运脾消食颗粒对厌食症大鼠模型血清八肽胆囊收缩素、锌含量影响的研究

杜晨光，丁培杰，曹 颖，徐丁洁，郑彩慧，白素芬，柳月娟，董玉山

（河北联合大学中医学院，河北唐山 063000）

厌食症是临床中常见的小儿消化系统疾病，表现为非疾病因素而出现较长时期的见食不贪、食欲不振、甚则拒食，多见于1～6岁的儿童，城市发病率高于农村，一年四季均可发病，尤以夏末秋初多见。厌食症对小儿的生长发育、营养状况、智力发展均有影响。长期厌食，可使小儿摄取营养物质不足，不能满足迅速生长发育的需要，导致小儿营养不良、贫血、佝偻病及免疫力低下，出现反复呼吸道感染，严重影响小儿身体健康［1］。运脾消食颗粒为治疗厌食症的经验方，笔者导师焦平教授临床应用该方20余年，疗效肯定。本实验主要探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）、锌（Zn）在小儿厌食症发病过程中发挥的作用及该药的治疗机制，为新药开发和临床安全用药提供一定的科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 选用SPF级健康SD大鼠，日龄35～40d，体重（60±10）g，雌雄兼用，共 60只。由天津山川红实验动物科技有限公司提供，合格证号：SCXK（2009-001）。

1.1.2 药品及试剂 运脾消食颗粒：由焦三仙、炒白术、半夏、陈皮、鸡内金、胡黄连、佩兰等中药组成。所需中药材均购自同仁堂药店，再由我院制剂室水煎浓缩，加辅料搅拌成膏，烘干粉碎，再用滚动制粒机制成颗粒，封装机分装成袋，每袋9g。江中健胃消食片（小儿）：购自唐山市唐人药店，江中药业股份有限公司生产，批号1401006。CCK-8放免试剂盒（北京科美东雅生物技术有限公司提供，批号20140611）。血清Zn试剂盒（上海信裕生物科技有限公司提供，批号 20140801）。

1.1.3 特制高蛋白高脂饲料（以下简称特制饲料）用奶粉、鱼松、豆粉、玉米粉、白糖、鲜鸡蛋、鲜肥肉，按1∶1∶2∶1∶1∶2∶2比例配制，所用配料均购自家乐福超市。

1.1.4 实验仪器 放射免疫分析仪、半自动生化分析仪、台式高速低温离心仪、电子分析天平、常用手术器械、试管等。

1.2 实验方法

将60只SD大鼠适应性喂养3d，然后随机分为正常组、模型对照组（模型组）、江中健胃消食片组（消食片组）、运脾消食颗粒小剂量组（小剂量组）、运脾消食颗粒大剂量组（大剂量组）5组，每组12只。采用病因模拟法造模［2］，正常组用常规鼠饲料喂养，其余4组用特制饲料喂养。所有动物均单笼喂养，自由进食饮水，每日记录摄食量及体质量，以造模大鼠平均摄食量低于正常组20%～30%为造模成功。造模成功后，小剂量组和大剂量组分别灌服运脾消食颗粒12.5g/（kg·d）、25g/（kg·d），消食片组灌服江中健胃消食片水溶剂25g/（kg·d），正常组和模型组灌服等体积（均为2mL）蒸馏水。各组每日灌胃1次，连续20d。于末次给药后次日，断颈采全血2mL盛于一次性塑料试管内，每只试管采血前均按组做好标记。待5组大鼠采血完毕，将盛血的试管分别置于离心机中以3000r/min离心15min，取血清，-20℃保存待测。采用放免法检测血清CCK-8含量，半自动生化分析仪检测血清Zn含量。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 各组动物摄食量、体质量变化情况比较

