化学发光免疫测定在梅毒螺旋体抗体检测中的临床应用

范红松眉山市人民医院检验科，四川眉山 620010

化学发光免疫测定在梅毒螺旋体抗体检测中的临床应用

范红松
眉山市人民医院检验科，四川眉山 620010

目的 探讨化学发光免疫法（CLIA法）应用于检测梅毒螺旋体抗体（TPA）的临床价值。方法 随机选取2014年12月—2015年1月间的100例健康人为对照，将300例TPA阳性患者作为研究对象，分别进行TPPA和TRUST检测和CLIA法检测，以CV、灵敏度等为指标，评价CLIA法的临床应用价值。 结果 ①组内、组间在不同TPA浓度下的CV均＜10%。且CLIA分析仪的灵敏度（1/16）高于TPPA（1/80），差异有统计学义（P＜0.05）。②CLIA、TPPA检测的阳性率分别为87.7%（264/300）、86.3%（250/300），差异无统计学意义（P＞0.05），但均高于TRUST法42.3%（127/300）（P＜0.05）。其中阴性组患者血清检测的阴性率均为100%。 结论 CLIA法检测TPA的结果准确率高，CLIA分析仪灵敏度高、不易受诸多外在干扰和限制、携带污染率低，值得推广应用。

化学发光免疫测定法；梅毒螺旋体抗体；临床应用

梅毒螺旋体（TP）是梅毒病的常见致病因素之一，其临床表现复杂、具有传播性和全身性，很容易误诊、漏诊，严重者可致全身的病变、损害等[1]。据相关的调查结果显示[2]，从2006年至今，梅毒发病率呈现明显的上升趋势，检测患者血清中的TPA是其目前诊断方法的主要根据之一。因此，怎样才能对患者进行有效的、准确的、迅速的检测有着十分重要的临床意义，CLIA的研究能够为诊断梅毒病提供可靠的检测依据，以保证尽早治疗，具有灵敏度高、特异性强的特点。该研究选取2014年12月—2015年1月间该院收治的400例患者为研究对象，对比分析了使用CLIA检测和其他方法检测的结果，得到较满意结果，现将其总结果汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该研究中研究对象共400例：阳性患者共300例，均是于2014 年12月—2015年1月来该院就诊的，且符合梅毒诊断标准[3]，另外阴性对照患者共100例。其中，年龄8～20岁37例，21～30岁96例，31～40岁245例，41～50岁22例，平均年龄（38±1.8）岁。阳性患者组男、女患者分别有219例、181例。阴性患者组男、女患者分别有67例、33例。

入选标准：年龄在8～50岁之间；自愿作为试验对象者。临床诊断明确者。

[作者简介]范红松（1970.9-），男，四川眉山人，大专，检验技师，研究方向：医学检验免疫。

排除标准：需要维持服用精神类安定药、镇静药的患者以及心脏、肝、肾功能有损害者；患有其他重症疾病者。

1.2 方法

①采集本试验中所有研究对象的血清（空腹状态下）、留样。②将留取的血清标本置于备好的真空促凝管内，分离血清，低温冷藏（4～8℃）。③检测：用CLIA（试剂盒，I2000型，雅培，美国）、TPPA（试剂盒，日本）、TRUST（试剂盒，中国）方法参照其各自说明书进行检测。④重复性实验：取S/CO（吸光度/临界值）24（高）、3（中）、0.05（低）的三个水平，对组内及组间分别在连续的2 h和20d内进行TPA标准品的CLIA检测5次、2次。计算其灵敏度。⑤检测携带污染率：参照国际标准[4]，使用富士G1200CLIA分析仪对TPA的高、低值标准品进行检测，各连续、平行三次得h1、h2、h3、l1、l2、l3值。⑥干扰试验：将干扰物（胆红素、三酰甘油、血红蛋白）加入到不同TPA浓度的患者血清中，以富士G1200CLIA分析仪进行检测，记录、计算。⑦在CLIA检测后，对阳性组、阴性组患者分别进行TPPA、TRUST检测，对比3种方法的结果，进行分析。

1.3 观察指标

①以变异系数（CV）为观察指标评价仪器重复性。②以携带污染率为指标评价其仪器携带污染情况。携带污染率=（l1-l3）/ （h3-l3）×100%。

1.4 统计学方法

应用SPSS 17.0软件进行数据分析，对计数资料采用χ2检验进行统计处理，分析数据结果，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2 结果

