免疫固定电泳和骨髓细胞形态学检查在多发性骨髓瘤临床分期中的价值比较

崇慧峰， 孙 芸， 王传发， 汪亚勤， 曹春鸾， 周 萍

(铜陵市人民医院检验科，安徽铜陵244000)

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种骨髓中单克隆浆细胞异常增殖的恶性肿瘤，在我国发病率约为1/10万，约占造血系统肿瘤的10%，多发于中老年人群。随着我国人口的老龄化，MM的发病率有逐年增高的趋势。由于MM的临床表现可出现在全身多个系统，患者首诊科室较杂，常会造成误诊和漏诊。因此，应将患者的临床表现与各项辅助检查相结合，以便早期发现和诊断MM［1］。而MM的实验室辅助诊断指标中以M蛋白和骨髓瘤细胞比例最为重要。因此，我们回顾性统计了89例MM患者血清免疫固定电泳(immunofixation electrophoresis，IFE)检验结果和骨髓细胞形态学检验结果，并将患者按International Staging System(ISS)分期标准进行临床分期，探讨它们之间的相关性以及临床意义。

材料和方法

一、患者来源

选取铜陵市人民医院2008年5月至2015年3月住院收治89例初诊MM患者，其中男58例、女31例，年龄35～84岁。根据ISS分期标准将MM患者分为ISSⅠ～Ⅲ期，其中ISSⅠ期18例、ISSⅡ期23例、ISSⅢ期48例。

二、诊断标准

参考《血液病诊断及疗效标准》［2］进行诊断和分期。具体诊断标准参考世界卫生组织(World Health Organization，WHO)相关标准判定，主要诊断指标:(1)骨髓浆细胞增多＞30%;(2)活检证实为浆细胞瘤;(3)血清M蛋白增多(IgG＞35 g/L、IgA＞20 g/L，尿本周蛋白＞1 g/24h)。次要诊断指标:(1)骨髓浆细胞增多(10%～30%);(2)血清M蛋白存在，但低于主要诊断指标;(3)有溶骨病变;(4)正常免疫球蛋白减少50% 以上(IgG＜6 g/L、IgA＜1 g/L、IgM＜0.5 g/L)。患者有MM相关临床表现，具备至少1项主要指标和1项次要指标，或具备3项次要指标且其中必须包含第(1)项和第(2)项，即可诊断为MM。临床分期参照ISS分期标准，Ⅰ期:β2微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)＜3.5 mg/L，血清白蛋白(albumin，Alb)＞35 g/L;Ⅱ期:介于Ⅰ期和Ⅲ期之间;Ⅲ期:β2-MG＞5.5 mg/L。

三、仪器和试剂

采用法国Sebia全自动电泳仪及原装配套试剂进行IFE;采用日立7600全自动生化分析仪及原装配套试剂测定血清Alb;采用美国雅培i1000化学发光分析仪及原装配套试剂测定血β2-MG。

骨髓细胞形态学分析:行骨穿后，常规骨髓涂片瑞-姬染色，按FAB分型方法进行镜检分类，计数200个有核细胞，计算骨髓瘤细胞所占百分比。所有检测均严格按操作规程进行。

四、统计学方法

采用SPSS18.0软件进行统计分析，计数资料比较采用配对χ2检验;骨髓瘤细胞比例以±s表示，均数比较采用秩和检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、ISS各期MM患者蛋白分型结果

89例MM患者中ISSⅠ期18例(20.2%)、ISSⅡ 期 23例 (25.8%)、ISS Ⅲ 期 48例(53.9%)。ISS各期中均以IgG型为主(占50%以上)。见表1。

表1 ISS各期MM患者蛋白分型结果比较 ［例(%)］

二、ISS各期MM患者骨髓瘤细胞检测结果

ISSⅡ期和Ⅲ期MM患者骨髓瘤细胞比例明显高于ISSⅠ期(P＜0.05)，而 ISSⅡ期和Ⅲ期之间骨髓瘤细胞比例差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表2 ISS各期MM患者骨髓瘤细胞检测结果比较(±s，%)

表2 ISS各期MM患者骨髓瘤细胞检测结果比较(±s，%)

注:与Ⅰ期比较，*P＜0.05

Ⅲ48 27.2±17.2*合计89 23.1±15.8

三、ISS各期MM患者M蛋白和骨髓瘤细胞检测阳性率比较

IFE以检出M蛋白为标准，骨髓细胞形态学方法以骨髓涂片中骨髓瘤细胞比例≥10%为标准。ISSⅢ期患者M蛋白阳性率和总体阳性率均明显高于骨髓细胞形态学(P＜0.05)。ISS 3期之间的M蛋白和骨髓瘤细胞阳性率差异有统计学意义(χ2=7.356，P=0.025;χ2=6.967，P=0.031)。见表3。

表3 MM患者ISS各期M蛋白和骨髓细胞形态学阳性率比较 ［例(%)］

讨 论

MM临床表现比较复杂，并缺乏特异性，由于其起病缓慢，症状隐匿，而骨髓瘤细胞增生程度、浸润部位及程度不同，导致各脏器受损程度各不相同，常会引起骨痛、病理性骨折、贫血、反复感染、乏力和肾功能不全等一系列临床症状［3］。MM患者所处肿瘤分期阶段不同，预后也不同，治疗措施也有差别。尽管临床有报道ISS分期不能用于治疗风险分层，也不能提供很好的肿瘤负荷评估［4］，但业内普遍认为确立多发性骨髓瘤的诊断和免疫球蛋白分型诊断后，应用ISS进行分期，可为判断预后和指导治疗提供依据。

