不同贮藏条件对桃花粉生活力的影响

王会良+潘家宜+何华平+等

摘要：为了探索不同贮藏条件对桃（Amygdalus L.）花粉生活力的影响，以湖北省农业科学院桃种质资源圃保存的桃种质资源为试材，运用SAS 9.1.3对8个品种（系）、3种贮藏条件下花粉活力变化情况进行比对分析。结果表明，不同贮藏条件下不同桃品种（系）的花粉生活力和耐贮藏能力不同。花粉生活力随着贮藏时间的延长而下降，其中，常温干燥条件下贮藏的花粉萌发率下降最快，冷藏条件下下降较慢，冷冻条件下保存效果最好，所以桃花粉适宜的贮藏条件为干燥、冷冻环境。

关键词：桃（Amygdalus L.）；花粉；生活力；贮藏条件

中图分类号：S662.1；Q944.42 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）20-5046-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.20.030

Effect of Storage Condition on Pollens Viability of Peach

WANG Hui-liang1，PAN Jia-yi2，HE Hua-ping1，GONG Lin-zhong1，WANG Fu-rong1，LIU Yong1，ZHU Xiao-min1

（1. Institutel of Fruit and Tea， Hubei Academy of Agricultural Science， Wuhan 430209， China；

2. College of Horticulture and Garden， Yangtze University， Jingzhou 434023， Hubei， China）

Abstract： In order to explore the effects of different storage conditions on peach （Amygdalus L.） pollen viability， eight peach cultivars were collected in peach germplasm nursery of Hubei Academy of Agricultural Sciences.The change of pollen viability of the eight peach cultivars under three kinds of storage conditions were compared and analyzed using SAS 9.1.3. The results showed that the pollen viability and storage capability of different cultivars changed with the storage conditions and time in different ways. The longer storage time， the lower pollen viability. The pollen viability under natural conditions decreased very fast， while those under refrigeration conditions （0～4℃） decreased slower； and the storage effect was the best under frozen condition. The studies suggested that dry and frozen was suitable conditions for peach pollens storage.

Key words： peach （Amygdalus L.）； pollen； viability； storage condition

花粉保存时间的长短以及花粉萌发率的高低对于同一果树不同品种间授粉树的搭配以及不同开花期品种间杂交授粉的成功与否具有十分重要的意义。目前针对其他果树花粉生活力及贮藏方面的研究较多，但在桃（Amygdalus L.）花粉生活力和贮藏方面研究较少。试验选取在湖北省表现较好的8个桃品种或优系，通过不同温度的贮藏处理，然后测定花粉萌发率，对桃花粉的生活力、花粉贮藏的适宜条件及花粉的耐贮性进行了比较，旨在为桃种质资源的花粉保存和育种技术研发奠定理论基础。

1 材料与方法

2012年春在湖北省农业科学院果树茶叶研究所桃资源圃采集24-30、33-20、47-17、99-5-5、99-8-56、YP36-3、极早518、紫金红8个桃品种（系）的花粉，采集时间为桃花的大蕾期；将花苞采下后带回实验室，手工剥落花粉粒，置于折叠好的纸盒内低温烘干。待花药开裂散粉后收集装入指形管中，用脱脂棉封口，分别置于室内自然温度（4月，20～25 ℃，硅胶干燥）、冷藏（4 ℃）及冷冻（-20 ℃）条件下干燥保存。每品种（系）花粉重复保存3份。定期测定花粉萌发率，室温条件下分别在散粉当日和贮藏10、20、30、40、80 d后测定；冷藏分别在贮藏20、30、40、80 d后测定；冷冻贮藏分别在贮藏40、80 d后测定。花粉生活力指花粉形成后随时间进程的萌发能力。

