草、甘草霜9味中药制成的片剂。具有清凉解热、生津止渴的功效，适用于咽喉肿痛、声音嘶哑、口干舌燥、咽下不利等症。原部颁标准中只有一项青黛的薄层鉴别，为了更好地控制其内在质量，保证产品疗效，我们对处方中其余药材进行研究，建立冰片、薄荷脑、诃子、甘草、甘草霜的薄层鉴别方法，方法简便、灵敏、准确、专属性强，可用于清咽片的质量控制。

1 材料与方法

1.1 实验仪器

ZF-2三用紫外仪（上海市安亭电子仪器厂），AL204电子天平（Mettler公司）。

1.2 实验材料

冰片对照品（批号110743-200303），薄荷脑对照品（批号110728-200506），甘草酸铵盐对照品（批号110731-201116），诃子对照药材（批号121015-201004），甘草对照药材（批号 120904-200410），以上对照品和对照药材均购于中国食品药品检定研究院；其他试剂均为分析纯；清咽片由山西天星制药有限公司提供。

1.3 实验方法

1.3.1 冰片、薄荷脑 取清咽片10片，除去包衣，研细，加乙醚20mL，密塞，冷浸30min，滤过，滤液低温挥干，残渣加三氯甲烷1mL使溶解，作为供试品溶液。分别取冰片对照品、薄荷脑对照品，加三氯甲烷制成1mg/mL的对照品溶液。另取缺冰片、薄荷脑阴性对照样品，同法制成阴性对照溶液。

1.3.2 甘草、甘草霜 取清咽片15片，除去包衣，研细，加乙醚30mL，加热回流1h，滤过，弃去醚液，药渣加甲醇30mL，加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次15mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇5mL使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取甘草酸铵盐对照品，加甲醇制成5mg/mL的溶液，作为对照品溶液。取缺甘草、甘草霜阴性对照样品，同法制成阴性对照溶液。

1.3.3 诃子 取清咽片5片，除去包衣，研细，加无水乙醇30mL，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至1mL，作为供试品溶液。另取诃子对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。再取没食子酸对照品，加无水乙醇制成1mg/mL的溶液，作为对照品溶液。取缺诃子阴性对照样品，同法制成阴性对照溶液。

2 结果

2.1 冰片、薄荷脑

照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）实验，吸取 1.3.1中 4种溶液各 10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60℃～90℃）-甲苯-乙酸乙酯（7∶4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视［1-4］。供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置，显相同颜色的斑点，阴性对照液无干扰，见图1。

2.2 甘草、甘草霜

照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录 VIB）实验，吸取1.3.2中4种溶液各2μL，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15∶1∶1∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视［5-7］。供试品色谱中，与对照药材和对照品色谱相应的位置，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照液无干扰，见图2。

2.3 诃子

照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）实验，吸取1.3.3中4种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（7∶10∶3∶4）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液［8-9］。供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置，显相同颜色的斑点，阴性对照液无干扰，见图3。

图1 清咽片中冰片、薄荷脑的TLC

图2 清咽片中甘草、甘草霜的TLC

图3 清咽片中诃子的TLC

3 讨 论

我们首先对本处方中桔梗的薄层鉴别方法进行了多次研究，通过筛选不同前处理方法、固定相、展开系统，均无法达到有效的分离，阴性干扰大，专属性不强。

本实验对甘草薄层鉴别方法进行摸索时，按照药典中的方法甘草酸铵对照品未出现荧光斑点，怀疑是对照品未展开或显色不够。通过展开相和紫外波长的对比，发现调整展开相甘草酸铵对照品可出现荧光斑点且显色清晰，但是药材和样品分离效果不佳，展开成一条线。254nm波长下甘草酸铵斑点清晰，但是药材其余鉴别斑点不明显，故最终确定此方法。经过反复实验，发现对照品溶液中甘草酸铵不易溶解且易析出，造成点样时溶液浓度低，我们加入少量的冰醋酸后解决此问题。此外，105℃加热显色时，需要注意加热时间，加热时间太短，显色效果不好，斑点不清晰；加热时间过长，板烤糊也不易观察。

本实验对清咽片中冰片、薄荷脑、甘草、甘草霜、诃子5味药材进行薄层鉴别研究，方法简便、专属性强、重现性好，可作为清咽片的质量控制指标。在原部颁标准仅有青黛药材鉴别的基础上，进一步增强了该品种的质量可控性，也为类似制剂或成分的提取、鉴别和含量测定提供了参考依据。

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