结果见表1，表2。

表1 各组动物体质量变化情况比较 （g，±s）

表1 各组动物体质量变化情况比较 （g，±s）

注：与正常组比较，1）P<0.01；与模型组比较，2）P<0.05，3）P<0.01；与消食片组比较，4）P<0.05

组别 第1天 第7天 第14天 第21天 第28天正常组 64.35±10.96102.44±12.02139.71±13.80 161.37±7.87 188.64±13.22模型组 65.21±9.34 104.22±11.11131.96±9.481） 149.04±11.31 159.57±10.38消食片组 64.27±13.65102.82±10.94132.05±9.13 155.67±9.252） 174.42±12.803）小剂量组 66.51±9.48 104.30±11.86137.27±10.732） 167.00±12.443）4） 189.14±11.983）4）大剂量组 64.89±7.94 103.98±8.25 136.94±11.572） 168.50±11.843）4） 188.03±10.353）4）

表2 各组动物摄食量变化情况比较 （g，±s）

表2 各组动物摄食量变化情况比较 （g，±s）

注：与正常组比较，1）P<0.01；与模型组比较，2）P<0.05，3）P<0.01；与消食片组比较，4）P<0.05，5）P<0.01

组别 第1天 第7天 第14天 第21天 第27天正常组 11.37±2.5614.11±2.24 18.41±3.06 23.78±2.88 28.36±3.45模型组 10.78±1.9011.01±2.381） 13.55±2.47 14.11±1.73 16.59±2.76消食片组 11.20±3.2111.93±2.221） 14.76±3.12 17.93±2.452） 19.46±3.262）小剂量组 11.00±1.5711.89±2.041） 15.04±3.262） 20.33±2.553）4） 27.42±2.933）5）大剂量组 10.96±2.5111.43±1.981） 15.29±2.152） 23.88±1.873）5） 29.01±2.223）5）

由表1可知，第1天、第7天，各组大鼠体质量比较差异无统计学意义（P>0.05）；第14天，模型组体质量较正常组明显下降（P<0.01），大、小剂量组体质量较模型组显著增加（P<0.05），说明运脾消食颗粒可促进营养物质的吸收，增加大鼠体质量；第21天、第28天，大、小剂量组及消食片组与模型组比较差异均有统计学意义（P<0.05，P<0.01），大、小剂量组与消食片组比较差异有统计学意义（P<0.05），说明以上2种药物均能使厌食大鼠的体质量增加，运脾消食颗粒的疗效优于健胃消食片。

由表2可知，第1天，各组大鼠摄食量相当（P>0.05）；第7天，模型组、消食片组、小剂量组、大剂量组大鼠摄食量与正常组比较均显著下降（P<0.01），摄食量平均下降23.6%，而这4组间比较差异无统计学意义（P>0.05），造模成功。给药1w后（即第14天），大、小剂量组的摄食量较模型组显著增加（P<0.05），而给药2w后（即第21天），消食片组与模型组比较差异才有统计学意义（P<0.05），说明运脾消食颗粒比健胃消食片起效更快；第21天，大、小剂量组与消食片组比较差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01），说明运脾消食颗粒的疗效优于健胃消食片；同时，第27天，大、小剂量组与正常组比较差异无统计学意义（P>0.05），结果表明，这2组大鼠的摄食量已经基本恢复至正常水平。

2.2 各组大鼠血清CCK-8、Zn含量变化比较

结果见表3。

表3 各组大鼠血清CCK-8、Zn含量变化比较 （±s）

表3 各组大鼠血清CCK-8、Zn含量变化比较 （±s）

注：与正常组比较，1）P<0.01；与模型组比较，2）P<0.05，3）P<0.01

8（pg/mL） Zn（mg/L）±77.35 1.4451±0.4148±99.211） 0.8002±0.39121）消食片组 12 302.17±81.023） 1.4373±0.40503）小剂量组 12 273.67±84.933） 1.2079±0.41112）大剂量组 12 281.42±99.533） 1.4536±0.42583）

由表3可知：与正常组比较，模型组血清中CCK-8含量明显升高，Zn含量明显降低（P<0.01）；与模型组比较，大剂量组、小剂量组、消食片组血清中CCK-8含量明显降低，Zn含量显著升高（P<0.05，P<0.01）。以上结果表明，2种药物对厌食症大鼠模型体内CCK-8的生成均有抑制作用，能明显提高厌食症大鼠血清Zn水平，且效果相当（P>0.05）。