花粉萌发率的测定采用离体法[1]。培养基中添加10%蔗糖、2%琼脂和0.1%硼酸，并加水定容，加热充分溶解混匀，然后将配好的培养基添加到带凹槽的载玻片上，待培养基冷凝后，用HB铅笔上的橡皮将花粉均匀撒其上面，然后放入底部垫湿滤纸的培养皿中，于25 ℃条件下培养，4 h后用显微镜观察花粉萌发情况。3次重复，每重复6个视野。应用DPS统计分析软件进行数据标准化处理和方差分析，采用SAS 9.1.3软件进行邓肯氏新复极差法（（Duncans multiple range test，DMRT）多重比较。endprint

2 结果与分析

2.1 不同桃品种（系）新鲜花粉萌发率的差异

散粉当日和冷藏条件下测定的花粉萌发率情况见表1。由表1可以看出，多数桃品种（系）花粉的萌发率较高，以极早518品种的萌发率最高，为69.5%；而紫金红的萌发率最低，仅为26.8%；参试品种（系）平均花粉萌发率为47.9%。分析结果表明，不同桃品种（系）之间花粉生活力存在极显著的差异（P<0.01），说明花粉萌发率在很大程度上取决于品种（系）的遗传特性。

2.2 不同贮藏条件对桃花粉生活力的影响

2.2.1 相同贮期不同贮藏条件下花粉生活力的比较 贮藏40 d后不同贮藏条件对桃花粉生活力的影响情况见图1。由图1可见，在贮期同为40 d时，常温保存的花粉萌发率多数降到30%以下，尤其是33-20和47-17这2个品系更是降到了11.5%和6.5%，是8个参试品种（系）中最低的，并且全部8个参试品种（系）在常温条件下保存的花粉其平均萌发率只有21.3%，是3种贮藏方式中花粉平均萌发率最低的；而冷藏保存的花粉萌发率下降较少，萌发率最高的为99-8-56，达55.6%，8个参试品种（系）的花粉平均萌发率为42.2%；至于冻藏保存的花粉萌发率下降则最少，萌发率最高的是99-8-56，达85.8%，8个参试品种（系）的花粉平均萌发率为61.7%，是3种贮藏方式中花粉平均萌发率最高的。经多重比较得知，3种贮藏条件的花粉平均萌发率两两间存在极显著的差异（P<0.01），即冻藏贮藏的花粉萌发率极显著高于冷藏贮藏的花粉，冷藏贮藏的花粉萌发率又极显著高于常温贮藏的花粉。

2.2.2 冷藏和冻藏条件下花粉生活力的比较 分别将冷藏和冻藏40、80 d的花粉测定萌发率，结果见图2。由图2可见，贮藏40 d时，所有品种（系）在冻藏条件下的萌发率均高于冷藏条件的萌发率，并且除了24-30、33-20外，其他品种（系）的冻藏花粉萌发率与冷藏花粉萌发率之间均达到了极显著差异（P<0.01）。随着贮藏时间的延长，在贮藏80 d时，除了33-20外，其他品种（系）的冻藏花粉萌发率均明显高于冷藏的，平均高出18.6%。总的趋势是冷藏花粉的生活力下降程度明显大于冻藏花粉，在80 d时，大部分品种（系）的萌发率是冻藏高于冷藏。

2.3 常温条件贮藏后桃花粉生活力的变化

常温贮藏条件下桃花粉生活力的测定情况见图3。由图3可以看出，在常温条件下，8个品种（系）随贮藏时间的不同花粉萌发率存在很大的差异，但总体趋势是随贮藏时间延长萌发率下降，不同品种（系）间下降的速度存在一定的差异。这个变化趋势出现两种情况，一种情况是采收当天萌发率最高，随后逐渐下降，主要是47-17和99-5-5这2个品系，其中47-17在贮藏10～20 d间下降幅度很大，由40%下降到20%以下，99-5-5在整个贮藏期内萌发率则是缓慢下降，直到80 d时还保持一定的萌发率；另一种情况是采收当天萌发率较高，但贮藏一段时间后萌发率有一定的上升，随后逐渐降下来，24-30、33-20、紫金红等6个品种（系）都是如此，这可能与采收当日花器官未发育完全、而后进行了二次发育有关。总的来说，经过80 d的常温贮藏，所有品种（系）的萌发率都降到了较低的水平，表明大多数品种的花粉在常温干燥条件下贮藏时间较短，80 d后都降到了20%以下，尤其是47-17和紫金红，更是降到了4.2%和7.6%。

