规模化胚胎移植肉羊供体羊处理研究

2015-11-28罗永明阿依努尔亚森张国庭郑新宝陈静波新疆畜牧科学院畜牧研究所乌鲁木齐830000

中国草食动物科学 2015年5期

霍飞，罗永明，阿依努尔·亚森，张国庭，董红，郑新宝，陈静波（新疆畜牧科学院畜牧研究所，乌鲁木齐 830000）

规模化胚胎移植肉羊供体羊处理研究

霍飞，罗永明，阿依努尔·亚森，张国庭，董红，郑新宝，陈静波
（新疆畜牧科学院畜牧研究所，乌鲁木齐 830000）

以优良的肉羊品种萨福克羊、无角陶赛特羊、特克塞尔羊为对象，研究繁殖季节大规模绵羊胚胎移植中，供体羊生产情况、同期发情处理方法、配种方式、手术采胚次数对受精率及可用胚胎数的影响。结果表明：①青年羊、初配母羊、经产母羊可获得可用胚胎数分别为6.70枚±2.97枚、10.90枚±5.36枚和11.69枚±5.40枚；②3种常用同期处理方式孕酮海绵栓+PG、PG+PG、CIDR+PG可获得可用胚数分别为4.20枚±3.84枚、10.10枚±6.28枚和11.20枚±6.96枚；③0.1mL鲜精2次人工授精、0.3mL鲜精2次人工授精、2次自然交配和1次腹腔镜输精可以获得受精率分别为62.74％、80.50％、97.43％和96.96％；④供体羊手术采胚0次、1次、2次和2次以上可以获得可用胚数分别为12.75枚±7.01枚、8.63枚±4.27枚、5.26枚±3.86枚和4.34枚±4.13枚。

供体；可用胚；受精率；绵羊；胚胎移植

供体羊的超排处理及配种是羊胚胎移植生产的重要环节，关系到供体羊出胚情况及胚胎移植生产成效。供体羊年龄、同期处理方法、配种方式及手术采胚次数对供体羊胚胎受精率及可用率有较大影响。

1 材料与方法

1.1 材料

PG（上海计生所），孕酮海绵栓（国产），CIDR（新西兰），FSH（宁波三生）。

1.2 方法

（1）供体羊在第1次同期处理发情后9～12d开始超排，采用递减法注射FSH 4d，在注射FSH第3天进行第2次同期处理。供体羊发情后12～36h配种，配种后5～6d手术采胚。

（2）分别对10～12月龄青年羊、1.5周岁初配羊、2.5～5.5周岁经产母羊进行超排处理，同期采用注射2次PG方式，发情后进行2次自然交配，分析不同年龄段供体羊超排出胚情况。

（3）采用3种方法即孕酮海绵栓+PG、PG+PG、CIDR+PG对3组供体羊同期化处理，并超排，配种采用自然交配方式，对比分析同期处理方法对供体出胚情况的影响。

（4）采用3种配种方式即人工授精、自然交配、腹腔镜子宫角深部输精对超排后的供体羊进行配种，对比分析供体羊不同配种方式的受精率。

（5）依据供体羊手术采胚次数将供体羊分为4组，进行超排、配种、手术采胚，对比分析手术采胚次数对供体羊出胚的影响。

（6）受精率采用卡方分析，平均可用胚数采用一维方差分析。

2 结果

2.1 不同年龄阶段供体羊超排处理结果

不同生产阶段供体羊超排结果见表1，以经产母羊获得受精率及可用胚数最高，初配母羊与青年羊、经产母羊受精率间差异不显著（P＞0.05），青年羊与经产母羊受精率差异显著（P＜0.05）。初配母羊、经产母羊与青年羊平均可用胚数差异极显著（P＜0.01）。

表1 繁殖季节不同年龄阶段供体羊超排处理结果

2.2 不同同期发情方法处理供体羊的超排手术采胚结果

由表2可见，以CIDR+PG处理方法获得受精率、平均可用胚数最高。PG+PG、CIDR+PG处理方式与孕酮海绵栓+PG处理方式受精率、平均可用胚数均差异极显著（P＜0.01）。