本研究将89例MM患者按ISS分期标准进行分期，对各期IFE和骨髓瘤细胞检验结果进行分析，结果显示ISSⅢ期患者最多，占53.9%;Ⅰ期最少，占20.2%。ISSⅡ期和Ⅲ期患者骨髓瘤细胞比例明显高于ISSⅠ期患者(P＜0.05)，而ISSⅡ期和Ⅲ期之间骨髓瘤细胞比例差异无统计学意义(P＞0.05)。另外，ISS各期患者的免疫球蛋白分型结果与总体结果相近，ISSⅡ期和Ⅲ期患者M蛋白阳性率明显高于ISSⅠ期(P＜0.05)，与骨髓细胞形态学结果相吻合。

本研究结果还显示，ISSⅠ期和Ⅱ期患者M蛋白和骨髓细胞形态学的阳性率差异无统计学意义(P＞0.05);但ISSⅢ期患者M蛋白的阳性率和总体阳性率均明显高于骨髓细胞形态学(P＜0.05)。这一方面提示IFE敏感性高于骨髓形态学方法，与文献报道［5-6］相一致;另一方面也说明这种优势可能主要体现在ISSⅢ期患者中，ISSⅠ期和Ⅱ期患者这两种方法可能还比较一致，进一步提示虽然血清IFE的灵敏度较高，但MM诊断中如能结合骨髓细胞形态学检验结果，其诊断价值更高。而对于出现M蛋白增高未达诊断标准，同时骨髓浆细胞比例低于最低标准(＜10%)的情况，此时更应强调浆细胞的质量，即如果存在原幼浆细胞和异常形态浆细胞，除外引起骨质破坏的其它疾病，仍可诊断为MM。而恶性浆细胞在骨髓中常呈不均匀灶性分布，不能以一次骨髓穿刺涂片中骨髓瘤细胞比例高低为定论，需多次、多部位骨髓穿刺才能做出正确诊断。

另外，本研究结果显示IFE对M蛋白的检出率为92.1%，略低于相关文献报道［7-8］，与鲁真真等［6］和马海梅等［9］的报道一致，他们报道 MM 患者中均存在一定的未分泌型。免疫分型结果显示最常见的是 IgG型(55.1%)、IgA型占14.6%、IgM型占2.2%、轻链型占20.2%、未分泌型占7.9%，与相关报道基本一致。表明IFE还可直接判断M蛋白的类型，有较高敏感性和特异性，可作为MM的常规检测方法［10］。另外，由于MM患者经治疗好转后，M蛋白可减轻或消失，所以IFE还可通过检测M蛋白来评估MM患者的病情和疗效，以便临床及时调整治疗方案。

综上所述，MM患者随着ISS分期的增高，M蛋白阳性率和骨髓瘤细胞比例有增高的趋势，说明这两项指标与MM的临床分期及预后有一定联系，可以与β2-MG、Alb等一同评估病情及预后。另外，在MM诊断中，血清IFE灵敏度高于骨髓细胞形态学方法，主要体现在ISSⅢ期患者中。因此，IFE结合骨髓细胞形态学检查的诊断价值更高。

［1］杨蕊雪，高露，施菊妹.多发性骨髓瘤的诊断进展与分期［J］.中国癌症杂志，2014，24(10):727-731.

［2］张之南，沈悌.血液病诊断及疗效标准［M］.3版.北京:科学出版社，2007:232-234.

［3］王爱梅.多发性骨髓瘤误诊18例分析［J］.医学信息(上旬刊)，2011，25(4):2454-2455.

［4］KDAJ M.Immunoglobulin chain/light chain pairs(HLC，HevyliteTM)assays for diagnosing and monitoring monoclonal gammopathies［J］.Adv Clin Exp Med，2014，23(1):127-133.

［5］康懿，刘华，王蕾，等.血清κ/λ轻链比值及蛋白电泳在诊断多发性骨髓瘤中的临床应用［J］.检验医学，2011，26(10):675-678.

［6］鲁真真，栾芳，鞠瑛，等.免疫固定电泳在多发性骨髓瘤辅助诊断中的应用价值［J］.临床输血与检验，2014，16(2):125-128.

［7］肖敏敏，陈健康，徐小明.实验室检查在多发性骨髓瘤临床诊断中的价值［J］.安徽医药，2012，16(1):78-80.

［8］张晓晖.多发性骨髓瘤的实验室诊断评价［J］.现代中西医结合杂志，2012，21(31):3505-3506.

［9］马海梅，孟瑞芳，邹文蓉，等.208例多发性骨髓瘤细胞形态学与血清免疫球蛋白比对分析［J］.中国实验诊断学，2010，14(5):718-720.

［10］刘汐盈，孙淑艳，宋媛媛.血清免疫固定电泳、蛋白电泳、免疫球蛋白及轻链定量对多发性骨髓瘤临床诊断价值探讨［J］.中国实验诊断学，2010，14(5):680-681.