2.4 冷藏条件贮藏后桃花粉生活力的变化

冷温贮藏条件下桃花粉生活力的测定情况见图4。由图4可以看出，在冷藏条件下，桃花粉萌发率随贮藏时间延长总体上呈下降趋势，但下降速度比室温贮藏要缓慢得多，花粉萌发率的变化趋势也是出现两种情况，一种情况是花粉生活力一直呈下降趋势，如33-20、47-17、99-5-5、99-8-56等品系，并且下降趋势都较为缓慢；另一种情况在冷藏的前一阶段花粉生活力呈上升趋势，到30 d左右时达到最高峰，随后下降，如24-30、YP36-3、极早518、紫金红等品种（系），其中，24-30的下降幅度最大，其他的下降趋势都较为平缓。相比室温贮藏，低温冷藏条件下花粉生活力保持较好，贮藏80 d左右萌发率仍较高，大都保持在20%以上，有的甚至保持在40%以上，如99-8-56、YP36-3、极早518等。

2.5 冻藏条件贮藏后桃花粉生活力的变化

冷冻贮藏条件下桃花粉生活力的测定情况见图5。由图5可见，随着冻藏时间的延长，除了33-20，其他桃品种（系）花粉的萌发率下降均极为缓慢。在贮藏80 d后，几乎所有品种（系）都保持了高萌发率，除33-20、47-17未到30%外，其他的萌发率均达到了40%以上，其中99-8-56、YP36-3更是高达78.5%和72.9%。冻藏40 d后，所有桃品种（系）的平均萌发率高达61.7%；80 d后，平均萌发率也保持在52.7%。由此可见，不同桃品种（系）花粉的耐贮性不同，冷冻贮藏能较好的保持多数品种（系）的花粉生活力。

3 讨论

试验结果表明，不同桃品种（系）的花粉生活力不同，并且其耐贮藏能力也有差异，不同品种（系）间花粉生活力及耐贮性不同，这是由遗传特性、遗传基因基础不同所决定的。这个结果与前人在其他植物上的研究结果是一致的[2，3]。

花粉生活力除受自身遗传因素影响外，也受到外界环境条件的影响[4，5]。试验结果表明，同一桃品种（系）在不同贮藏条件下，花粉生活力的变化差异很大，多数品种在冷藏条件下生活力下降较慢，并以冻藏的花粉生活力下降最慢。综合两种低温贮藏条件下花粉的萌发情况，则在冻藏条件下长期保存花粉更为有效。至于更低温度条件如液氮（-196 ℃）贮藏对桃各品种花粉生活力的影响有待今后继续研究。

参考文献：

[1] 胡适宜.植物胚胎学实验方法（一）：花粉生活力的测定[J].植物学通报，1993，10（2）：60-62.

[2] 王钦丽，卢龙斗，吴小琴，等.花粉的保存及其生活力测定[J].植物学通报，2002，19（3）：365-373.

[3] 王文莉，赵兰勇，朱翠英，等.平阴玫瑰花粉生活力及其贮藏条件的研究[J].园艺学报，2009，36（4）：593-598.

[4] 刘 佳，李 靖，陈 栋，等.青脆李花粉生活力及贮藏性研究[J].四川农业大学学报，2014，32（3）：288-292.

[5] 髙健军，王 芳，王 舰.不同贮藏温度对不同马铃薯品种花粉生活力的影响[J].青海大学学报（自然科学版），2014，32（3）：11-15.endprint