表2 繁殖季节3种同期发情方法供体超排手术采胚结果

2.3 供体羊不同配种方式的受精结果

4组供体羊超排后采用3种配种方式进行配种，结果见表3。以自然交配、腹腔镜输精获得受精率最高。自然交配、腹腔镜子宫角输精受精率与大精液量人工授精受精率差异显著（P＜0.05），与小精液量人工授精受精率差异极显著（P＜0.01）。大精液量人工授精受精率与小精液量人工授精受精率差异显著（P＜0.05）。

表3 供体羊不同配种方式受精结果

2.4 供体羊不同手术次数的采胚结果

对供体羊根据采胚次数分组处理，结果由表4可见，以采胚0次及采胚1次供体羊可获得较理想的出胚结果。手术采胚0次、1次与手术采胚2次及2次以上受精率差异均极显著（P＜0.01），手术采胚1次平均可用胚数与0次、2次、2次以上差异显著（P＜0.05），手术采胚0次与采胚2次、2次以上差异极显著（P＜0.01）。

表4 不同手术次数供体羊采胚结果

3 讨论

3.1 发育阶段对供体羊超排的影响

供体羊发育阶段对超排结果影响较大［1］。10～12月龄的部分纯种肉羊已达到性成熟，可通过激素超排处理获得数量可观的可用胚胎，急需扩繁纯种肉羊的生产单位可以将不满周岁的母羊作为胚胎移植供体羊。相同处理方式下，初配母羊与经产母羊在受精率与可用胚数方面差异不显著（P＞0.05），初配母羊在手术采胚后，恢复一段时间后即可参加配种，进一步缩短了扩繁周期［2］。

3.2 同期处理方法对供体羊超排的影响

用3种不同同期处理方式对比了国产海绵栓与进口CIDR对供体羊的处理效果，结果表明，国产海绵栓与进口CIDR在供体羊受精率及可用胚胎数方面存在一定差距。可能是由于国产海绵栓孕酮纯度不够或随着国产海绵栓在母羊阴道停留时间增加，抑菌能力减弱及阴道分泌物增多对阴道及子宫颈口造成污染，撤栓时产生恶臭气味，并且有一定比率的栓上带血。进口CIDR与母羊阴道接触面积小，尿液及阴道分泌物能及时排出，污染较国产海绵栓大幅度降低。用国产海绵栓撤栓时对母羊阴道用抗生素和生理盐水进行清洗，有助于减少污染，但依然没有获得理想的受精率。因此，在供体羊的处理过程中尽量使用进口CIDR［3］。

3.3 不同配种方式对供体羊出胚的影响

配种是胚胎移植供体羊处理过程中非常重要的一个技术环节，直接影响整个胚胎移植的效果，采用合理的配种方式能够获得更多的可用胚胎［5］。2次自然交配和腹腔镜子宫角输精能够获得较为理想的受精率［6］。腹腔镜输精，种公羊采精一次可以输3～5只供体羊，大大减少了种公羊的饲养量，进一步扩大了优秀种公羊的利用率，但对技术及硬件条件要求较高。种公羊数量不多的生产单位可以采用人工授精和自然交配结合的方式进行配种，即供体母羊发情12h后人工授精1次，24h后自然交配1次。若全部采用人工授精，也应当增加输精的精液量［7］。

3.4 手术冲胚次数对供体羊出胚的影响

研究结果表明，随着手术采胚次数的增加，供体羊的受精率与可用胚数降低［8］。这与手术采胚对子宫的损伤有很大关系。多次采胚供体羊，子宫、输卵管、卵巢成不同程度的粘连，在手术过程中向子宫喷撒生理盐水，保持子宫及输卵管的湿润度或在采胚结束后向供体羊腹腔内灌注生理盐水可减轻粘连程度。在开刀过程中要尽量避免大量出血，采胚后要尽量将子宫及输卵管表面的血冲洗干净。在挑选供体羊时，尽量挑选采胚次数少的供体羊。

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S826.2

2095-3887（2015）05-0077-03

10.3969/j.issn.2095-3887.2015.05.022

2015-07-01