3 讨论

中医学认为小儿厌食症的发生主要是由于饮食不节、喂养不当所致，脾运失职，胃纳失司，运化功能失常是其发病的根本原因，现代食物结构的改变、自然环境的污染等是其发病的外在因素。因此治疗厌食症的关键在于运脾和胃、消食导滞。运脾消食颗粒是在中医理论指导下，结合长期临床经验和现代药理研究，在朱丹溪保和丸基础上加减化裁而来。其主要药物包括焦三仙、炒白术、半夏、陈皮、鸡内金、胡黄连、佩兰等，具有运脾和胃、消食化滞之功，经多年临床应用，对小儿厌食症疗效良好。方中焦三仙为消食化滞之要药；白术燥湿和中，补脾益胃消食，与焦三仙共为君药，取其消补兼施之意。鸡内金具有和胃健脾、宽中消食之作用，陈皮有理气降逆、调中开胃之功效，善治中焦脾胃气滞湿阻之证。半夏具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结之功。以上三药，共为臣药，收行气化滞、健脾消食止呕之效。胡黄连可清小儿疳积之热，佩兰芳香化湿醒脾，共为佐使，辅助君、臣之药达运脾和胃、消食化滞之功［3］。该方消补并举，标本同治，补而不滞，消导而不伤正，故对厌食症有较满意的疗效。

胆囊收缩素（CCK）具有刺激胰酶分泌、引起胆囊收缩、促进某些激素释放等多种作用。近年来发现CCK在摄食控制中有重要作用，其分泌状态受食物成分的影响，脂肪和蛋白质是刺激CCK释放最有效的物质。其中CCK-8为内源性CCK的重要功能片段，有研究表明大鼠进餐后血中CCK-8立即升高2～6倍，并在 15min内恢复到基础水平［4］。

本实验结果显示，厌食症大鼠模型血清中CCK-8含量显著高于正常动物，同时摄食量明显下降，并持续3w以上，表明用高脂高蛋白饲料喂养大鼠，可导致动物内源性CCK-8的基础浓度异常增高，从而长期抑制动物的摄食量。这一结果提示，小儿厌食症的发生发展可能与饮食过于肥甘厚腻而导致CCK-8分泌增多有关。用运脾消食颗粒治疗的模型动物，摄食量显著高于模型组，血清中CCK-8浓度明显低于模型组，接近于正常动物，表明该药对CCK-8的分泌有明显抑制作用，能够促进动物摄食。

现代医学研究证明，儿童食欲正常与否与人体微量元素Zn密切相关。正常人唾液中每分子味觉素含2个Zn离子，体内Zn缺乏时味觉素作用减弱，缺Zn还可以引起舌黏膜增生和角化不全，阻塞味蕾小孔使味觉敏感度下降，从而引起厌食［5］。本次实验研究结果提示，模型组大鼠血清Zn明显低于正常水平，治疗后，血清Zn的含量增加，与临床研究结果一致，为运脾消食颗粒治疗小儿厌食症提供了有力的实验依据。

［1］杜晨光.童胃冲剂治疗小儿厌食症的实验研究［D］.石家庄：河北医科大学，2007.

［2］汪受传，杜永平，张月萍，等.特制饲料喂养幼龄大鼠建立小儿厌食症模型［J］.南京中医药大学学报，1999，15（3）：148-150.

［3］杜晨光，丁培杰，曹颖，等.运脾消食方对厌食症儿童唾液淀粉酶活性、血红蛋白含量影响的研究［J］.中国实验方剂学杂志，2013，19（12）：315-318.

［4］Fink H，Rex A，Voits M，et al.Major biological actions of CCK-8：a critical evaluation of research findings［J］.Experimental Brain Research，1998，123（1/2）：77-83.

［5］范华，周士伟，高铁祥，等.针刺四缝穴对实验性脾虚大鼠血清锌及胃排空率的影响［J］.中国针灸，2007，27（8）：595-597.