2.1 组内、组间重复性和灵敏度实验结果

经重复性实验，组内、组间在不同TPA浓度下的CV分别为6.72、8.31、8.51和6.69、8.44、8.49，均＜10%。且CLIA分析仪的灵敏度（1/16）高于TPPA（1/80），差异有统计学意义（χ2=6.442,P＜0.05）。2.2 干扰实验、携带污染率结果

经CLIA分析仪检测的TPA携带污染率为0.14%，且干扰物加入前后测得的结果差异为3.21%（S/CO）。

2.3 3 种方法检测结果对比

CLIA、TPPA、TRUST法的阳性率分别为 87.7%（264/300）、86.3%（250/300）、42.3%（127/300），前两者差异无统计学意义（χ2=0.768,P＞0.05），但均高于TRUST法（χ2=45.300,χ2=42.169,P＜0.05）。其阴性组患者血清检测的阴性率均为100%。

3 讨论

目前，在世界范围内梅毒发病率已经逐年上升，其严重危害着人类的健康生活。因此，各种诊断方法也不断发展、应用，但早期的、有效的诊断方法尚不完善，有待于进一步研究，它们各有各的优势和缺点，随着现代医学、科研与科技的不断发展和进步，人们更加倾向于特异性强、准确、有效的TPA检验方法[5-7]。TPA是一种特异性的TP感染患者体内诱导产生的抗体，其往往最早出现，却迟迟不消失，甚至在治愈后、乃至终生的患者仍然可以检出TPA[8]。梅毒患者经感染后还可以产生一种nTsAb，这种抗体无特异性，容易受到多种因素、多种疾病的影响，所以经常使患者血清检测结果呈现假阳性。同时，在使用TPPA法对患者进行检测的时候也会得出假阴性结果，故这种检测方法在梅毒患者不同期中都存在一定的盲区，都不如CLIA法准确、特异性强[9-10]。

该研究经对正常人和TP患者血清的检测，从灵敏度、重复性、特异性、准确度等方面探讨了CLIA法的应用特点和优势，结果为：CLIA分析仪的灵敏度为1/16；且该法的TPA携带污染率、阳性率、阴性率分别为0.14%、87.7%（264/300）、100%。表明CLIA法重复性良好、精密度优良，检测结果准确，且优于TPPA和TRUST。林炳柱[11]等研究者通过应用3种不同的方法（RPR法、CLIA法、TPPA法）检测研究对象的血清TPA，进而探讨了其各自临床价值，研究发现：CLIA法准确、方便、特异性强，与该研究结果相似。

综上所述，使用CLIA法作为检验TPA的手段，其结果准确率高；并且CLIA分析仪灵敏度高、不易受诸多外在干扰和限制、携带污染率低，值得推广应用。

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Clinical Application of Chemiluminescence Immunoassay in Detection of Treponema Pallidum Antibody

FAN Hong-song
Department of Clinical Laboratory,Meishan People's Hospital,Meishan,Sichuan Province,620010 China

Objective To explore the clinical value of chemiluminescence immunoassay(CLIA)in the detection of treponema pallidum antibody (TPA).Methods 100 healthy people and 300 patients treated in our hospital during December 2014 and January 2015 were selected as the research object,all of whom underwent detection of TPA by TPPA,TRUST and CLIA.The clinical value of CLIA was evaluated based on its coefficient of variation (CV)and sensitivity.Results①Inner-group CV and across-group CV under varying concentration of TPA were lower than 10%,and the sensitivity of CLIA was higher than that of TPPA,1/16 vs 1/ 80,and the difference was statistically significant,P＜0.05.② the positive rates by CLIA and by TPPA were 87.7%（264/300）and 86.3%（250/300）,and the difference was not statistically significant P＞0.05,but both of them were higher than that by TRUST, 42.3%（127/300）with statistically significant differences,P＜0.05.Conclusion CLTA is worthy of promotion in the detection of TPA due to its higher accuracy and sensitivity,strong anti-interference capability,and low carry-over rate.

Chemiluminescence immunoassay;Treponema pallidum antibody;Clinical application

R446.6

A

1674-0742（2015）08（a）－0072-02

2015-05-05）