猪场圆环病毒与副猪嗜血杆菌混合感染的诊疗

张立恩，刘海林

（1.河南省卫辉市畜牧局，河南 新乡 453100；2.河南省新乡市动物疫病预防控制中心，河南 新乡 453003）

猪场圆环病毒与副猪嗜血杆菌混合感染的诊疗

张立恩1，刘海林2

（1.河南省卫辉市畜牧局，河南 新乡 453100；2.河南省新乡市动物疫病预防控制中心，河南 新乡 453003）

猪圆环病毒病可以导致免疫抑制，使猪的体质下降，猪感染圆环病毒后，一些平时很难侵入猪体的细菌便会乘虚而入，引起猪发病。最近，一中小型猪场的保育猪发生了猪圆环病毒病与副猪嗜血杆菌病混合感染，发病后，保育猪死亡严重，经过半月的治疗，目前猪群已经稳定，现将诊疗情况报告如下：

1 流行情况及临床症状

该猪场存栏母猪200头，最近未引进过种猪，也未购买过仔猪。半月前，刚转到保育舍的300头仔猪开始发病。发病后使用磺胺药拌料，未见效果。死亡115头。病猪主要表现为体温高达41～42℃，发病后采食量明显下降。精神不好，腹式呼吸，且呼吸急促，个别猪拉稀，消瘦，皮肤黄染。倒提仔猪，发现腹股沟淋巴结肿大明显。经调查得知，该场保育猪已经防疫过猪瘟疫苗、伪狂犬病病毒基因缺失疫苗和蓝耳病经典毒株疫苗，未防疫过高致病性蓝耳病疫苗和圆环病毒疫苗。

2 剖检病理变化

病死猪剖检后喉头和会厌软骨呈现明显的黄染。心包积液，心冠脂肪黄染。肺脏与胸腔粘连，肺脏表面有一层黄白色的纤维素样物质。脾脏和肝脏表面也有纤维素样物质附着。肾脏土黄色，表面有数量不等的圆形白色梗死灶。肠道充血、出血，肠粘膜脱落，回盲口未见溃疡。腹股沟淋巴结肿大为正常淋巴结的4～5倍，颜色苍白。

图1 圆环病毒电泳结果

3 实验室诊断

3.1 PCR检测

无菌操作采集病死猪的淋巴结、肺脏等组织进行核酸提取，然后将核酸提取物加入到反应体系中，放PCR仪中进行扩增。扩增产物进行凝胶电泳，然后放凝胶成像系统中观察是否有目的条带出现。圆环病毒PCR试剂盒购自北京世纪元亨公司。

3.2 细菌分离培养及生化鉴定

3.2.1 采集肺脏，无菌操作取深层肺组织涂布TSA平板。置于37℃恒温培养箱中培养24～48h后观察细菌的生长。挑取大小约为0.5～1mm左右的灰白色或半透明的疑似菌落进行革兰氏染色并镜检。挑取革兰氏阴性、细丝状或杆状的菌落接种于新的TSA培养基进行纯化培养，直到菌落形态、大小、色泽一致为止。

3.2.2 在鲜血琼脂培养基上均匀涂布所分离的菌株，并做2条平行线状接种金黄色葡萄球菌，37℃条件下培养24～48h，看是否有“卫星现象”出现，同时观察是否有溶血的现象。

3.2.3 取在副猪嗜血杆菌培养基上48h后的疑似菌落，分别接种生化鉴定管，生化鉴定管中同时加入5μL 0.01%的NAD，置于37℃5%的CO2培养箱，培养24～48h，观察生化反应的结果。

4 结果

4.1 如图，1号为被检样品，2号为阴性对照，3号PCV-Ⅱ阳性对照，4号为PCV-Ⅰ阳性对照。结果显示被检样品与PCV-Ⅱ阳性对照处于同一水平位置，被检样品为PCV-Ⅱ阳性，详见图1。

4.2 在含NAD的TSA平板、鲜血琼脂平板培养基上生长良好。在含NAD的TSA固体培养基上培养24h后的疑似菌落呈现针尖状的圆形、灰白色半透明大小为0.5～1mm。

4.3 挑取可疑菌落在鲜血琼脂平板上出现明显的“卫星现象”。即在有葡萄球菌菌苔的附近待测菌落生长较大，而远侧没有菌落生长。且无溶血现象

4.4 将HPS菌株接种于微量生化鉴定管后，结果显示吲哚试验阴性，接触酶试验、硝酸盐还原试验阳性，并可以发酵麦芽糖、葡萄糖、鹿糖、果糖等碳水化合物。

5 防治

5.1 首先封场，禁止车辆和人员随意出入，并对发病猪与健康猪群进行隔离，发病猪与健康猪由不同的饲养人员进行饲养，避免人员流动造成感染。对猪场所有圈舍和用具等进行严格的消毒。

5.2 对发病猪进行治疗，联合使用板蓝根注射液和氟苯尼考注射液，颈部肌肉注射，两侧各一针，连用3～5d。

5.3 对猪场15日龄以上健康猪群，进行猪圆环病毒灭活疫苗的紧急免疫接种，同时，健康猪群使用氟苯尼考拌料，预防副猪嗜血杆菌的传播和感染。

6 结果和讨论

6.1 猪场按照上述措施进行了科学的防控，半月后进行回访，了解到目前该猪场疫情已经停止发展，猪群正处在康复阶段。

6.2 经走访调查和实验室监测，发现最近两年我市中小型猪场圆环病毒发病率非常高，今后一段时间猪场应当加大对于圆环病毒的免疫和监测力度，科学的评估该病在猪场的发生风险，积极采取预防措施，降低因圆环病毒而引起的损失。

6.3 圆环病毒病是一种免疫抑制性疾病，猪感染圆环病毒后体质下降，导致其他一些细菌和病毒也会乘虚而入，因此，猪感染圆环病毒后还要注意控制细菌的继发感染。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．10.047